课题1DNA的粗提取与鉴定

1、课题1 DNA的粗提取与鉴定原理解析：1 . DNA粗提取的实验原理：(1 )本实验用鸡血为实验材料的原因是：鸡血的红细胞有 ，细胞核中有 DNA和蛋白质组成的 。因为哺乳动物(如兔子等)血液的红细胞中没有 ，因此不能用哺乳动物的血液为本实验的材料。(2 )提取DNA的原理是：利用 DNA在的氯化钠溶液中溶解度最低，形成沉淀析出；再利用 DNA不溶于，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的 DNA。(3 )制备鸡血细胞液的原理：用质量浓度为 0.1g /m L的柠檬酸钠作抗凝剂。 用吸管吸去 上清液的目的是去掉血浆，留下 ，因为血浆中没有 DNA。向含有DNA的浓度较高的

2、氯化钠溶液中加入 ，稀释氯化钠溶液，使DNA的溶解度下降。这时，加上不断的搅拌，溶解度下降的DNA逐渐呈。再通过过滤，滤去蛋白质，就可获得DNA的黏稠物了。氯化钠溶液的浓度与 DNA溶解度之间的关系 可用图曲线表示：2 . DNA鉴定的原理：鉴定所用的试剂为二苯胺。DNA与二苯胺作用而显现 。鉴定时溶液颜色的深浅与溶液中DNA含量的多少有关。问题讨论：1 .提取鸡血中的 DNA时，为什么要除去血液中的上清液？ 因为上清液是 ，不含血细胞，而沉于试管底部的鸡血细胞的 所以提取鸡血细胞中的DNA时，要除去血液中的上清液。2 步骤1和步骤3中都需要加入蒸馏水，两次加入的作用相同吗？为什么？不同。步骤

3、 1中加入蒸馏水是为了得到浓度低于血细胞内部浓度的溶液。这样会大量渗入血细胞中使血细胞胀破而得到DNA。步骤3中加入蒸馏水是为了使氯化钠的物质的量浓度达到DNA溶解度最低点。这时， DNA分子就可以从氯化钠溶液中析出。3 . DNA的直径约为2nm，实验中出现的丝状物的粗细是否表示一个大小？实验中出现的丝状物是肉眼可以观察到的，这种丝状物的直径要比径2nm大许多倍，所以实验中出现的丝状物的粗细并不表示一个DNA4 .实验中有 3次过滤，作用及使用的纱布层数有何区别？ 步骤 层。 步骤 稠物， 滤液，中才有DNA ,DNA分子直径的DNA分子的直 分子直径的大小。1中的过滤是为了过滤鸡血细胞液得

4、到含的滤液，使用的纱布为4中的过滤是为了得到从低浓度的氯化钠溶液中析出的附在纱布上的含 所以所用的纱布为多层。第三次过滤在步骤 6中，目的是得到再溶解后的 所以只要用纱布即可。的黏5，实验中有6次搅拌，搅拌时应注意些什么？除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝向，并且在析出 DNA、DNA再溶解和提取中各步搅拌都要轻缓， 玻璃棒不要直插烧杯底部，防止 DNA断裂。6 .实验中两次使用蒸馏水的目的分别是什么？第一次使用蒸馏水是在第一步，加水是为了使血细胞 膨胀破裂，加水后必须充分搅拌， 不应少于5min ,使血细胞充分破裂；第二次加蒸馏水是在第三步，加水是为了稀释NaCI溶液，使 从NaCI溶液中析

5、出。加速染色质中 DNA 中，NaCI溶液是为 中，加的NaCI溶液7 实验中有3次加NaCI溶液，目的分别是什么？在步骤2中，当加入NaCI后，必须充分晃动烧杯，使两者混合均匀， 与分离，使DNA充分游离并溶解在 NaCI溶液中。在步骤 5了 DNA的再溶解，不过这时溶液中蛋白质含量已很少。在步骤8的浓度比前2次低得多，但还是为溶解8 影响实验效果的因素有哪些？(1 )提取核物质时，搅拌充分与否，会影响细胞破裂程度，进而影响到提取的DNA的量。(2 )沉淀DNA时，必须用，在冰箱内15 C以下至少存放 24h o(3 )用玻璃棒搅拌时，玻璃棒不要直接插入烧杯底部，搅拌要轻缓，以便获得完整的

6、DNA分子。巩固练习 A组一、选择题1、在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠檬酸钠的目的是A .防止凝血B .加快 DNA 析出 C .加快 DNA溶解 D .加快凝血A B C D2、下列操作中，对 DNA的提取量影响较小的是.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质.搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增加 在用酒精沉淀 DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却.含有DNA溶液呈A .紫色.在“ DNA的氯化钠(0.015mol / L )溶液中加入二苯胺试剂后，加热煮沸5min ,B .蓝色 C .砖红色D .红色

7、的粗提取实验”中，有两次 DNA的沉淀析出，其依据的原理是0 . 14mol / L的氯化钠中的溶解度最低95 %的酒精中能沉淀析出B 第一次是D 第一次是 DNA在物质的量浓度为 DNA在冷却的体积分数为A .两次都是C .两次都是 ，第二次是 ，第二次是.在向溶解 DNA的NaCI溶液中不断加入蒸馏水的目的是ABCD.加快溶解DNA的速度.加快溶解杂质的速度.减小 DNA的溶解度，加快 DNA减小杂质的溶解度，加快杂质的析出DNA所用的溶液是析出.提取含杂质较少的A .体积分数为 90 %的冷却的酒精IC .体积分数为 95 %的冷却的酒精7 . DNA的粗提取和鉴定实验，与下列哪项原理无

8、关A . DNA 在0.14mol / L NaCI溶液中的溶解度最低体积分数为95B .加热的、D .加热的、体积分数为%的酒精90 %的酒精B . DNA易被龙胆紫染成紫色C .在DNA溶液中加入二苯胺，加热后产生蓝色D .加入95 %的冷酒精，DNA会从溶液中析出NaCI溶液浓度之间关系的是LDNA溶解度DNA溶解度9、1011NbCI 浓度(moVrjB* DNA藩解度叮4 NaCI 敞痰(mol/L) C下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是A、 氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大B、人体的血液不可代替鸡血进行该实验C、柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D、 利用DNA易溶于酒

9、精的特点可除去DNA中的部分杂质 .对三次过滤的叙述不正确的是ABCD第一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物中第二次过滤时使用多层纱布，DNA存在于纱布上的黏稠物中.第三次过滤后，DNA.上述B、 C均正确在DNA的粗提取实验中， 程均用到蒸馏水，其作用在于ABCD前者使血细胞破裂， 前者用来溶解血细胞, 前者用来分离细胞核, 前者防止细胞核破裂,存在于滤液中，可进一步除去非提取鸡血细胞中的核物质和析出后者稀释氯化钠溶液后者用来溶解后者用来保护后者使 DNADNADNA 析出DNA物质DNA粘稠物的操作过8 下列图示中能反映 DNA溶解度与巩固练习 B组DNA的粗提取和鉴定实验”中有五次用玻璃

10、棒搅拌。1 在(I )第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液是为了 (2 )第二次搅拌加 2mol / L的NaCI溶液的滤液是为了使其与DNA(3 )第三次搅拌加蒸馏水至0 . 14mol / L的NaCI溶液是为了 (4 )第四次搅拌放入 2mol / L NaCI溶液中纱布上的黏稠物是为 .(5 )第五次搅拌体积分数为95 %的酒精为了 2.关于DNA粗提取的实验材料的选择，研究者经过多次实验效果的比较，最终选择鸡血做 实验材料。请据图回答问题：，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中(1) 鸡血细胞中红细胞含细胞数目较多，可以提供丰富的 O实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全

11、血，主要原因O(3)生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若它们按实验要求完成实验步骤后,o.程序，使细胞更易分离。结果是,这是因为这些动物和人类一样，红细胞中都没有但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。这是因为在提取之前，最好增加 6 血类血细融42)(4)若选用动物肝脏做实验材料，2AB3、红细胞淋巴细胞C(l )实验材料选用鸡血细胞液,而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中含有较高含量的 OB所示(2 )在图A所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是，通过图的步骤取得滤液，再在溶液中加入2 mol / LNaCI溶液的目的是;图中 C所示实验步骤中加蒸馏水的目的是4 .下面为格里菲斯用

12、肺炎双球菌在小鼠身上进行的转化实验：将无毒性的 R型活细菌注射入小鼠体内，小鼠不死亡；将有毒性的S型活细菌注射入小鼠体内，小鼠死亡；将加热杀死的S型细菌注射入小鼠体内，小鼠不死亡；将无毒性的 R型活细菌和加热杀死的 S型细菌混合注射入小鼠体内，小鼠死亡，并 在小鼠体内发现活的 S型细菌，分析回答：(1) 实验说明 对小鼠无毒害作用；实验说明在小鼠体内 加热杀死的S型细菌的作用下可以转化为 O(2) 该实验可以得出这样一个结论：在加热杀死的S型细菌型中，必然含有促成这一转化的O(3) 这一实验并不能证明 DNA是遗传物质，若想证明 DNA是遗传物质这一结论，应怎 样设计实验：课题： DNA 的粗提取与鉴定1A 2B 3B 4B 5C 6C 7B 8C 9B1 . ( I)加速细胞破裂(2 )混合均匀( 3)稀释 NaCI 溶液，析出含 DNA 的黏稠物 ( 5 )提取含杂质较少的 DNA2 .(1) 含红细胞核 红 DNA(2)鸡血细胞中 DNA 相对含量高肝细胞中