苯乙胺类药物分析

1、第七章 苯乙胺类药物的分析,第一节、苯乙胺类药物的基本结构,R1:苯环的3，4位上有2个邻位的酚羟基，属于儿茶酚胺，R2,:H、CH3、异丙基、叔丁基等，R3： H、CH3含H药物居多,常见的苯乙胺类药物,盐酸多巴胺,盐酸克仑特罗,硫酸沙丁胺醇,盐酸麻黄碱,盐酸氨溴索,结构与性质,1. 酚羟基，易氧化变色，可发生三氯化铁反应，可与金属离子配位成色,易被空气、光、热氧化，色泽变深，碱性溶液下易变色。 2.具有脂烃氨基侧链，氨为仲氨氮，显弱碱性。 3. 手性碳原子，具旋光性，可用于分析鉴别,4. 溶解性 游离碱难溶于水，易溶于有机溶剂，其盐可溶于水 5.紫外吸收特性 具有苯环特征吸收带，根据吸收波

2、长进行定性、定量,6. 取代基：苯环上的取代基，如具芳伯氨基的盐酸克仑特罗，盐酸氨溴索； 可用重氮化偶合反应鉴别、亚硝酸钠滴定法测定含量,第二节 鉴别试验,三氯化铁反应（表7-2,绿色,氧化反应：多数具有酚羟基，易被I2，H2O2，K3Fe（CN）6等氧化而呈现不同颜色。 Chp（2010）肾上腺素，盐酸异丙肾上腺素，重酒石酸去甲肾上腺素，均利用该反应作为定性鉴别反应,肾上腺素红,棕色多聚体,酸性，I2氧化,肾上腺素,盐酸异丙肾上腺素红,Na2S2O3,淡红色,无色,酸性，I2氧化,酸性，I2氧化,与甲醛硫酸反应 酚羟基取代的药物，可与甲醛在硫酸中反应，形成具有醌式结构的有色化合物。 颜色:红

3、色或紫红 重酒石酸去甲肾上腺素:玫瑰红-橙红-深棕色,4.芳环侧链有氨基醇-双缩脲反应 双缩脲试剂： 0.1 g/ml NaOH 试剂A ,0.01g/mLCuSO4试剂B 检测蛋白质等物质的特异性反应，与双缩脲试剂作用,产生紫色反应. ChP(2010): 鉴别麻黄碱和盐酸去氧肾上腺素,盐酸麻黄碱,NaOH +CuSO4,紫色,乙醚,水层蓝色,乙醚层紫红色,盐酸去氧肾上腺素,NaOH +CuSO4,紫色,乙醚,乙醚层不显色,水层蓝色,水层紫色,5. 与亚硝基铁氰化钠反应（Rimini反应） 脂肪族伯胺的专属反应,6. UV与IR (表7-3,紫外、红外吸收特性进行定性、定量分析。 ChP收录

4、利用UV鉴定苯乙胺类拟肾上腺素（表7-3） IR是专属性鉴别，作为此类药物的鉴别方法之一,紫外特征吸收,红外特征吸收：上述药物还可采用红外吸收光谱进行鉴别,第三节、杂质检查 (p226-228,杂质来源 生产过程中存在酮体氢化还原制备工艺，氢化不完全易引入酮体残存。 检查方法 UV法（含量测定法,一）酮体的检查,检查原理 利用酮体在310nm波长处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收，规定一定浓度溶液在310nm波长处的吸收度限制酮体的量,紫外分光光度法检查酮体的条件及要求,二）光学纯度的检查 大多数苯乙胺类拟肾上腺素药物分子结构中存在手型碳原子，具有光学活性特征。需要做光学纯度检查。

5、 检查方法：比旋度值测定,对于手性药物光学纯度检查的最佳方法是实现对映体分离分析，常用色谱法和电泳法,二）有关物质检查 盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇,盐酸特布沙林等药物 检查方法：TLC,TLC法检查有关物质 例：盐酸去氧肾上腺素、硫酸沙丁胺醇,检查方法：避光操作。取本品，加甲醇制成每1ml含20mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取上述溶液适量，加甲醇稀释成每1ml中含0.10mg的溶液，作为对照溶液。吸取上述两种溶液各10l，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇氯仿浓氨溶液(80:5:15)为展开剂，展开后，晾干，喷以重氮苯磺酸试液使显色。供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较，不

6、得更深,盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 有关双胍 取本品1.00g ，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，照纸色谱法（附录 A）试验，精密吸取上述溶液0.2ml ，分别点于两张色谱滤纸条(7.5cm 50cm) 上，并以甲醇作空白点于另一色谱滤纸条，样点直径均为0.5 1cm ；照下行法，将上述色谱滤纸条同置展开室内，以醋酸乙酯乙醇水(6:3:1) 为展开剂，展开至前沿距下端约7cm 处，取出，晾干，用显色剂（取10铁氰化钾溶液1ml ，加10 亚硝基铁氰化钠溶液与10氢氧化钠溶液各1ml ，摇匀，放置15min，加水10ml与丙酮 12ml，混匀）喷其中一张点样纸条（有关双胍显红色

7、带，Rf值约为0.1 ），参照此色谱带，在另一张点样及空白纸条上，剪取其相应部分并向外延伸1cm ，并分剪成碎条，精 密吸取甲醇各20ml分别进行萃取后，照分光光度法（附录 A），在232nm 的波长处测定吸收度，不得过0.48,检查方法： HPLC法 盐酸氨溴索的检查方法: 流动相: 0.01 mol/L NH4H2PO4-乙腈(50:50);柱C18, 检测波长: 248 nm,检查方法： HPLC法 盐酸氨溴索的检查方法: 流动相: 0.01 mol/L NH4H2PO4-乙腈(50:50);柱C18, 检测波长: 248 nm 供试品溶液：1mg/ml 对照品溶液：10 g/ml,调灵

8、敏度：对照品进样20l,主峰高为满量程的20%25%测定：进对照品和供试品各20l，记录谱图的保留时间是主成分出峰时间的2倍，供试品各杂质峰的面积的和不得大于对照品溶液主峰的面积1/3,第四节 含量测定,一）非水溶液滴定法(15种) 原料药 脂烃胺基侧链，显弱碱性 ，在水溶液中用酸直接滴定没有明显突跃；在非水酸性溶剂中，能被冰醋酸均化到溶剂醋酸根水平，相对碱强度显著增强,一）基本原理,BH+A- + HClO4 BH+ClO4 + HA,HA的存在会干扰反应进行程度，需要采取措施，除去或降低滴定反应产生HA的酸性，可以通过加醋酸或者醋酸汞溶液,二）一般方法,精密称取供试品适量，加冰醋酸1030

9、ml溶解（可温热，放冷），加各品种项下规定的试液、指示剂12滴（或电位滴定法指示终点），用高氯酸滴定液滴定。需做空白试验,三）问题讨论,1.适用范围 pKb 810 冰醋酸做溶剂 1012 冰醋酸与醋酐混合溶液 12 醋酐做溶剂,三）问题讨论,2.酸根影响 醋酸介质中，酸性如下： HClO4 HBr H2SO4 HCl HNO3 H3PO4 有机酸 有机弱碱的盐均用高氯酸滴定,三）问题讨论,3.滴定剂的稳定性 非水滴定所用醋酸，具有挥发性，温度和贮存条件会影响滴定剂的浓度,冰醋酸的体积膨胀系数为1.110-3/ 药典规定标定时和测定试样时温差超过10时，标准溶液应重新标定，若未超过10则可根据

10、下式将高氯酸浓度加以校正,三）问题讨论,4. 终点指示方法 常用电位滴定法和指示剂法 结晶紫(或萘酚苯甲醇), 蓝绿色 (黄绿色) 5.其他干扰,ChP 2010 硫酸沙丁胺醇含量测定,二）溴量法 盐酸去氧肾上腺素及其注射液、重酒石酸间羟胺 反应摩尔比为13,Br22KI2KBrI2,I22Na2S2O32NaINa2S4O6,三）亚硝酸钠法 盐酸克伦特罗分子结构含有芳伯胺基，可用亚硝酸钠法滴定。 反应摩尔比为11,四）紫外分光光度法与比色法 Ch.p (2010) UV法:盐酸甲氧明注射液,重酒石酸间羟胺注射液 比色法 盐酸克仑特罗栓，可发生重氮化偶合反应,对照法定量,盐酸多巴胺测定: 显色

11、剂:硫酸亚铁-酒石酸盐测定波长: 520 nm 分子结构中的酚羟基可与Fe2+配位显色,五）HPLC法,盐酸肾上腺素注射液、重酒石酸去甲肾上腺素注射液、硫酸沙丁醇片、缓释片、盐酸氨溴口服、片剂、胶囊、缓释胶囊等,硫酸沙丁醇片测定,色谱条件: 柱C18, 流动相:甲醇-NaH2PO4 (pH 3.10)(15:85)检测波长:276nm n：大于3000,取10片片剂,精密称定。称取其质量 ，流动相溶解定容至50 ml ，过滤 ，取续滤液10 ml 定容至50 ml ,得供试液,精密量取20 l 进样,得AX .取浓度96 l /ml对照品溶液,同法测定,得AS,第五节 体内药物分析 盐酸克仑特罗:GC-MS测定 提取:溶剂萃取(生物样品预处理) 净化: 固相柱,SPE萃取 测定: GC-MS测定 220oC-280oC