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文档简介
1、几种常用离子去垢剂的使用 Triton X-100 是一种非离子型去垢剂 , 分子式: C14H22O(C2H4O)n 用途: Triton X-100 是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂 或称界面活性剂) ,常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是 膜蛋白。 性质: 1. Triton X-100 对细菌等微生物没有杀伤作用。 2. Triton X-100 在紫外波段下有光吸收( lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol ),因此,当缓冲液中存在 Triton X-100 时不能通过测定 280nm 光吸收来进行蛋白定量。 3. Triton X-10
2、0 常与 CHAPS 等 zwitterionic 去垢剂一起使 用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象。 4. Triton X-100 可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在 Immunostaining 时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100 的 PBS 或 TBS 。 5. Triton X-100非常稳定,密封避光+2 to +8 C条件下可以 长期保存。 6. Triton X-100 是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体。 7. Triton X-100 的密度为 1.07 g/ml , pH6. 0-8 . 0( 5%的溶液)。 8. Triton X-100 可以
3、高压灭菌。 9. 用 Triton X-100 来裂解细胞时, 0.1% Triton X-100 就足 够了,不过,达到 0.5% 时也没问题。 10. 蛋白酶 K 在含 1% Triton X-100 的溶液中依然保持活性。 11. 可以使用 Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除 Triton X-100 Tween: 吐温是(TWEEN)的音译,也叫吐温型乳化剂,为司盘(Span , 山梨醇脂肪酸酯)和环氧乙烷的缩合物,为一类非离子型去 污剂 ,于聚山梨酯分子中有较多的亲水性基团一聚氧乙烯基,
4、故亲水性强,为一种非离子型去污剂 1. 生物学实验中乳化蛋白,在使用时, Tween 和同类型的 Triton X-1OO( 聚乙二醇辛基苯基醚 )非离子型去污剂不破坏 蛋白的结构,可减少对蛋白质之间原有的相互作用的破坏。 离子型去污剂如 SDS 则破坏蛋白的结构。 2. 在生物学实验中作封闭剂, 封闭剂应该封闭所有未结合位 点而不替换膜上的靶蛋白、不结合靶蛋白的标委、也不与抗 体或检测试剂有交叉反应。 Tween-20 有复性抗原的作用, 可提高特异性的识别能力。在做 westen blot 时,用惰性蛋 白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点,可以降低抗体 的非特异性结合。最常见的封闭剂是 BSA 、脱脂奶粉、酪蛋 白、明胶和 Tween-20 (0.05 0.1% )稀溶液。 3. 常作为水包油(0/W )型乳化剂,使其他物质均匀在溶液 中分散,主要用于农药、食品、化妆品。与其他乳化剂如月 桂醇硫酸钠或司盘类合用,能增加乳剂的稳定性。吐温可用 来使精油乳化后溶解于水液体中, 完全发挥作用。 相对来说, 吐温 20 更温和一些,吐温 80 的乳化性更强一些 4. 药用: (1)可作某些药物的增溶剂。 (2 )有溶血作用,以吐温 -80 作用最弱。 (3)水溶液加热后可产生混浊,冷后澄明,不影响质量。 (4
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