唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计(特选内容)

1、唾液淀粉酶最适pH值的测定实验小组成员：刘倍材 何标才 揭春晓 李芮实验目的：1. 掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告2. 掌握唾液淀粉酶最适 PH的测定原理和方法。3. 熟悉影响酶促反应速度的因素。实验原理：1. 酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度 的影响，可用定性或定量的反应来观察。 利用碘与淀粉机器不同 程度纾解产物反应的颜色， 来衡量酶促反应的速度的快慢。 蓝色 紫红色一黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。 此为定性观察。2. 进一步利用郎伯一比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液 的浓度符合一定的比例关系

2、。 由于在被水解的程度也不一样。 当 唾液淀粉酶不能将完全水解时， 淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于 660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同， 吸光度值也不同。因此，通过测量 660nm处的吸光度值，可以了 解PH对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其 PH即为唾液淀粉 酶的最适PH实验步骤:1.缓冲溶液的配制。取12支试管进行编号1-12 ,分别 按下表加入试剂。编号123456PH5.86.06.26.46.66.80.2mol/L NaHPO(ml)0.400.620.931.331.882.450.2mol/L NaHPQ(ml)4.604.384.073.673.122

3、.55蒸馏水5.005.005.005.005.005.00编号789101112PH7.07.27.47.67.88.00.2mol/LNaHPO(ml)3.053.604.054.354.584.740.2mol/L NaHPQ(ml)1.951.400.950.650.420.26蒸馏水5.005.005.005.005.005.002唾液的采集。先给备取者一杯纯净水让其漱口， 将漱口液吐掉，让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口，在备取者眼前放上一些话梅，这时，备取者的唾液会不停地流出来。3.唾液的稀释。取10支试管，进行编号1 -10 ：进行稀释编号/1/2/3/4/5/6/7/8/910唾

4、液(ml)0.10.10.10.10.10.10.10.10.10.1蒸馏水 (ml)2.04.06.08.010.012.014.016.018.020.04.唾液稀释倍数的选取。另取10支试管，分别编上 A-K号，各取上述稀释的唾液各 1ml,分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入 1ml的0.02 %的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出，滴加23碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中 的一支，记录稀释倍数。5.最适PH的测定。另取12支试管,进行编号,按下表加入试剂。进行测定编号1234567891011120.02%淀粉 溶液(ml)1111111111113ml缓冲溶 液pH5.86.06.26.46.66.87.07.27.47.67.88.037摄氏度水浴10分钟稀释唾液(ml)11111111111137摄氏度水浴2分钟，取出，分别加入2-3滴碘液，以蒸馏水作为对照管， 用660nm波长测定吸光度Ab00