WHO第五版人类精液及精子宫颈粘液相互作用之精液分析的改变.ppt

1、背景,1980年出版第一版“人类精液及精子宫颈精液实验实检验手册”（生育调节） 1987年出版第二版（生育调节、不育症的诊治） 1992年出版第三版（生育调节、不育症的诊治、环境污染） 1999年出版第四版（辅助生育技术-ICSI、环境污染,背景,以往精液分析存在问题： 检测方法不一 结果带有主观性、不客观、不真实 精确度低、重复性差 对男性生育力的评估、临床诊断应用价值很有限 因此，需要一个标准化的手册,2010年出版第五版 随着近年来男科学和生殖医学的快速发展，基于循证医学的证据，不少原有的概念和诊疗建议需要修订； 为此，WHO组织成立了专门的委员会来负责这项工作，编写制订了新一版的手册，

2、以期达到更好的标准化，提高精液分析的质量,修改WHO人类精液检查手册的目的,提高精液分析各参数的准确性 简化方法，提高可操作性 提供质控结果不良时的应对提示及细节 利于实验室间的标准化 提高精液分析各参数的临床应用价值（结果判断评述） 提高疗效评估的准确性,第5版手册提纲,一、精液分析 标准程序：常规分析、抗体包被精子、非精子成分； 可供选择的试验：精子多发性缺陷指数、白细胞免疫细胞化学染色、精子宫颈粘液相互作用、精浆生化、CASA； 研究试验：活性氧、顶体反应、精子卵细胞相互作用作用、精子透明带结合、去透明带仓鼠卵穿透试验、精子染色质检测等,精液分析”部分的修订主要涉及,精子浓度和精子总数的

3、测定； 精子活动力分级； 精子形态学评估； 精液参考值范围,精液采集和体积测定,根据重量间接计算精液体积，假定精液比重为1g/ml（实际为1.014g/ml)来计算。（首选方法） 1.秤取容器的重量， 2.秤取装有精液的容器的重量， 3.计算重量之差（g=ml) 精确测量精液体积（精度为0.1mL,精液采集和体积测定,不推荐方法（在收集管中的转移,精子浓度和精子总数的测定,简化精液稀释方法及增加计数池的面积，每份标本均采用两次取样、两次稀释和两次计数，每次计数至少200个精子，且两次计数在95%可信区间内。 一次射精中的精子总数能够提供反映睾丸功能的更为精确的信息，因此，新版手册强调必须精确地

4、测定精液体积,精子浓度和精子总数的测定,弃用精子密度的概念，改为精子浓度 精子浓度：每毫升精液中的精子数 参考值下限：精子浓度（106/L）：15 原因： 浓度：指一定体积的精液中所含的精子数目 密度：单位体积所具有的精子质量,精子浓度和精子总数的测定,强调一次射精的总精子数更能反映睾丸的生精功能。 精子总数：每次射出精液中的精子总数（精子浓度*精液量） 参考值下限： 精子总数（106/次射精）：39,精子浓度和精子总数的测定,2004年,临床意义： 总精子数：反映睾丸精子产出量的直接指标 精子浓度：受精囊腺和前列腺分泌液量的影响,精子浓度和精子总数的测定,显微镜的要求： 精子浓度和活力必须用

5、相差显微镜 无论是手工方法还是CASA都要求使用 原因： 相差显微镜下：精子头部呈亮色 普通显微镜下：精子头部呈灰色 发亮的精子头部容易与灰色的杂质区分,精子浓度和精子总数的测定,20倍正相差物镜下精子图像,精子浓度和精子总数的测定,精子计数的质控要求： 每份标本重复取样2次，各自计数200个精子；且两次计数在95%可信区间内。结果可以接受（取两次的均值）；超过误差范围的必须重新取样重复计数2次,检查注意事项,1、禁欲时间：第3-7天 2、环境：单独取精室，安静，舒适 3、取精方式：手淫或取精器 4、不要太劳累 5、询问：是否排出全部精液 是否收集全部精液,精子活动力检测,精子前向运动的情况与

6、受孕具有密切的关联；新版手册中一个重要的修订是精子活动力的分类方法。 精子活动力的分类 前向运动精子（PR)a+b 非前向运动精子（NP)c 不运动精子（IM)d 参考值下限：前向运动精子（PR，%）：32,每份标本制备双份涂片进行重复分析 每张图片至少分析200个精子 且两次结果差异在95%可信区间内。结果可以接受（取两次的均值）；超过误差范围的必须重新读片（不必重新制片）。 参考值下限：正常精子形态（%）：4,精子形态学,WHO不同版本精子形态学相关内容的比较,精子形态学：染色方法,推荐采用Papanicolaou、Shorr或Diff-Quik染色法 使用光学显微镜观察，精子头部顶体区为

7、浅蓝色，顶体后区为深蓝色，中段略呈红色，尾部为蓝色或红色。残余的胞浆小滴染成粉红色或橙红色,精子畸形： 头部畸形：锥形头，梨形头，圆形头（无顶体，小），无定形头，空泡样头，顶体区域小的等。 颈和中段畸形：不对称、中断和头部连接点粗、细 尾部畸形：短尾，成角弯折，卷尾 过多的胞浆残余体：精子头部大小的1/3,精子形态学,精子形态学,精液的参考值范围,新版手册对正常生育男性额精液参考值范围进行了修订。 为了制订参考值范围，采纳了3大洲8个国家的4001900分最近使女方生育的男性的精液标本的原始数据。 在数据统计方面，由于各项精液参数的高值都不太可能对生育产生危害，所以采用单侧参考值区间，并以第5

8、百分位数作为参考值下限对于精液常规分析参数来说更为合适，而不需要像一般的统计学分析那样采用双侧参考值区间和第2.5百分位数,新版手册制定的参考值范围,WHO 版本 2 3 4 5 年 1987 1992 1999 2010 参考值 正常 正常 参考 下限 精液量.（ml) 2.0 2.0 2.0 1.5 总数（m) 40 40 40 39 精子深度（M/ml) 20 20 20 15 前向运动（%） 50 50 50 32 存活（%） 50 75 75 58 正常形态（%） 50 30 （15） 4,新版手册制订的参考值范围,常见的精液异常,常见的精液异常,常见的精液异常,无精子症：精液内无精子（2次或以上精液分析） 处理： 离心力3000 时间：15min 鉴别： 隐匿性无精子症：可以看到精子 无精子症：始终未见精子,常见的精液异常,丈夫精液人工授精适应症 1、男方因少精、弱