二苯偶氮碳酰肼溴甲酚紫Fe(Ⅲ)体系的共振瑞利散射、二级散射和倍频散射光谱研究毕业论文

1、单位代码 密 级 公 开 学 号 200904034033 学士学位论文二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的共振瑞利散射、二级散射和倍频散射光谱研究论文作者： 指导教师： 学科专业： 化 学提交论文日期： 2013年 月 日 论文答辩日期： 2013年 月 日 学位授予单位： 重庆文理学院中 国 重 庆2013年5月 二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的共振瑞利散射、二级散射和倍频散射光谱研究 摘要：在ph 3.2的酸性介质中，溴甲酚紫可离解出br-而以+2价阳离子形式存在，且fe()在酸性溶液中表现出强氧化性，fe()被还原成fe()，该fe()可与bcp2+以1：2结合形成淡黄色络

2、合物，且该络合物与二苯偶氮碳酰肼再络合形成黄色缔合物，导致分子体积增大，电中性缔合物形成后与水分子间形成了疏水性界面，增大微粒粒径。此时将引起体系共振瑞利散射(rrs)、二级散射(sos)和倍频散射(fds)的显著增强，其最大rrs，sos，fds波长分别位于468nm、519nm和620nm。三种散射信号的增强(irrs, isos和ifds)在一定范围内与fe()浓度成正比，方法线性范围分别是rrs为03.5mg/l、sos为04mg/l、fds为04 mg/l；检出限分别为0.25g/l (rrs)、0.4g/l (sos)和0.3g/l (fds)，据此建立了灵敏测定fe()的共振线性

3、(rrs)和共振非线性光散射(rnls)的分析法。研究了反应体系的rrs、sos和fds光谱特征，并以rrs法考察了体系介质条件选择、ph值、共振探针用量、bcp浓度及共存物质等因素对散射体系的影响，并对反应机理和散射光谱增强的原因进行了讨论。结果表明方法选择性好，灵敏度高，操作简便，可用于水样中痕量fe()的测定，结果与原子吸收法一致，回收率在98.19%101.4%之间，相对标准偏差小于2.5%。关键词：溴甲酚紫 ;二苯偶氮碳酰肼 ; fe() ；共振瑞利散射；二级散射；倍频散射；phenylazoformic acid 2-phenylhydrazide -bromcresol purp

4、le - fe() of resonance rayleigh scattering system, the secondary scattering and double frequency scattering spectroscopy chemistry specialized 2009levels of undergraduate course (1)classpu chun lin instructor: jiahong heabstract: in hydrochloric acid solution of ph 3.2，bromcresol purple dissociation

5、 of br - and + 2 valence cations form and fe () in acidic solution showed strong oxidizing, fe reduction of () fe (), the fe () can be combined with bcp2 + 1:2form bright yellow complex compound, and the complex compound and 2 benzene azo yellow carbon hydrazide and complexing association, lead to m

6、olecular volume increases, neutral association after formation of the interface formed between the water molecules and the hydrophobic, increasing the particle size. this will cause the system resonance rayleigh scattering (rrs), secondary (sos) and double frequency scattering (fds) significantly en

7、hanced, and its biggest rrs, sos, fds wavelength at 468 nm, 519 nm and 620 nm. three scattering signal enhancement ( irrs, isos and ifds) within a certain range and fe () is directly proportional to the concentration, the method of linear range respectively is rrs is 0 3.5 mg/l, sos is 0 4 mg/l, the

8、 fds is 0 4 mg/l; detection limit were 0.25 mu g/l (rrs), 0.4 mu (sos) and 0.3 g/l mu g/l (fds), on the basis of establishing the sensitive determination of fe () resonance (rrs) linear and nonlinear resonance light scattering (rnls) analysis. rrs of reaction system was studied, the fds and sos spec

9、trum characteristics, and to investigated rrs method system medium of choice, ph value, dosage of resonance probe, bcp concentration and coexisting substances on the influence of the scattering system, and the reaction mechanism and the cause of the enhanced scattering spectrum are discussed. result

10、s show that the method is selective, high sensitivity, simple operation, can be used to trace fe in water samples () determination, the results are consistent with atomic absorption method, the recovery rate was between 98.19% 101.4%, relative standard deviation less than 2.5%. keywords: bromocresol

11、 purple ,phenylazoformic acid 2-phenylhydrazide; fe (); rayleigh scattering; the secondary scattering; frequency multiplication scattering1 引言铁是一种重要的工业原料，由铁制成的合金由于具有优良的机械性能、良好的可塑性等特性而被广泛应用于冶金、地质、环境、化工、材料科学等领域。铁是人体内重要的微量元素之一，人体含铁约2.54克，是人体所含微量元素中较多的一种。铁是构成血液红细胞中血红蛋白、肌肉中肌红蛋白等的主要成分。它广泛参与多种酶的组成代谢过程，对机体的

12、新陈代谢有重要的调节作用。因缺铁引起的缺铁性贫血是世界上普遍存在的营养问题，缺铁可引起多种组织改变和功能失调，如影响淋巴组织的发育和对感染的抵抗力。孕妇缺铁不仅危害自身健康，降低分娩安全性，而且胎儿储铁不足，出生后较早发生缺铁性贫血，并表现为生长发育迟滞、对环境反应淡漠、学习障碍、易患疾病和病程迁延；儿童缺铁则会引起身体和大脑智力发育迟缓，以至于智力落后于正常儿童；当人体长期缺铁可诱发萎缩性胃炎甚至胃癌。综上所述，研究建立测定铁的分析方法，具有十分重要的意义。因此，发展对铁()分析检测方法对环境及人体健康有着极其重要的作用。目前分光光度法4-6、原子吸收光谱法7、化学发光分析法8、伏安分析法9

13、等分析检测法被广泛应用于各种样品中铁含量的测定，但是，这些分析方法大都需要高精密分析仪器及进行复杂的样品前处理工作，其分析成本过高且不适用于在线或现场检测。因此，发展新的检测铁的方法是十分必要的。1.1研究目的与意义铁是环境水样中较为常见的一种金属元素，也是人体内重要的微量元素之一，人体含铁约2.54克，是人体所含微量元素中较多的一种。铁是构成血液红细胞中血红蛋白、肌肉中肌红蛋白等的主要成分。它广泛参与多种酶的组成代谢过程，对机体的新陈代谢有重要的调节作用。因缺铁引起的缺铁性贫血是世界上普遍存在的营养问题，缺铁可引起多种组织改变和功能失调，如影响淋巴组织的发育和对感染的抵抗力。孕妇缺铁不仅危害

14、自身健康，降低分娩安全性，而且胎儿储铁不足，出生后较早发生缺铁性贫血，并表现为生长发育迟滞、对环境反应淡漠、学习障碍、易患疾病和病程迁延；儿童缺铁则会引起身体和大脑智力发育迟缓，以至于智力落后于正常儿童；当人体长期缺铁可诱发萎缩性胃炎甚至胃癌。城市饮用水用铁盐净化，若不能沉淀完全，则影响水的色度和味感，对人体的健康也有一定影响。天然水体中铁的含量并不高，但现代工业尤其是选矿、冶炼、机械加工、电镀等排放出大量含铁废水，使受纳水体中的铁含量大大超过背景值，因此对环境水样中铁的测定具有重要意义。并将其主要用于饮用水和自来水中铁含量的测定，使其更好的为人类服务。目前，共振瑞利散射(rrs) 、二级散射

15、(sos) 和倍频散射(fds) 作为一种新的分析技术12，因其高灵敏度和操作简易性，在生物大分子31 34、无机离子24和药物的分析16中得到越来越广泛的应用 但迄今为止，这项技术尚未用于痕量铁的测定和研究故本选题选用此方法测定铁离子。运用共振瑞利散射、二级散射和倍频散射方法测定更加准确，应用于测定水样中铁离子的含量测定。1.2 fe()离子的来源及存在形式 环境中fe()主要来源于选矿、冶炼、机械加工、电镀等排放的含铁废水，酸性矿井排水，污水和垃圾渗滤液。铁在水中的存在形态很多，可以是简单的水合离子，也可以是复杂的无机、有机络合物，还可能存在于胶体、悬浮物中。铁在水中主要有两种形式：可溶性

16、亚铁和不溶性的三价铁。 含有亚铁的水是无色透明的，因为铁完全溶解。当暴露在空气中，水变成混浊，形成了红褐色的物质，这种沉积物是铁的氧化物，将不溶于水。1.3研究现状铁是自然界重要的金属元素, 也是生命体不可缺少的一种重要微量元素。因此, 有关铁的分析方法非常之多。目前常用的测定铁的光度法有邻菲罗啉法、磺基水杨酸法、荧光分光光度法、催化动力学光度法10等。这些方法有的需要使用间接的方法测定硫氰酸根11含量 ，有的使用的试剂较多 ，有的处理比较麻烦费时。而用共振瑞利散射(rrs) 、二级散射(sos) 和倍频散射(fds) 作为一种新的分析技术测定铁离子含量，不仅简便快速，而且灵敏度高，线性范围宽

17、可直接用于样品的测定，且研究报道和应用较少。陈佩丽等24研究了在ph = 5. 9 的naac-hac 缓冲溶液中，法莫替丁(fmtd) 与hg() 反应形成五元环螯合阳离子(hg( fmtd)2 + ) ，再进一步与十二烷基硫酸钠( sls) 、十二烷基苯磺酸钠(sdbs) 和十二烷基磺酸钠(sds)等阴离子表面活性剂(as) 反应，形成112的三元混配物hg(fmtd)(as)2。此时，体系的共振瑞利散射(rrs)、二级散射(sos) 和倍频散射(fds) 明显增强。最大的散射波长分别位于345352 nm(rrs法)、544 nm(sos 法) 和352 nm(fds法)，3 种散射强度

18、(i)的顺序均为sls体系 sds体系 sdbs 体系，在一定范围内i与fmtd的浓度呈良好的线性关系，检出限分别为3.33.9 ng/ml(rrs法)、14. 616.3ng/ml(sos 法) 和7. 08.5 ng/ml(fds法)。据此建立了灵敏度高、选择性好、快速准确测定fmtd 的光散射新方法，该法适用于注射液、血清和尿样中fmtd 含量的测定。另外，探讨了hg( fmtd)(as)2的形成对吸收和rrs 光谱的影响及引起rrs 增强的原因。虽然铁是生命体必不可少的一种微量金属元素，但铁含量过高也会引起中毒，因此将此方法应用于铁的检测领域是十分必要的。本题选用在hcl介质下，建立二

19、苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系，采用共振瑞利散射(rrs)、二级散射(sos) 和倍频散射(fds)测定散射光强度从而推算出铁离子的含量的方法测定铁离子，体系简单，测定过程直接、干扰少，建立一种测定水环境中fe()含量的新方法。1.4溴甲酚紫的简述化学名：溴甲酚紫 英文名：bromocresol purple分子式：c21h16br2o5s 分子量：540.22别名：二溴邻甲酚磺呋酞;二溴邻甲酚磺酞;溴甲酚红性质：微黄色细小结晶，溶于乙醇和稀碱溶液，几乎不溶于水图1溴甲酚紫的结构示意图1.5二苯偶氮碳酰肼的简述化学名：二苯偶氮碳酰肼 英文名：phenylazoformic acid 2-

20、phenylhydrazide分子式：c13h12br2n4so 分子量：240.26别名：1,5-二苯基缩二氨基脲,二苯基卡巴腙,二苯卡巴腙,对称苯肼羰偶氮苯,二苯缩氨脲性质：橙红色针状结晶。溶于醇；氯仿和苯，不溶于水。图2二苯偶氮碳酰肼的结构示意图2 实验部分2.1 仪器与试剂2.1.1仪器:f-7000荧光分光光度计(日本日立公司)；uv-3600型紫外可见近红外分光光度计(日本岛津公司)；sz-97自动三重纯水蒸馏器(深圳市三利化学品有限公司)；ph s-2f 型数字显示ph计(上海雷磁仪器厂)。2.1.2试剂fe2(so4)3标准储备液:80.8ug/ml(由于硫酸铁中含铁量为21%

21、-23%,按22%计得到铁含量为17.776ug/ml.即3.1810-4 mol/l；ph=3.2盐酸溶液；110-4 mol/l溴甲酚紫（bcp）溶液； 210-3 mol/l二苯偶氮碳酰肼溶液（使用前配制并保存于棕色瓶中）。所用试剂均为分析纯，用实验用水均为三次蒸馏水。2.2 试验方法在10ml比色管中，依次加入ph为3.0盐酸溶液0.1ml，二苯偶氮碳酰肼溶液0.1ml，bcp溶液0.2ml及适量的铁()标准溶液，用三次蒸馏水稀释至刻度，震荡摇匀，静止20min后于荧光分光光度计上以ex=em(=0 nm)进行同步扫描，记录体系共振瑞利散射光谱。以ex=1/2em和ex=2em进行扫描

22、，分别测量不同入射波长(ex)下的散射强度isos和ifds，然后分别以isos和ifds对应的波长作图，得到体系的sos光谱和fds光谱。再分别以各自的最大散射波长处测定样品以及试剂空白的散射强度irrs，isos，ifds与i0rrs，i0sos，i0fds，并计算i(i=i-i0)。以i-c铁()标准曲线法定量检测样品铁()中含量。3 结果与讨论3.1光谱特征3.1.1 uv光谱图1为二苯偶氮碳酰肼-bcp-fe()体系在ph 3.2的盐酸介质溶液中从200600nm的吸收光谱图，由图可知此波段下fe()吸收较弱，在228nm处有最大吸收。当少量fe()加入bcp溶液中时bcp在228n

23、m处吸光度下降(曲线2)，此时在该混合液中加入二苯偶氮碳酰肼后染料探针吸光度显著降低(曲线3)，其原因可能是二苯偶氮碳酰肼与fe()和bcp形成的缔合物发生结合作用而导致吸光度下降，说明二苯偶氮碳酰肼对其具有较好的敏化作用。图1二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的紫外光谱图（1）hcl+bcp+二苯偶氮碳酰肼+ fe()，（2）hcl+二苯偶氮碳酰肼+ fe()，（3）hcl+bcp+ fe()，（4）hcl+fe()，（5）hcl+bcp+二苯偶氮碳酰肼+，（6）hcl+二苯偶氮碳酰肼，（7）hcl+bcp3.1.2 rrs光谱二苯偶氮碳酰肼-bcp-fe()体系体系的共振散射光谱如图2

24、所示。由图2可知，在酸性介质中bcp与fe()络合物本身的共振光散射强度较弱。当往溶液中加入二苯偶氮碳酰肼溶液后，体系共振散射光强度明显增强，这是由于在酸性条件下与二苯偶氮碳酰肼阳离子通过静电引力使洛合物形成缔合物，同时溶液中的缔合物分子自动聚集形成缔合微粒，使其粒子颗粒粒径进一步增大，从而导致体系共振散射光强度显著增强，最大散射波长位于468 nm ,并在400nm、450nm处有较强散射峰。试验同时考察了加入不同质量浓度fe()的共振光散射强度变化情况(图2)，由图可知，随着fe()浓度的增加，体系共振光散射强度不断增强，且散射峰在468nm处散射强度与fe()浓度之间有很好的线性关系，因

25、此可用于痕量fe()含量的测定。图2二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的rrs光谱(ph 3.1)1：hcl+bcp系列;2：hcl+二苯偶氮碳酰肼系列;3：hcl+bcp+二苯偶氮碳酰肼;4:4、5、6、7：hcl+bcp+二苯偶氮碳酰肼+fe()3.1.3 sos和fds光谱反应体系的sos和fds光谱见图3和图4。由图3(a)和图4(a)可知，bcp 、二苯偶氮碳酰肼、fe()本身的sos和fds强度均很弱，但当他们反应形成螯合物时，溶液的sos和fds光谱显著增强，最大散射峰(ex/em)分别位于260nm/ 330nm(sos)和519nm/ 660nm (fds)附近。由图3(

26、b)和图4(b)可见，在sos和fds波长处，体系的isos，ifds与fe()浓度呈良好线性关系，证明sos和fds法均可用于痕量fe()的测定。 图3二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的sos光谱(ph 3.1)（a）1：hcl+bcp 2：hcl+二苯偶氮碳酰肼系列3：hcl+bcp+二苯偶氮碳酰肼4：hcl+溴甲酚紫+二苯偶氮碳酰肼+fe()（b）4、5、6、7：hcl+溴甲酚紫+二苯偶氮碳酰肼+fe() (fe(): 0, 1.0,1.5, 2.0, 2.5, 3.0ml)110-4 mol/l溴甲酚紫（bcp）溶液； 210-3 mol/l二苯偶氮碳酰肼溶液;fe()3.181

27、0-4 mol/l 图4二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的fds光谱(ph 3.1)（a）1：hcl+溴甲酚紫系列2：hcl+二苯偶氮碳酰肼系列3：hcl+溴甲酚紫+二苯偶氮碳酰肼4：hcl+溴甲酚紫+二苯偶氮碳酰肼+fe()（b）系列4、5、6、7：hcl+溴甲酚紫+二苯偶氮碳酰肼+fe() (fe(): 0, 1.0,1.5, 2.0, 2.5, 3.0ml)110-4 mol/l溴甲酚紫（bcp）溶液； 210-3 mol/l二苯偶氮碳酰肼溶液;fe()3.1810-4 mol/l3.2试验条件优化3.2.1介质条件选择及其酸度的影响分别考察了hac-naac、h3po4、h2so

28、4、hcl、nh3h2o-nh4cl等介质对体系rls的影响。结果表明，hcl溶液作为反应介质时效果最好，不同ph值对体系散射强度(i)的影响如图5所示，可见最适宜酸度是ph 3.2，因而本实验选用ph 3.2的hcl作为反应介质，其用量以0.1 ml为宜。 图5 溶液酸度的影响fig 3 effect of solution acidity3.2.2 溴甲酚紫（bcp）用量影响 不同bcp用量对rls强度(i)的影响如图4所示。可见，bcp用量以0.1ml为宜。bcp用量过大或过小都会造成rls强度降低，其原因在于bcp量不足时离子缔合物形成不完全，rls强度低，但bcp浓度过高则会使试剂空

29、白值增大。 图4 溴甲酚紫加入量的影响fig 4 effect of bromocresol purple concentration on irls3.2.3二苯偶氮碳酰肼用量的影响研究表明，共振光散射的发生，是由于体系中形成了可导致共振散射的分子质点。由图5可知，随着体系中的二苯偶氮碳酰肼加入，体系散射强度逐渐增强，其原因可能是随着二苯偶氮碳酰肼量得增加，溶液中二苯偶氮碳酰肼与bcp形成的分子质点逐渐增加；当二苯偶氮碳酰肼加入量为0.2ml 时，体系i468nm达最大值，显示出二苯偶氮碳酰肼与bcp形成的分子质点增多达最大值；而当二苯偶氮碳酰肼浓度继续升高(0.2 ml)时，i468nm逐

30、渐降低，这是由于产生多聚体导致与bcp缔合程度减小，使共振散射强度降底。故本测定体系二苯偶氮碳酰肼用量选定为0.2ml 图5 二苯偶氮碳酰肼加入量的影响fig 5 effect of phenylazoformic acid 2-phenylhydrazide concentration on irls3.2.4试剂加入顺序的影响 实验研究了二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系的加入顺序变化对体系rrs强度的影响。结果表明，加入顺序对体系rrs值有较大影响，加入顺序为盐酸+ bcp + fe() + 二苯偶氮碳酰肼时体系i468nm值最大且较稳定，故本实验选用该加入顺序。3.2.5离子强度的

31、影响以nacl维持体系的离子强度，观察nacl浓度对共振光散射法测定fe()的影响，结果显示当nacl浓度小于0.03mol/l时，对rls法测定fe()基本无影响，随着nacl浓度的增大，体系rls强度略有减小，这可能是由于大量存在的na+和cl-破坏了配合物的电荷平衡，并与配合物的形成存在竞争关系。3.2.6 方法稳定性实验结果显示，室温下体系反应可在20 min内缔合完全，且在3 h内体系i468nm值基本维持不变，可见其共振散射光强度具有良好的稳定性。3.2.7 方法灵敏度在最优实验条件下，fe()质量浓度在0.090.26 g/ml范围内与i468nm呈良好线性关系。其线性回归方程为

32、i468nm =18.371 c (g/ml) 26.963，相关系数r为0.9998，检测限为0.25g/l (n=10, 3计)，低于文献报道(20.11g/l)，可见本法灵敏度较高，更适于痕量fe()的测定。按实验方法对含0.20g/ml fe()溶液进行11次平行测定，其相对标准偏差为2.3%。3.3.2 离子缔合反应对散射增强原因探讨这种离子缔合作用能对二苯偶氮碳酰肼-溴甲酚紫-fe()体系形成的缔合物的rrs、sos和fds光谱产生很大的增强作用。首先，在ph 3.2的酸性介质中，溴甲酚紫可离解出br-而以+2价阳离子形式存在，且在酸性溶液中fe()表现出强氧化性，fe()被还原成

33、fe()且可与bcp2+结合形成淡黄色络合物，该络合物与二苯偶氮碳酰肼再形成黄色缔合物，导致分子体积增大，电中性配合物形成后与水分子间形成了疏水性界面，这种界面的形成将有利于散射增强，从而使得体系共振光散射强度增强。为进一步证实上述机理，我们实验了不加二苯偶氮碳酰肼进行试验，结果发现反应速度十分缓慢，体系rls强度很微弱，且二苯偶氮碳酰肼加入到一定量以后，散射强度值基本不再变化，说明二苯偶氮碳酰肼对其有明显作用，因此体系中形成一种较大颗粒的复合物，从而引起体系散射强度的极大增强。此结合产物形成后分子量将显著增大，根据光散射公式i=kcmi0可知散射强度与分子体积成正比，当分子体积难于计算时，可

34、用分子量大小进行衡量，则结合产物的分子量比结合前有显著增加，因此将有利于散射的增强。3.4 共存离子的干扰选定实验条件下，探讨fe()含量为0.20g/ml，测定误差控制在5%内时，常见共存物质对rls法测定fe()的影响，其最大允许倍数如表1所示：表1 共存离子对质量浓度为0.20 g/ml fe()测定的干扰table 1 effects of coexisting substance on the determination of 0.20 g/ml fe()共存物质coexistent substance允许倍数allow multiple相对误差relative error/%共存物

35、质coexistent substance允许倍数allow multiple相对误差relative error/%no3-7003.02%cd2+83-2.34%na+600-4.51%mn2+80-4.82%k+5001.74%nh4+802.62%ca2+4004.43%br-673.76%mg2+350-3.08%al3+50-2.85%cu2+3003.21%s2-403.26%ni2+300-4.83%bi3+303.27%so42-2500.64%no2-202.54%i-200-2.95%ba2+102.87%cns-2002.90%pb2+0.5-2.37%cd2+83-2

36、.3%ag+0.53.0%io3-803.5%fe2+0.52.54%由表1可知，除pb2+、ag+与fe2+离子对测定体系有一定干扰外，大部分金属离子、非金属阴离子及酸根离子对测定干扰较小。对于干扰物质可在实验过程中加入一定量的edta及naf作为掩蔽剂消除测定干扰。因此，可认为本法用于fe()的检测具有高选择性，可用于水样检测。3.5 标准曲线绘制在最佳实验条件下测定了不同浓度fe()时，散射体系的irrs、isos和ifds，并对相应的蛋白质浓度作线性回归，标准曲线的回归方程、线性范围、相关系数及方法的检出限(3)列于表3中。可见，3种方法均具有较高的灵敏度，检出限分别为0.25g/l

37、(rrs)，6.0 g/l (sos)和8.0 g/l (fds)。灵敏度较文献报道的测定值(8.5g/l9，86ng/ml34，9ng/ml29)高。可见本法灵敏度较高，更适于fe()的痕量分析检测。按实验方法对含2g /ml fe()溶液进行11次平行测定，其相对标准偏差为0.3%。表2 标准曲线的有关参数和检出限table 2. related parameters of the calibration curves and the detection limits for bsa方法（method）线性范围(g /ml)(linear range)回归方程 (g /ml)(linear

38、 regression equation)相关系数(r) (n=6)correlation coefficient检出限(g/l)(detection limit)rrs03.5i = 18.371c 26.9630.99980.25sos04i = 61.648c 9.6730.99880.4fds04i =194.99c + 90.6850.99990.33.5 样品分析采集一定体积的井水、湖水、自来水水样经过过滤除去悬浮物及沉淀后进行消解测定，同时进行样品加入回收试验，结果见表2。从表中可以看出，本法用于水体中痕量铁()的测定，准确度较高，回收率在98.19%101.4%之间，方法重现性

39、好，测定的相对标准偏差介于小于1.9%2.4%之间。表3 样品中铁()的分析结果table3. analytical results of fe()样品（sample）测定值/ (mg/l)(measured value)加入量/ (mg/l)(addition)总测得值/ (mg/l)(measured value)rsd(%)(n=7)回收率(%)(recovery)井水well water0.1240.2500.2921.998.19湖水lake water0.0510.2500.1692.4101.4自来水tap water0.1380.2500.2262.399.994结论在ph 3

40、.2的酸性介质中，溴甲酚紫可离解出br-而以+2价阳离子形式存在，fe()被还原成fe()且与bcp2+结合形成淡黄色络合物，该络合物与二苯偶氮碳酰肼再形成黄色缔合物，导致分子体积增大，电中性配合物形成后与水分子间形成了疏水性界面，这种界面的形成将有利于引起体系rrs、sos、fds光谱强度显著增强，且体系散射强度增强值与fe()浓度在一定范围内呈线性关系。据此建立了一种测定简捷快速灵敏的痕量的蛋白质的新方法。该方法具有简单、快速、选择性好及灵敏度高等优点，方法检测限达0.25g/l，与其他方法相比，灵敏度及准确度明显高于相关文献报道，此法用于实际样品检测加标回收率为98.19%101.4%，

41、测定偏差小于2.5%，表明本法具有良好的应用前景。参考文献：1 c. brugnara, clin. chem. 2003,49,1573.2 j. beard, j. nutr. 2003, 133,1468s.3 t.j. egan, r. hunter, c.h. kaschula, h.m. marques, a. misplon, j.walden, j. med. chem. 2000, 43,283.4 z.o. tesfaldet, j.f. van staden, r.i. stefan, talanta . 2004, 64,1189.5 d.m.c. gomes, m.a

42、. segundo, j.l.f.c. lima, a.o.s.s. rangel, talanta. 2005, 66,703.6 s. lunvongsa, m. oshima, s. motomizu, talanta. 2006,68,969.7 a. ohashi, h. ito, c. kanai, h. imura, k. ohashi, talanta. 2005,65,525.8 w. qin, z.j. zhang, f.c. wang, fresenius j. anal. chem. 1998,360,130.9 w. qin, z.j. zhang, f.c. wan

43、g, fresenius j. anal. chem. 1998,360,130.10 pasternack r f,bustamante c,collings p j,et al.porphyrin assemblies on dna as studied by a resonance light scattering techniquej.j. am chem. soc.1993,115:5393-5399. 11 王明,张一心.二苯偶氮碳酰肼间接光度法测定废水中的氰化物j.成都研究院.2003,27(2):141-14312 梁榕源.共振光散射技术在环境分析中的应用j.中国环境监测,2006,22(3): 27-2913 钟国秀,黄清华.二溴对