实验设计格式

1、实验设计大纲 实验名称： 农药对肝肾功能及血清胆碱酯酶的影响 课题来源: 自选 设计班级: 09级临床本科六班 设计人员： 王XX 设计日期： 2011年6月14日 指导老师：陈玮 一.实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问 题的思路 1. 目的与意义. 在科技进步的今天，许多健康性问题成为主流话题.心理和精神的变态越演越烈， 如喝农药自杀等.还有现代的许多农作物中农药的含量越来越多，而它对人体的健康有 着很大的威胁.而我国是农药中毒高发的国家.究其原因主要是：生产工艺落后，保 管不严、配制不当、任意滥用、操作不善、防护不良.制作动物模型，研究农药对 人体重

2、要器官的危害及其治疗对人健康有重要的意义 2. 国内外研究现状 自1863年Austin Flint首先报道晚期肝硬化患者可出现少尿等肾功能衰竭的表 现后，1924年Heyd首次将肝功能不全患者在胆道梗阻手术后发生的急性肾功能衰竭称为 肝肾综合征(hepatoren Msyndrone )至U 1987年意大利的Sassari召开的一次肝肾综 合征国际会议上才订出了诊断标准，并且对HRS的概念内涵取得了较统一的认识，1996 年国际腹水研究小组推荐了关于HRS的新定义，即 慢性肝病患者出现进展性肝功能衰竭 和门脉高压时.以肾功能损伤.肾血流灌注减少和内源性血管活性系统异常为特征的一种综 合征”

3、.肝肾综合征是慢性肝病、晚期肝硬化门脉高压患者常见的并发症，约占10 %左右.它 的特点是肾脏缺乏形态异常.肾小管功能正常.肾功能损害是功能性、潜在可恢复.其并非代 表肝硬化患者的终末期.也并非提示肝功能衰竭程度的加重.故应对HRS发病原因、发病机 制与诊断、治疗进行重新评价. 自1863年Austin Flint首先报道晚期肝硬化患者可出现少尿等肾功能衰竭的表现 后，1924年Heyd首次将肝功能不全患者在胆道梗阻手术后发生的急性肾功能衰竭称为肝 肾综合征” (hepatoren Msyndrone)至9 1987年意大利的Sassari召开的一次肝肾综合 征国际会议上才订出了诊断标准，并且

4、对HRS的概念内涵取得了较统一的认识，1996年 国际腹水研究小组推荐了关于HRS的新定义，即慢性肝病患者出现进展性肝功能衰竭和 门脉高压时.以肾功能损伤.肾血流灌注减少和内源性血管活性系统异常为特征的一种综合 征”.肝肾综合征是慢性肝病、晚期肝硬化门脉高压患者常见的并发症，约占10 %左右.它的 特点是肾脏缺乏形态异常.肾小管功能正常.肾功能损害是功能性、潜在可恢复.其并非代表 肝硬化患者的终末期.也并非提示肝功能衰竭程度的加重.故应对HRS发病原因、发病机制 与诊断、治疗进行重新评价. 3. 存在的问题 虽然有多种药物治疗农药中毒，那是没有最优最快的药物，在药物其作用之前，应该 做的紧急抢

5、救及相关的病症的确认，切忌误诊.用食农药后并且解救后的其他问题. 4. 解决问题的思路 复制动物模型，给药致使家兔出现肝肾功能的障碍，然后给以相应的解救药品，观 察家兔各项体征.并且对胆碱酯酶的影响测定.最后得到结论，做出农药对肝肾功能及全 血胆碱酯酶的影响结论. 5. 参考文献 2 3 4 5 6 7 8 9 10 ( 阮诗玮，郑弘义 杨爱国，王智，孙光，郑京,吴竟,洪江淮；慢性肾炎及中医证型与血中内皮素、 医学院学报；1999年04期 石志芸，施赛珠，陈剑秋，李晓明,何婉婷，邓守贞：血瘀证患者血浆内皮素测定的临床意义J； 辽宁 胡克武，丁俊:肝肾阴虚型高脂血症治疗的临床分析J；辽宁中医杂志

6、；1996年12期 刘晓秋，梁幼雅，贾晓林，唐惠琼，蔡文成:脾虚证患者唾液淀粉酶活性变化与一氧化氮相关性的 临床；2002年04期 王元勋，袁静，张敏华，韩明向，李泽根：肺气虚证的实验研究川血液流变学及血浆TX J；甘肃中医学院学报；1994年01期 石林阶，陈国林，陈昌华罗团连,舒毅刚，李学文，陈泽奇，林源:肝血虚证、肝血虚兼脾气虚证患者 平的相关研究J；中国医药学报；1997年05期 蔡圣荣，方志斌，黄开泉，王元勋:肺气虚证大鼠血液流变性指标与内皮素、血栓素水平的相关 报；2003年05期 刘强:心气虚证患者血中 ET、CGRP、NO和NOS含量变化J；山西中医学院学报；2004年0 :急

7、性心肌梗塞患者血小板膜表 吾柏铭，潘宜智，洪小苏，刘励军，张莉丽，高岚，陈建昌 膜蛋白血浆凝血噁烷 B_2、6 酮一前列腺素F_ （ 1a）的动态变化及其临床意义 J；中国 李君,徐锡鸿，戴关海，卢莺燕，李凫坚:肺气虚证大鼠模型内皮素含量变化的实验研究 刘红旭，黄丽娟，金玫，夏军，王玉明，王斌，金敬善，邓新荣 及治疗影响研究J；北京中医；1995年06期 11 J；辽宁中 :血瘀胸痹患者血浆内皮源性收缩/舒张 12 赖世隆，王奇，丘梅清，梁伟雄，谭芬来,谢红,秦莉莉:血瘀证、气虚血瘀证患者血浆TXA_2、PGI_2水平与微 及其相关性分析 J；中华中医药杂志；1990年06期 13 汤健;心钠

8、素（Cardionatrin）心脏产生的一种激素 J:北京大学学报（医学版）;1984年 03期 14 15 张全贵：内皮素测定在心血管疾病中的意义J；重庆医学；1993年01期 原世麟，张福琴,李志超，陈金城:家兔实验性呼吸窘迫综合征时肺微栓、白细胞和心阻抗参数 报;1987年05期 J；第四军医大 TXB 2、6-Keto P J；贵阳中医学院学报J 王元勋，袁静，张敏华，韩明向，李泽根：肺气虚证的实验研究川血液流变学及血浆 16 平J；甘肃中医学院学报；1994年01期 17吴祥声，安乙敏：缩血管肽一一内皮素J；国际检验医学杂志；1993年05期 吴玉生，姜立萍，王占奎：内皮素、降钙素基

9、因相关肽与急性脑梗塞辨证分型的关系 :实验性SD大鼠肺气虚证”血液流变学改变 18期 杨牧祥，李澎涛，方朝义，韩树芬，王占波，王生茂，曹刚 19 能状态研究J1；河北中医；1996年05期 二.实验设计万案（实验设计目标，拟解决的主要问题，实验动物设计，实验专业设计，实 验统计设计，实验方法设计，可行性分析 ，预期结果，实验设计工作时间安排） （一）实验设计目标 探讨误食农药后，对集体肝肾功能的影响， 它的主要表现特征， 给出相应的解救药 品后家兔各项体征的变化，设计不同药量的模型作对比学习血清肝肾功能及全血胆碱酯酶 活性的测定 （二）拟解决的关键问题 观察有机磷酯农药中毒后的症状和特征.观察

10、阿托品和碘解磷定对急性有机农药中毒 的解救效果，并且比较两中药物的解救原理和作用特点 （三）实验设计 1. 实验专业设计 选用家兔作为实验动物，给予一定量的农药后再给予阿托品和碘解磷定，观察对实验性 农药治疗作用，观察家兔的呼吸频率、心率、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌紧张、肝功 能、肾功能等实验指标 2. 实验动物设计（遗传背景，微生物质量控制，育种繁殖，饲养管理，动物模型，实验 动物学技术） 2.1实验动物的选择 我们选用家兔作为实验动物，有以下几点理由： 1）、家兔易得到，容易饲养，在科研工作中被广泛利用 2）、家兔肝肾相对较大，易于得到样品，能在称重过程中减少实验误差 3. 实验统计设

11、计 实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则 （1） 随机：选正常成年健康重相近的家兔2只，雌雄兼用. （2）对照：本组实验做了空白对照和实验对照，在前面的专业设计里已经提及 （3） 统计数据收集：本实验搜集计量资料，初步确定对各组实验数据的比较分为实验 值和基础值比较. （4） 统计数据分析： 酶活力值=（A1+A2-A1-A样）/（A3-A1） 酶活力百分比=（酶活力值（给药后或解救后）/酶活力值（给药前） 4. 实验方法设计 4.1实验技术路线 全血胆碱酯酶活性测定实验操作步骤 试剂（ml） 4.2实验技术方法 1、取家免两只，称重并编号观察家免的活动情况，测量并记录正常指标，包

12、括呼吸 频率、心率、大小便、唾液分泌、瞳孔大小、肌肉紧张及有无肌震颤情况 2、 从1号家免耳中动脉取血约 0.5ml，分别加入2号试管和4号试管各0.15ml,充分 震摇，混合均匀，其中2号试管为对照管，4号试管用以测定正常家免全血胆碱酯 酶活性.（取血法：先轻弹免耳，使血管充分扩张，耳中动脉用手术刀片割破约2mm 伤口，让血液自流，以刻度吸管吸血，其中一份血采用肝素法抗凝，另一份不抗凝.） 3、 1号家免从耳缘静脉注射0.1%阿托品1mg/kg,密切观察上述指标有何改变.当毒覃 碱样症状消失时（约 10min）,记录作用时间，按上法取血0.15ml加入6号试管， 用以测定家免阿托品解救后的胆

13、碱酯酶活性. 4、2号家免按1号家免同样方法取空白血测定中毒前胆碱酯酶洗发敌百虫中毒后，以 2.5%PAM50mg/kg代替阿托品进行解救，两样按上法采取中毒后和解救后血样，测定 各血样胆碱酯酶活性. 5、 将实验中甩采集的非抗凝血的血样离心取血清用于肝肾功能的检测（采用半自动生 化仪）. 6、 将抗凝血的血样按上表实验操作步骤测定全血胆碱酯酶活性，比较1号和2号家免 解救后的症状、体重变化以及及胆碱酯酶活性变化有何不同 （四）可行性分析 1、家兔易得到，容易侍养，在科研工作中被广泛利用 2、其中使用的药品比较常用，市场上可以买到，价格不贵 3、手术器材和设备均为实验室常用，手术方法我们也相对熟练 （五）预期效果 农药中毒后：瞳孔扩大、大小便失禁、肌震颤、胆碱酯酶活力下降、肝肾功能障碍等 注射阿托品或者碘解磷定