体外受精和早期胚胎培养(上课)

1、3.23.2 体外受精和体外受精和 早期胚胎培养早期胚胎培养 资料：资料： 牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多， 其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多10001000倍左右，公倍左右，公 牛产生的精子数目就更多了牛产生的精子数目就更多了 1.1.引进一头良种成年奶牛需要引进一头良种成年奶牛需要3 3万万55万元万元 2.2.牛的生育率低，一头牛一胎只产一头犊牛，一生约生育牛的生育率低，一头牛一胎只产一头犊牛，一生约生育 四五次四五次 阅读：阅读：p69p69 v思考思考 v（1 1）什么是试管动

2、物技术？）什么是试管动物技术？ v（2 2）发展这种技术有什么好处？）发展这种技术有什么好处？ 快速繁殖快速繁殖良种家畜良种家畜 是指通过是指通过 使卵子和精子在使卵子和精子在 下成熟和受精、并通过培养发育为下成熟和受精、并通过培养发育为 ， 再经过移植产生后代的技术。再经过移植产生后代的技术。 人工操作人工操作体外条件体外条件 早期胚胎早期胚胎 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 （ ）和（）和（ ）的培）的培 养养 早期胚胎早期胚胎 体外受精体外受精 一、体外受精一、体外受精 1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 2.2.精子的采集和获能精子的

3、采集和获能 3.3.受精受精 二、早期胚胎培养二、早期胚胎培养 1.1.采集的方法有哪些采集的方法有哪些? ? 2.2.采集到的细胞能直接采集到的细胞能直接 和精子受精吗？为什么？和精子受精吗？为什么？ 1.1.采集的方法有哪些采集的方法有哪些? ? 2.2.采集到的精子能直接和卵采集到的精子能直接和卵 子受精吗？为什么？子受精吗？为什么？ 在体外受精要准备什么条件？在体外受精要准备什么条件？ 在体外如何培养胚胎？在体外如何培养胚胎？ 1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 用用促性腺激素促性腺激素处理后，从处理后，从输卵管输卵管中冲取中冲取卵卵 子子，直接直接与获能的精子在体外受精

4、。与获能的精子在体外受精。 如：小鼠、兔、猪、羊等如：小鼠、兔、猪、羊等 方法一：方法一： 超数排卵法超数排卵法 1.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 方法二：方法二： 从从屠宰的母畜卵巢屠宰的母畜卵巢中直接采集中直接采集卵母细胞卵母细胞。 适用于大家畜和大动物，如牛适用于大家畜和大动物，如牛 牛卵巢中采卵牛卵巢中采卵牛卵巢牛卵巢 方法三：方法三： 借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工借助超声波探测仪、内窥镜、腹腔镜等工 具，从具，从活体活体动物的卵巢中吸取动物的卵巢中吸取卵母细胞。卵母细胞。 适用于大家畜和大动物，如牛适用于大家畜和大动物，如牛 b b超活采仪超活采仪 方法二和三

5、采集的卵母细方法二和三采集的卵母细 胞需胞需经体外人工培养成熟经体外人工培养成熟 2.2.精子的收集和获能精子的收集和获能 1) 1) 收集的方法收集的方法: : 假阴道法假阴道法, ,手握法手握法和和电刺激电刺激等等 2) 2) 获能处理获能处理: : 培养法：培养法：把精子放入把精子放入获能液获能液中。中。 （适用对象：啮齿动物、家兔和猪适用对象：啮齿动物、家兔和猪） 化学法：化学法：把精子放入把精子放入一定浓度的肝素或钙离一定浓度的肝素或钙离 子载体子载体a23187a23187溶液中，化学药物诱导溶液中，化学药物诱导。 （适用对象：牛、羊适用对象：牛、羊） 3.3.受精受精 在在获能溶

6、液获能溶液或或 专用的受精溶专用的受精溶 液液中完成受精中完成受精 过程过程 离心的目的是什么？离心的目的是什么？ 卵母细胞的培养的卵母细胞的培养的 目的是什么？目的是什么？ 精液由精子和精清（精浆）两部分组成。精清中含有一精液由精子和精清（精浆）两部分组成。精清中含有一 种能抑制精子获能的物质，因此，在一般情况下，精液种能抑制精子获能的物质，因此，在一般情况下，精液 中的精子无法获能。精子获能处理前对精子进行离心处中的精子无法获能。精子获能处理前对精子进行离心处 理，目的是除去精清以利于精子获能。理，目的是除去精清以利于精子获能。 二、胚胎的早期培养二、胚胎的早期培养 1.1.受精卵的发育培

7、养：受精卵的发育培养：检查受精状况和受精卵的发育能力。检查受精状况和受精卵的发育能力。 2.2.培养液的成分：培养液的成分： 无机盐、有机盐、维生素、激无机盐、有机盐、维生素、激 素、氨基酸、核苷酸、素、氨基酸、核苷酸、血清血清等等 3.3.适时移植：适时移植：向受体移植或冷冻保存。向受体移植或冷冻保存。 不同动物胚胎移植时间不同不同动物胚胎移植时间不同 牛、羊：牛、羊：桑椹胚或囊胚阶段桑椹胚或囊胚阶段 小鼠、家兔：小鼠、家兔：卵裂期或囊胚阶段卵裂期或囊胚阶段 试管婴儿：试管婴儿：8 8个或个或1616个细胞阶段个细胞阶段 牛的体外受精胚胎的牛的体外受精胚胎的 工厂化生产已在一些发工厂化生产已

8、在一些发 达国家开展。达国家开展。 根据以上知识，根据以上知识， 你能设计出工厂化生产你能设计出工厂化生产 “试管牛试管牛”的流程图吗？的流程图吗？ 采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞 卵母细胞的体外培养卵母细胞的体外培养 采集良种公牛精子采集良种公牛精子 精子体外获能精子体外获能 体外受精体外受精 良种牛体外受精胚胎良种牛体外受精胚胎 胚胎移植胚胎移植 受体牛受体牛 良种犊牛良种犊牛 成熟期牛成熟期牛 屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的卵母细胞采集卵巢中的卵母细胞 “试管牛试管牛”工厂化生产的技术流程工厂化生产的技术流程 图图 有性生殖有性生殖 无性生殖无性生殖 核移植技术、

9、核移植技术、 胚胎移植胚胎移植 遵循遵循 不遵循不遵循 体外受精体外受精 胚胎移植胚胎移植 试管动物试管动物 克隆动物克隆动物 生殖方式生殖方式 技术手段技术手段 遗传物质遗传物质 遗传规律遗传规律 比较试管动物和克隆动物比较试管动物和克隆动物 来自来自2 2个个体个个体 主要来自核供体主要来自核供体 试管动物技术试管动物技术 体外受精体外受精 早期胚胎培养早期胚胎培养 卵母细胞卵母细胞 的采集的采集 精子的获精子的获 取取 受精：受精： 条件：条件： 培养液成分：培养液成分： 假阴道法假阴道法 手握法手握法 电刺激法电刺激法 方法一：用促性腺激素处理，使其超数排卵，从输卵方法一：用促性腺激素

10、处理，使其超数排卵，从输卵 管中冲取卵子管中冲取卵子 方法二：从屠宰母畜卵巢中采集方法二：从屠宰母畜卵巢中采集 方法三：直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞方法三：直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞 受精卵在发育培养液中培养受精卵在发育培养液中培养 无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、 核苷酸、血清等核苷酸、血清等 获能的精子获能的精子 培养成熟的卵子培养成熟的卵子 完成受精完成受精 小结小结 1 1、下列动物可用培养法进行精子体外获能、下列动物可用培养法进行精子体外获能 处理的是（）处理的是（） a a、牛、牛b b、羊、羊c c、驴、驴d d、家兔、家

11、兔 d d 巩固练习巩固练习 2 2、不同动物胚胎移植的时间不同，但一、不同动物胚胎移植的时间不同，但一 般不会在下列哪个时期移植（）般不会在下列哪个时期移植（） a a、卵裂期、卵裂期 b b、桑椹胚期、桑椹胚期 c c、囊胚期、囊胚期 d d、原肠胚期、原肠胚期 d d 3.3.下列关于试管动物技术的叙述正确的是：下列关于试管动物技术的叙述正确的是： a.a.应用该技术繁育后代的过程属于无应用该技术繁育后代的过程属于无 性繁殖类型性繁殖类型 b.b.应用该技术繁育后代的过程属于有应用该技术繁育后代的过程属于有 性繁殖类型性繁殖类型 c.c.试管动物技术是利用体细胞繁育后试管动物技术是利用体细胞繁育后 代的技术代的技术 d.d.试管动物技术培育动物过程全部在试管动物技术培育动物过程全部在 体外进行体外进行 b b 5.5.动物试管技术是指通过人工操作使精子和卵动物试管技术是指通过人工操作使精子和卵 子在子在 条件下成熟和条件下成熟和 ， 并通过培养发育为并通过培养发育为