右美托咪定抑制肾缺血再灌注炎性反应

1、www. CRTER .org 中国组织工程研究第17卷第53期2013 - 12 - 31出版 Chi nese Journal of Tissue Engin eeri ng Research December 31, 2013Vol.17, No.53 doi:10.3969/j.issn.2095-4344.2013.53.015htt p: / 陈克研，张毅男，刁玉刚，周锦，张铁铮.右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应J.中国组织工程研究，2013，17(53):9189-9195. 右美托咪定抑制肾缺/再灌注炎性反应 ISSN 2095-4344 CN 2

2、1-1581/R CODEN: ZLKHAH9189 陈克研，张毅男，刁玉刚，周 锦，张铁铮(解放军沈阳军区总医院麻醉科，辽宁省沈阳市 110016) 文章亮点： 肾移植后肾缺血再灌注损伤一直是临床的热点问题，右美托咪定为临床常用的麻醉辅助用药，目前已有 相关文献报道右美托咪定具有一定的脑保护和肾保护作用，文章率先就肾移植/肾缺血及炎症反应和 C-X-C型 趋化因子受体4的表达这一方面进行观察，具有一定的创新性。 关键词： 器官移植；器官移植基础实验；肾脏； 死因子a； C-X-C型趋化因子受体 主题词： 再灌注损伤；系统性炎症反应综合征； 基金资助： 辽宁省科技攻关项目(2012225006

3、) 缺血再灌注；右美托咪定；预处理；后处理；白细胞介素 4;省级基金 1 B;肿瘤坏 陈克研,男，1983年生, 内蒙古自治区通辽市人， 汉族，2011年吉林大学毕 业，博士，主要从事基础 医学研究。 che nkeya n888 肾上腺素能 a激动剂；肾移植 通讯作者：张铁铮，硕士, 主任医师，解放军沈阳军 区总医院麻醉科，辽宁省 沈阳市 110016 tzzha 摘要 背景：在缺血/再灌注肾脏损伤的防治研究中，用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织，对肾移植和 移植物的功能恢复有着重要意义。 目的：探索右美托咪定对大鼠肾缺血/再灌注炎性因子及 C-X-C型趋化因子受体 4表达的影响。

4、方法：40只大鼠随机等分为假手术组、缺血再灌注组、右美托咪定预处理组及右美托咪定后处理组。后 行右肾切除，左肾缺血 45 min，再灌注60 min，造肾缺血再灌注模型；右美托咪定预处理组于大鼠股静脉穿 刺置管后泵注1 ig/kg右美托咪定，10 min后改为0.5 igkg，泵注30 min直至缺血即刻；右美托咪定后处 理组于左肾再灌注后静脉泵注0.5 ug/kg右美托咪定 30 min。 结果与结论：肾脏缺血再灌注大鼠肾脏损伤严重，炎症明显，肾小管扩张，有肾小球肾炎表现，血清中白细 胞介素13和肿瘤坏死因子a水平显著升高(P 0.05)，血清和肾脏中 C-X-C型趋化因子受体4水平也明显增

5、 加(P 0.05)；经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中白细胞介素1和肿瘤坏死因子 a水平 明显降低(P 0.05)，血清和肾脏中 C-X-C型趋化因子受体 4水平也明显降低(P 0.05) O提示肾缺血再灌注 可致以炎性反应为特征的肾损伤；右美托咪定可以抑制炎性反应并弱化C-X-C型趋化因子受体4的表达，具 有一定的肾保护作用。 Dexmedetomid ine in hibits renal ischemia/re pefusi on-i nduced in flammatory reacti on Chen Ke-yan, Zhang Yi-nan, Diao Yu-ga

6、ng, Zhou Jin, Zhang Tie-zheng (De partment of Anaesthesiology, General Hosp ital of Shenyang Military Region, Shenyang110016, Liaoning Pr ovince, China) Abstract BACKGROUND: Pr evious studies addressing the pr evention and treatment of ischemia/re perfusion kidney damage show that, some drugs could

7、activate or inhibit the body to p rotect kidney tissue, which is of great significance in renal trans pl antation and graft functional recovery. OBJECTIVE: To explore the influence of dexmedetomidine on expressions of inflammatory factors and C-X-C chemokine rece ptor type 4 in rat with renal ischem

8、ia/re perfusion. METHODS: Forty rats were randomly divided into four equal groups: sham group, ischemia/reperfusion group, dexmedetomidine pr econditioning gro up and dexmedetomidine po st-treatment gro up. Exce pt the sham group, the right kidney was removed and the left kidney was subject to ische

9、mia for 45 minutes and rep erfusion for 60 minutes, thus establishing renal ischemia/re perfusion models in other three gro ups. As for pr econditioning group, the rat femoral vein was pu nctured and transfused with 1 中图分类号:R318 文献标识码:B 文章编号：2095-4344 (2013)53-09189-07 修回日期：2013-09-16 (201307138/YJ

10、Y) Chen Ke-yan , M.D., Dep artme nt of An aesthesiology, Gen eral Hosp ital of Shenyang Military Regi on, She nyang 110016, Liao ning P rovi nee, Chi na che nkeya Corres ponding author: Zha ng 11 g/kg dexmedetomidine for 10 minutes, followeepe-zheng. Master, chief p hysicia n, Dep artme nt of An aes

11、thesiology, Gen eral Hos pital of She nyang Military Regio n, She nyang110016, Lia oning Pro vi nee, Chi na tzzha by infusing 0.5 g/kg dexmedetomidine for 30 minutes until ischemia occurred. As for p osttreatment gr oup, the rats were infused with 0.5g/kg dexmedetomidine for 30 minutes after rep erf

12、usion. RESULTS AND CONCLUSION: Serious kidney injury, obvious inflammation, tubular dilatation, and glomerulone phritis were found in rats with renal ischemia/re perfusion. The serum interleukin- 1 3 and tumor necrosis factor- a levels in ischemia/reperfusion, dexmedetomidine preconditioning and dex

13、medetomidine po st-treatment gro ups were increased significantly ( P 0.05). The exp ression of serum and renal C-X-C chemokine rece ptor type 4 was also increased ( P 0.05). Dexmedetomidine pr econditioning or p ost-treatment Acce pted: 2013-09-16 陈克研，等.右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应www. CRTER .org 9190P.O. Bo

14、x 1200, She nyang110004 www.CRTER.org significantly decreased serum interleukin- 1 p and tumor necrosis factor - a levels in rats with renal ischemia/reperfusion (P 0.05). The same decline was observed in content of serum and renal C-X-C chemokine rece ptor type 4 (P 0.05). Exp erimental findings in

15、dicate that renal ischemia/re pefusion can cause renal injury which is characterized by inflammatory reaction. Dexmedetomidine can reduce inflammatory reactions and attenuate C-X-C chemokine rece ptor type 4 exp ression to pr otect the kidney. Subject headings:rep erfusion injury; systemic inflammat

16、ory respo nse syndrome; -adrenergic agonist; renal trans pl antation Funding: a grant from Liaoning Pr ovincial Science and Technology Pr ogram, No. 2012225006* Chen KY, Zhang YN, Diao YG, Zhou J, Zhang TZ. Dexmedetomidine inhibits renal ischemia/re pefusion-induced inflammatory reaction. Zhongguo Z

17、uzhi Gongcheng Yanjiu. 2013;17(53):9189-9195. 0 弓 I言In troducti on 肾移植是当今治疗终末肾脏疾病最理想的方法之 一。从50年前首例肾移植成功至今，已超过50万例肾衰 竭患者通过肾移植延续了生命1-2。然而，肾移植围手术 期缺血再灌注损伤的问题至今尚未解决。由于肾脏自身 的结构特点使其成为缺血再灌注损伤中最为敏感器官 之一 3。 当肾脏缺血时，血流量减少，肾小管内皮细胞损坏， 导致肾小管堵塞，再灌注后，细胞代谢功能紊乱，炎症 递质释放，炎症反应加剧4-5。据报道，肾小球肾炎患者 肾小管间质中淋巴细胞浸润、肾小球极周F细胞、近端 小

18、管上皮细胞及内皮细胞中C-X-C型趋化因子受体表达 明显升高，而正常肾组织和微小病变肾脏组织中表达较 低5-6。目前，在缺血再灌注肾脏损伤的防治研究中，主 要针对某一环节进行调控，如单纯应用抗凋亡药物、抗 氧化剂、核选择素拮抗剂等7-9，这些药物无法发挥整体 疗效，且在临床应用中受限，达不到临床疗效。Suda 等10通过建立小鼠缺血再灌注模型，认为分次阻断肾血 管行预处理能减轻缺血再灌注对肾脏的损伤。也有研究 证实，以启动肾脏内源性保护机制尤显重要，用药物激 活或抑制机体某些因子从而保护肾组织，对肾移植和移 植物的功能恢复有着重要意义11-13。 研究表明，a 2受体激动剂可以维持肾髓质血流从

19、 而防止对比剂肾病保护肾脏，并可激动中枢和外周交感 神经的突触前膜肾上腺素能受体，从而减弱外科手术引 起的应激反应，降低血浆儿茶酚胺浓度14-16。右美托咪 定是一种高度选择性a2肾上腺素受体激动剂，不仅可以 通过激动中枢神经系统引发并维持自然睡眠状态，产生 镇静和催眠作用，而且可以避免al肾上腺素能受体引起 的不良反应17-18 O Bollucuoglu等19研究表明缺血再灌注 是急性肾衰竭的主要原因之一，通过建立小鼠缺血再灌 注模型，制作肾组织切片发现肾小管细胞肿胀，细胞固 缩坏死，肾髓质有充血表现；而经腹腔注射右美托咪定 后，肾脏损伤明显降低，提示右美托咪定可提高肾损伤 的耐受性。近来

20、研究还发现右美托咪定可激活CC类人 类趋化因子受体4,减少促炎因子，降低炎症反应20-23 Tan等24应用Meta分析显示，右美托咪定产生交感抑制 作用，有益于长期氧供需失衡的心肌，从而发挥心肌保 护作用。而有关右美托咪定在肾脏缺血再灌注损伤中是 否具有器官保护作用、其机制是否与抗炎性反应有关尚 缺少相关研究。 实验旨在观察右美托咪定对肾缺血再灌注损伤中 对炎症因子及C-X-C型趋化因子受体4的影响，为防治肾 移植中的缺血/再灌注损伤提供理论依据。 1 材料和方法 Materials and methods 设计：随机分组设计，对比观察。 时间及地点： 实验于2012年6月至2013年6月在

21、解 放军沈阳军区总医院麻醉科实验室完成。 材料： 药物：右美托咪定由江苏恒瑞医药股份有限公司生 产，药物批准文号：国药准字号H20090248，成分为盐 酸右美托咪定，纯度：99%，剂型：注射剂，规格：2 mL， 200 右美托咪定治疗大鼠肾缺血 /再灌注的主要试剂及仪器: 试剂及仪器 来源 白细胞介素1 B ELISA检测试剂盒， 肿瘤坏死因子a ELISA检测试剂盒， C-X-C型趋化因子受体 4 ELISA检测 试剂盒 兔抗C-X-C型趋化因子受体 4， HRP-羊抗兔IgG 水平离心机 美国A使用许可证号：SYXK （军）2012-0002。饲养环境：温度 25 C,湿度 50%， 1

22、2 h光照，充足食水。实验符合相关动物伦理学要求。 实验方法： 动物分组：SD大鼠随机分4组：假手术组、 注组、右美托咪定预处理组和右美托咪定后处理组， 10只。 肾缺血再灌注模型建立：术前大鼠禁食禁饮 缺血再灌 各 显微镜下观察肾脏 1 B、肿瘤坏死因子 实验步骤参照ELISA 1排第1，2二孔加入 6 h。腹 腔注射体积分数10%水合氯醛（3 mg/kg）实施麻醉。仿 照文献10的方法建立肾缺血再灌注损伤模型。 具体步骤如下：腹中线 4.0-5.0 cm切口，沿腹白 线剪开，暴露腹腔；将回小肠、结肠和脾脏移至左侧， 分离右肾，结扎肾蒂，取岀右肾。将大鼠小肠、结肠、 脾脏移至右侧，显露左侧肾

23、脏和左肾蒂，用无损伤血 管夹夹闭肾蒂；45 min后松开左肾血管夹，恢复灌注， 见肾脏从暗紫色转成红色则说明缺血再灌注模型建立 成功；缝合关闭腹腔。 假手术组大鼠麻醉开腹后仅用温湿生理盐水纱布 包裹肠管。 药物干预：右美托咪定预处理组于造模前40 min，大 鼠股静脉泵注 1卩g/kg右美托咪定， 10 min后改为 0.5卩g/kg，泵注30 min直至造模。右美托咪定后处理组 于左肾再灌注即刻，大鼠股静脉泵注1卩g/kg右美托咪 定，10 min后改为0.5卩g/kg，泵注30 min停止。 标本采集：模型建立成功后6 h，各组实验鼠用10% 水合氯醛麻醉，眼球放血，收集血液，3 000

24、r/min离心 （离心半径为7.0 cm）5 min，将上清吸岀，移入 1.5 mL 离心管中，-80 C保存备用；取部分肾组织固定于中性 甲醛溶液中，其余部分存放于-80 C冰箱保存。 苏木精-伊红染色观察肾脏病理变化：将肾组织置中性 甲醛液中固定一两天；流水冲 4.0-5.0 h，用滤纸将组织 浸干后，放入体积分数 70%乙醇中过夜；用同样的方法 取岀组织置于体积分数80%乙醇中过夜；梯度乙醇复 水，二甲苯中20 min ；将组织放入蜡中 3 h；取岀组织 放入金属包埋盒中进行包埋；用切片机切片，厚度在 3-5 口之间；将切好的组织片置37 C烤箱中过夜；浸 入二甲苯中做脱蜡处理；将脱好蜡

25、的切片，依次放入梯 度乙醇复水、蒸馏水 3 min ；苏木精染色5 min ；取岀放 入干净新接的自来水中进行反蓝，依次放入梯度乙醇脱 水、二甲苯10 min ；中性树胶封固， 病理组织学变化。 卩标准品，依次倍比稀释；在每个加样孔中加入40卩 ELISA法检测血清中白细胞介素 C-X-C型趋化因子受体4水平的变化： 试剂盒说明书进行：在酶标板第 50 样品稀释液，加入10卩L羊品；37 C温育30 min ；揭掉 封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 s 后弃去，如此重复5次，拍干；每孔加入50卩酶标二抗， 37 C温育30 min ;按上述方法洗板；每孔依次加入显色 剂A和B各

26、50卩L 37 C避光显色10 min ;每孔加终止 液50卩L终止反应；酶标仪检测，绘制标准曲线，并 分析结果。 Western-blot法检测检测肾脏中C-X-C型趋化因子受体4表 达水平：将冻存的组织取岀后加裂解液研磨， 12 000 r/min （离心半径为7.0 cm）4 C离心10 min，取上清液，按1 : 1 比例加2倍Loading-buffer ，沸水煮5 min。 配制分离胶和浓缩胶，将上述样品加入胶中进行 SDS-PAGE电泳；将胶取岀放入缓冲液中，水平摇 30 min ;取与胶同等大小的滤纸和PVDF蛋白印迹膜， 制作三明治夹膜，置转膜仪中进行转膜1 h ;取岀PVD

27、F 膜用TBST冲洗，加入脱脂乳封闭液，摇床上过夜；洗 膜后加入兔抗 C-X-C型趋化因子受体 4抗体（1 : 800稀 释），摇床上1 h ；洗膜3次，加HRP-羊抗兔IgG （1 : 3 000稀释），摇床上1 h。 将膜在水中漂洗，ECL系统显影，分析免疫印迹 的灰度值。 主要观察指标：大鼠肾缺血/再灌注在右美托咪定干 预后，白细胞介素 1 B、肿瘤坏死因子 a和C-X-C型趋化 因子受体4的表达变化。 统计学分析：实验数据以x =5表示，应用IBM-SPSS 19.0软件进行统计学分析，组间比较采用单因素方差分 析，P 0.05为差异有显著性意义。 2 结果 Results 2.1 实

28、验动物数量分析实验选用大鼠40只，分为4 组，无脱失，全部进入结果分析。 2.2 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注 肾脏组织的病理损伤苏木精-伊红染色显示，与假手 术组相比，缺血再灌注组大鼠肾脏损伤严重，炎症明显， 肾小管扩张，充血、水肿，有肾小球肾炎表现。 而右美托咪定预处理和后处理组肾脏缺血再灌注 大鼠肾脏损伤明显减轻，炎症降低，细胞形态异常较少， 见图1。 2.3 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注 肾脏大鼠血清中白细胞介素1B和肿瘤坏死因子a的水平 ELISA检测发现，与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠 血清中白细胞介素1B和肿瘤坏死因子 a水平均显著升高 （P 0.0

29、5）;而经右美托咪定预处理或后处理的肾缺血 再灌注大鼠血清中白细胞介素 1B和肿瘤坏死因子 冰平 明显降低（P 0.05），见表1， 图 2，3。 ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH9191 陈克研，等.右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应 C-X-C型趋化因子受体4水平明显降低(P 0.05)，见表2。 B:缺血再灌注组出现明显的肾 小管扩张、充血、水肿 素介 胞细白 O O O O : I- II -7 , / a -, + X 羸二, -1申 弗“%7审 b M I 卜in F _产 I *P J 丿,巾=:E 叫- 杷吟，八”匚 F代空之

30、 jft 乂 r .； J h ,J/ 与假手术组比较，aP 0.05 ;与缺血再灌注组比较，bp 200) ischemia-re perfusion (xs, n=10, ng/L) 假手术组缺血再右美托咪定右美托咪定 灌注组预处理组后处理组 Figure 1 Effect of dexmedetomidine p reconditioning and p ost pr ocessing on the p athology of rats with renal ischemia-re perfusion (Hematoxylin-eosin staining, 200) 表1右美托咪定预处

31、理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清 中白细胞介素13和肿瘤坏死因子a的水平的影响 Table 1 Effect of dexmedetomidine pr econditioning and postprocessing on serum interleukin- 1 3 and tumor necrosis factor- a levels of rats with renal 与假手术组比较，aP 0.05 ;与缺血再灌注组比较，bp 0.05。 注：右美托咪定预处理和后处理能降低肾脏缺血再灌注损伤后大 鼠血清中肿瘤坏死因子 a的水平。 组别 白细胞介素13 肿瘤坏死因子 a 假手术组 缺

32、血再灌注组 右美托咪定预处理组 右美托咪定后处理组 85.34 16.13 172.16 23.04 a 108.97 23.08 ab 117.29 18.48 ab 58.64 13.22 141.06 9.21 a 98.78 18.19ab 97.69 16.28ab 图3右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠 血清中肿瘤坏死因子a的水平的影响 Figure 3 Effect of dexmedetomidine pr econditioning and p ost processing on serum tumor necrosis factor- a levels of ra

33、ts with renal ischemia-re perfusion 与假手术组比较，aP 0.05 ;与缺血再灌注组比较，bP 0.05 注：右美托咪定预处理和后处理能降低肾脏缺血再灌注损伤后大鼠血清中 白细胞介素1 3和肿瘤坏死因子 a的水平 2.4 右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾 脏大鼠血清和肾脏组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平 ELISA检测发现，与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠血 清中C-X-C型趋化因子受体4显著升高(P 0.05);而经右 美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠血清中 进一步用 Western blot对肾脏中C-X-C型趋化因子受 体4的

34、表达水平进行检测，发现假手术组大鼠肾脏仅见少量 C-X-C型趋化因子受体4表达。 与假手术组相比，缺血再灌注组大鼠肾脏组织中 C-X-C型趋化因子受体4表达明显增高(P 0.05)，而经右 美托咪定预处理或后处理的肾缺血再灌注大鼠肾脏组织中 C-X-C型趋化因子受体4表达水平明显减少(P 0.05)，见 图4。 表2右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注肾脏大鼠血清 中C-X-C型趋化因子受体4的水平的影响 Table 2 Effect of dexmedetomidine pr econditioning and p ost processing on serum C-X-C chemokin

35、e rece ptor type 4 levels of rats with renal ischemia-re perfusion (xis, n=10, ng/L) 组别 C-X-C型趋化因子受体4 假手术组 缺血再灌注组 右美托咪定预处理组 右美托咪定后处理组 53.18 16.39 157.21 12.13 a 88.92 13.98 ab 97.19 14.18 ab 与假手术组比较，aP 0.05 ;与缺血再灌注组比较，bP 0.05 注：右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠血清中 C-X-C型趋化因子受体4的水平。 假手术组 CXCR4 缺血再 右美托咪定 右美托咪

36、定 灌注组 预处理组后处理组 3-actin 与假手术组比较，aP 0.05 ;与缺血再灌注组比较，bp 0.05。 注：右美托咪定预处理和后处理均能减轻缺血再灌注肾脏大鼠肾 脏组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平。 图4右美托咪定预处理和后处理对缺血再灌注大鼠肾脏 组织中C-X-C型趋化因子受体4的水平的影响 Figure 4 Effect of dexmedetomidine pr econditioning and p ost pr ocessing on C-X-C chemokine rece ptor type 4 levels of rats with renal ischem

37、ia-re perfusion 3 讨论 Discussi on 目前，缺血再灌注损伤已成为临床常见的病理现 象25,由于肾脏结构和功能的特殊性，肾移植手术中发 生的缺血再灌注损伤尤为典型和严重，也更多的引发研 究者的重视。缺血再灌注损伤的发生机制主要分缺血阶 段和再灌注阶段26-27。肾组织缺血时血流量下降，肾脏 处于缺氧状态，再灌注后虽然缺血的组织恢复血流，但 能量代谢发生障碍，细胞通透性改变，激活炎症反应， 加剧组织的损伤28。实验通过建立的大鼠缺血再灌注损 伤动物模型模拟临床肾缺血再灌注过程，结果发现肾脏 再灌注6h后损伤严重，苏木精-伊红染色后其肾小管扩 张、炎症明显，有肾小球肾炎表

38、现。血生化检测证实其 肌酐和尿素氮的含量明显增高。该结果一方面证明大鼠 缺血再灌注损伤模型建立成功29，结果与人医临床基本 一致，另一方面说明缺血再灌注损伤后肾组织损伤严 重。 炎症过程始于血管内皮损伤和肾小管细胞功能障 碍，一系列的免疫调节细胞因子，包括白细胞介素1 B、 白细胞介素6、白细胞介素8、肿瘤坏死因子 a和单核细 胞趋化蛋白1,分别释放入肾组织和血液循环30-33。在 缺血再灌注损伤过程中，肾小管上皮细胞产生的肿瘤坏 死因子a、白细胞介素1 B、白细胞介素6和白细胞介素18 等细胞因子促使血管黏附分子表达增高，从而介导白细 胞和内皮细胞的黏附作用34-36。实验结果表明，肾脏缺

39、血45 min，再灌注6 h后血清中白细胞介素1 B和肿瘤坏 死因子 冰平明显增高。可见，炎症反应在缺血再灌注 损伤过程中发挥重要作用。 炎症反应是肾缺血再灌注损伤的重要原因，其发生机 制主要与C-X-C型趋化因子受体家族的作用相关37-38。据 文献报道，C-X-C型趋化因子受体 应过程中起到重要的调节作用， 性缺血时C-X-C型趋化因子受体 4在肾脏缺血后炎症反 当肾小管上皮细胞在急 4表达增多，而灭活 C-X-C型趋化因子受体4对小鼠急性缺血性肾损伤有保 护作用39。消除C-X-C型趋化因子受体 4小鼠肾组织肿 瘤坏死因子a和白细胞介素6等细胞因子的表达及中性 粒细胞的浸润数量明显降低4

40、0。实验通过建立的大鼠缺 血再灌注模型证实，大鼠缺血再灌注后血清中炎症因子 显著升高，同时血清和肾组织中的C-X-C型趋化因子受 体4表达水平亦明显升高。该结果与已报道 C-X-C型趋化 因子受体4在干细胞治疗肿瘤中介导炎症反应的结果一 致。提示在缺血再灌注损伤过程中C-X-C型趋化因子受 体4可能参与白细胞介素1B和肿瘤坏死因子a等炎症因 子的表达调控。 目前研究表明，以启动肾脏内源性保护机制尤显重 要，用药物激活或抑制机体某些因子从而保护肾组织， 对肾移植和移植物的功能恢复有着重要意义41-42。 Dederer 43证实a2受体激动剂可以维持肾髓质血流从而 防止造影剂肾病保护肾脏，并可激

41、动中枢和外周交感神 经的突触前膜肾上腺素能受体，从而减弱外科手术引起 的应激反应，起到镇静和镇痛的作用。右美托咪定是一 种高度选择性a2肾上腺素受体激动剂，分布于全身多种 细胞、组织和器官，其生理作用因分布部位不同而显现 多样性44。右美托咪定对中枢a2-肾上腺素受体激动的 选择性更强，通过激动突触前膜a2受体，抑制去甲肾上 腺素的释放，并终止了疼痛信号的传导；通过激动突触 陈克研，等.右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应www. CRTER .org 9194P.O. Box 1200, She nyang110004 www.CRTER.org 后膜受体，右美托咪定抑制了交感神经活性从而引

42、起血 压和心率的下降；从而起到镇静和镇痛的作用 45-46 者所在课题组在先前的研究中已证实右美在体外循环 。作 4 参考文献Refere nces 中具有脑保护的作用。这次实验分别在大鼠缺血再灌注 模型中实施右美托咪定预处理和后处理，肾脏病理组织 学观察结果显示，右美托咪定两组中肾脏损伤明显减 少。说明右美托咪定在缺血再灌注中对肾脏有一定的保 1 2 护作用。 既往的研究显示，a 都是G蛋白跨细胞膜的受体 复杂的信号途径直接影响 授体与C-X-C型趋化因子受体 47，a2激动之后是通过胞内 C-X-C型趋化因子受体的转录 3 与表达，还是通过影响某种胞外因子的产生或分泌间接 调节C-X-C型

43、趋化因子受体的转录与表达，目前尚不清 楚，有待深入研究加以阐释。Silva-Filho等48报道血管 紧张素n是由肾素转换成紧张素I之后，经血管紧张素 转换酶作用转变而来的；a2 激动后可抑制肾素血管紧张 素n生成下调C-X-C型趋化因子受体的表达，从而促进 各种非感染性肾脏疾病的发展。实验对右美托咪定预处 4 5 理组和右美托咪定后处理组中C-X-C型趋化因子受体 的表达情况进行综合检测，结果表明，右美托咪定预处 理和后处理组血清中C-X-C型趋化因子受体 4水平差异 6 不显著，但明显低于缺血再灌注组；用 Western blot对 肾脏中C-X-C型趋化因子受体4做进一步检测，发现与缺

44、血再灌注组相比，右美托咪定处理的两组肾脏中 C-X-C 型趋化因子受体4表达量明显降低。提示C-X-C型趋化因 子受体4可能抑制白细胞介素1 B和肿瘤坏死因子a等炎 症因子表达介导右美托咪定的器官保护作用。但是右美 托咪定在体外循环及缺血再灌注中器官保护作用机制 以及C-X-C型趋化因子受体 4在其中如何起到的调节作 用还有待进一步研究。 综上所述，肾缺血再灌注可导致以炎性反应为特征 的肾损伤。肾缺血再灌注可致以炎性反应为特征的肾损 伤；右美托咪定可以抑制炎性反应并弱化 因子受体4的表达，具有一定的肾保护作用。 C-X-C型趋化 致谢：感谢解放军沈阳军区总医院实验动物科王洋主任和 张贺硕士在实

45、验过程中给予的大力协助。 作者贡献：实验设计为张铁铮、陈克研；实验实施为陈克 研，张毅男；实验评估为刁玉刚，资料收集为周锦。陈克研、 张毅男成文；刁玉刚、张铁铮审校；陈克研对文章负责。 利益冲突：课题未涉及任何厂家及相关雇主或其他经济组 织直接或间接的经济或利益的赞助。 伦理要求：实验过程中对动物的处置符合相关动物伦理学 标准的条例。 作者声明：文章为原创作品，数据准确，内容不涉及泄密, 无一稿两投，无抄袭，无内容剽窃，无作者署名争议，无与他 人课题以及专利技术的争执，内容真实，文责自负。 7 8 9 10 11 12 13 14 Yoo CS, Shin YH, Ko JS, et al.

46、Anesthetic management including extraco rpo real membrane oxygenation thera py of liver trans pl ant rec ipi ent with life-threatening hypo xemia -a case report. Korean J Anesthesiol. 2013;65(2) :151-157. Duty BD, Conlin MJ, Fuchs EF, et al. The current role of endourologic management of renal trans

47、 pl antation com pl ications. Adv Urol. 2013;2013:246520. Bhattacharya P , Pandey AK, Paul S, et al. Aquaporin-4 Inhibition Mediates Piroxicam-Induced Neuro protection against Focal Cerebral Ischemia/Re perfusion Injury in Rodents. P LoS One. 2013;8(9):e73481. Acip ayam M, Huseyinova G, Sunar H, et

48、al. Examination of Ultrastructural Mechanisms of Vitamin E Efficacy to P revention of Ischemia-Re pefusion Injury in the Lung After Cardio pulmonary Byp ass. Microsc Microanal. 2005;11(S02): 1020-1021. de Vries DK, Khairoun M, Lindeman JH, et al. Renal Ischemia-Re pefusion Induces Release of Angio p

49、oietin-2 From Human Grafts of Living and Deceased Donors. Trans plantation. 2013;96(3):282-289. Ghasemzadeh M, Kaplan ZS, Alwis I, et al. The CXCR1/2 ligand NAP-2 pr omotes directed intravascular leukocyte migration through platelet thrombi. Blood. 2013;121(22): 4555-4566. Chang WT, Li J, Vanden Hoe

50、k MS, et al. Baicalein pr econditioning pr otects cardiomyocytes from ischemia-re pefusion injury via mitochondrial oxidant signaling. Am J Chin Med. 2013;41(2):315-331. Pendergrass KD, Boo pathy AV, Seshadri G , et al. Acute pr econditioning of cardiac p rogenitor cells with hydrogen p eroxide enha

51、nces angiogenic p athways following ischemia-re pefusion injury. Stem Cells Dev. 2013;22(17): 2414-2424. Li P, Ogino K, Hoshikawa Y , et al. AMP deaminase 3 plays a critical role in remote rep erfusion lung injury. Biochem Bio phys Res Commun. 2013;434(1):131-136. Suda S, Katsura K, Kanamaru T, et a

52、l. Val proic acid attenuates ischemia-re perfusion injury in the rat brain through inhibition of oxidative stress and inflammation. Eur J P harmacol. 2013;707(1-3):26-31. Kuo KK, Wu BN, Chiu EY , et al. NO donor KMUP-1 improves hep atic ischemia-re pefusion and hypo xic cell injury by inhibiting oxi

53、dative stress and pr o-inflammatory signaling. Int J Immuno pathol P harmacol. 2013;26(1):93-106. Mutoh J, Ohsawa M, Hisa H. Effect of naloxone on ischemic acute kidney injury in the mouse. Neur op harmacology. 2013; 71:10-18. Hassoun HT, Lie ML, Grigoryev DN, et al. Kidney ischemia-re pefusion inju

54、ry induces cas pase-de pendent pu Imonary apop tosis. Am J P hysiol Renal P hysiol. 2009; 297(1):F125-137. Ghali A, Mahfouz AK, Ihanam? ki T, et al. Dexmedetomidine versus propofol for sedation in p atients undergoing vitreoretinal surgery under sub-Tenons anesthesia. Saudi J Anaesth. 2011;5(1):36-4

55、1. 陈克研，等.右美托咪定抑制肾缺血/再灌注炎性反应www. CRTER .org Tl HI 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Gu J, Sun P , Zhao H, et al. Dexmedetomidine provides ren op rotection against ischemia-re pefusion injury in mice. Crit Care. 2011;15 (3):R153. Olutoye OA, Glover CD, Diefenderfer JW, et al. The e

56、ffect of intra op erative dexmedetomidine on p ost op erative analgesia and sedation in p ediatric p atients undergoing tonsillectomy and adenoidectomy. Anesth Analg. 2010;111(2):490-495. Afonso J, Reis F. Dexmedetomidine: current role in anesthesia and intensive care. Rev Bras Anestesiol. 2012; 62(

57、1):118-133. Shukry M, Miller JA. Up date on dexmedetomidine: use in nonintubated p atients requiring sedation for surgical procedures. Ther Clin Risk Manag. 2010;6:111-121. Bollucuoglu K, Hanci V, Yurtlu S, et al. Comp arison of propo fol-dexmedetomidine, tiop ental-dexmedeto- midine and etomidate-d

58、exmedetomidine combinations effects on the tracheal intubation conditions without using muscle relaxants. Bratisl Lek Listy. 2013;114(9):514-518. Shin HW, Yoo HN, Kim DH, et al. Pr eanesthetic dexmedetomidine 1 (ig/kg single infusion is a sim ple, easy, and economic adjuvant for general anesthesia.

59、Korean J Anesthesiol. 2013;65(2):114-120. Dong X, Xing Q, Li Y , et al. Dexmedetomidine protects against ischemia-re pefusion injury in rat skeletal muscle. J Surg Res. 2013. in p ress. P aul S, Bhattacharjee DP, Ghosh S, et al. Efficacy of intra-articular dexmedetomidine for p ost op erative analgesia in arthrosco pic knee surgery. Ceylon Med J. 2010;55(4):111-115. Short J. Use of dexmedetomidine for p rimary sedation in a general intensive care unit. Crit Care Nurse. 2010;30(1):29-39. Tan JA, Ho KM. Use of dexmedetomidine as a sedative and analgesic agent in critically ill adult p atients