牙周病微生物学课件

1、牙周病微生物学1 第四章 牙周病微生 物学 牙周病微生物学2 第一节 概述 n目前认为牙周病是多因素疾病，牙菌斑 细菌及其产物是引发牙周病的始动因子， 但牙周病的发生还受其他局部和全身因 素的影响，各因素相互关系，互为协同， 或者相互影响、互为拮抗。 n口腔正常菌群 n牙周生态系 n牙周病的致病因子 n牙周病病因研究观点的变迁 牙周病微生物学3 口腔正常菌群 n牙周生态环境复杂，菌群繁多 n有氧到无氧各种氧张力的环境 n口腔合适的温度3537 n营养 n合适的湿度 n牙周袋微生物500种，需氧、厌氧、兼性 厌氧；真菌、酵母菌、支原体、原虫、 病毒 牙周病微生物学4 口腔正常菌群 n正常口腔菌群

2、动态平衡的意义 n生物屏障，抑制外源性微生物 n维持口腔或全身微生物的生态平衡 n刺激宿主免疫系统 n产生营养功能，某些细菌产生维生素K n一般这些菌群对宿主无害，甚至有益， 称之为口腔正常菌群或固有菌群。 牙周病微生物学5 口腔正常菌群 n微生物之间相互关系 n共生：彼此有利，提供营养或能量 n竞争：竞争营养物质或空间 n拮抗：某种微生物杀死或抑制另一种微生物 牙周病微生物学6 口腔正常菌群 n牙周菌群是动态平衡，不是恒定不变的， 受口腔卫生、饮食、年龄等口腔局部或 全身因素影响，失去平衡将会导致 n内源性感染 n为外源性感染提供条件 n致敏宿主，造成牙周组织破坏 牙周病微生物学7 牙周生态

3、系 n牙周生态系：牙周正 常菌群之间以及它们 与宿主之间的相互作 用称为牙周生态系。 n牙周袋病损分区 n口腔微生物和宿主之 间动态平衡的影响因 素 牙周病微生物学8 牙周病微生物学9 现代牙周病学观点 牙周病微生物学10 牙周病微生物学11 第二节 牙菌斑生物膜 n牙周病的始动因子牙菌斑生物膜 n生物膜的概念：适于微生物生存的实体，是 微生物在自然界存在的主要生态形式，广泛 存在于海洋、湖泊、土壤、船底和沉积物等， 也存在于人体和动物的口腔、肠腔、膀胱与 皮肤等部位，一般在膜表面或界面存在较多。 牙周病微生物学12 牙周病的始动因子牙菌斑生物膜 n牙菌斑生物膜（dental plaque b

4、iofilm） 牙菌斑生物膜是口腔中不能被水冲去或 濑掉的细菌性斑块，是由基质包裹的互 相粘附、或粘附于牙面、牙间或修复体 表面的软而未矿化的细菌性群体。 n特点：以生物 整体生成的微生物生态群 体；细菌能抵抗宿主防御机制发挥作用。 牙周病微生物学13 牙 菌 斑 牙周病微生物学14 牙菌斑生物膜 牙周病微生物学15 牙菌斑生物膜形成过程： n获得性薄膜 ：由唾液蛋白或糖蛋白吸附至牙面， 形成一层无结构、无细胞 的薄膜 ， 选择性吸附细菌至牙面， 促进早期 菌黏附定植及细菌共聚。 n细菌黏附和共聚：G+球菌丝状菌、放线菌厌 氧菌、能动菌和螺旋体 n菌斑成熟：12小时可由菌斑斓染色剂显示，9天形

5、 成各种细菌的复杂生态群体，10-30 天菌斑发育 成熟达到高峰。 牙周病微生物学16 *菌斑微生物作为牙周病始动因子的证据： n实验性龈炎观察：菌斑的堆积直接引起牙龈炎症； n流行病学调查：牙周病的分布、患病 和严重程度与该人群 的口 卫生情 、菌斑积聚正相关； n机械清除菌斑或抗菌治疗效果可阻止牙周组织破坏； n动物实验研究：无菌动物实验证明仅有牙石或丝线结扎等 异物刺激，无细菌不引起龈炎； n宿主免疫反应：血清或龈沟液中有对牙周可疑致病菌的高 滴度特异性抗体。 牙周病微生物学17 牙周病微生物学18 食物对 牙周病微生物学19 龈下菌斑 n附着性龈下菌斑附着性龈下菌斑 attached

6、subgingival plaqueattached subgingival plaque n非附着性龈下菌斑非附着性龈下菌斑 unattached subgingival plaqueunattached subgingival plaque 牙周病微生物学20 牙周病微生物学21 牙周病微生物学22 牙周病微生物学23 牙周病微生物学24 牙周病微生物学25 接触组织接触组织优优 势势 菌菌致致 病病 性性 龈上菌斑龈上菌斑 釉质或龈缘处釉质或龈缘处 暴露的牙骨质暴露的牙骨质 G G 需氧菌和 需氧菌和 兼性菌兼性菌 龋病、龈炎、龋病、龈炎、 龈上牙石龈上牙石 附着性附着性 龈下菌斑龈下菌

7、斑 牙周袋内牙周袋内 的牙骨质的牙骨质 G G 兼性菌和 兼性菌和 厌氧菌厌氧菌 根面龋、根面吸根面龋、根面吸 收收 牙周炎、龈下牙牙周炎、龈下牙 石石 非附着性非附着性 龈下菌斑龈下菌斑 龈沟上皮、龈沟上皮、 结合上皮、结合上皮、 牙龈结缔组织牙龈结缔组织 G G厌氧菌和厌氧菌和 能动菌能动菌 牙周炎、牙周炎、 牙槽骨吸收牙槽骨吸收 牙周病微生物学26 龈上菌斑龈上菌斑龈下菌斑龈下菌斑 清洁作用清洁作用唾液和摩擦唾液和摩擦无无 滞滞 留留附附 着着机机 械械 性性 代代 谢谢以碳水化合物为主以碳水化合物为主碳水化合物和蛋白质碳水化合物和蛋白质 环环 境境需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧兼性厌氧或

8、专性厌氧兼性厌氧或专性厌氧 可可 动动 菌菌少少多多 优势菌群优势菌群 G G+ +丝状菌和口腔链丝状菌和口腔链 球菌球菌 G G厌氧杆菌厌氧杆菌 宿主防御宿主防御唾唾 液液龈龈 沟沟 液液 牙周病微生物学27 牙周病微生物学28 菌斑致病的学说 n近近100100多年来关于牙周病细菌病因，由于多年来关于牙周病细菌病因，由于 时代背景研究方法、认识观点不同，形时代背景研究方法、认识观点不同，形 成了争论最激烈的两大派系成了争论最激烈的两大派系 n非特异性菌斑学说非特异性菌斑学说 Non-specific plaque hypothesisNon-specific plaque hypothes

9、is n 特异性菌斑学说特异性菌斑学说 Specific plaque hypothesisSpecific plaque hypothesis 牙周病微生物学29 非特异性菌斑学说非特异性菌斑学说 18901890年年 MillerMiller提出牙周病是由非特异性的口腔正常菌群的混合提出牙周病是由非特异性的口腔正常菌群的混合 感染所致感染所致 主要观点主要观点 不同个体、不同位点以及不同类型的牙周病之间菌斑组成相似，不同个体、不同位点以及不同类型的牙周病之间菌斑组成相似， 牙周病的发生发展是菌斑量堆积的结果，即由非特异的口腔菌群牙周病的发生发展是菌斑量堆积的结果，即由非特异的口腔菌群 混合

10、感染所致。混合感染所致。 依据依据 1965 Le 1965 Le 报告的实验性龈炎报告的实验性龈炎 临床观察临床观察: :菌斑多，牙龈炎症也重。菌斑多，牙龈炎症也重。 总体清除菌斑，对牙周病治疗有效。总体清除菌斑，对牙周病治疗有效。 不能解释的现象不能解释的现象 牙周病的位点差异和个体差异牙周病的位点差异和个体差异 牙周病微生物学30 特异性菌斑学说 n主要观点：不同类型的牙周病由不主要观点：不同类型的牙周病由不 同的特异性细菌所致同的特异性细菌所致 n依据：局限性侵袭性牙周炎患者深依据：局限性侵袭性牙周炎患者深 牙周袋中检出牙周袋中检出AaAa。 n存在问题：不同类型的牙周病并未存在问题：

11、不同类型的牙周病并未 能分离出其特殊的致病菌能分离出其特殊的致病菌 牙周病微生物学31 菌群失调学说 n破坏性牙周病是由于口腔中的正常菌群 在龈下定居，其中某些毒力较大的细菌 出现频率高，所占比例和绝对数也高， 并具有干扰宿主防御系统的能力，因此 在发病中的作用较另一些细菌大，牙周 炎是一种机会性感染。 牙周病微生物学32 牙周病微生物学33 牙周病微生物学34 牙周病微生物学35 第三节牙周微生物的致病机制 牙周病微生物学36 牙周病微生物学37 牙周病微生物学38 牙周病微生物学39 牙周病微生物学40 牙周病微生物学41 第四节牙周致病菌 n牙周致病菌的概念：口腔正常菌群中仅 少数细菌与

12、牙周病的发生、发展密切相 关，在各型牙周病的病损区，常或分离 出一种或几种优势菌，它们具有显著的 毒力或致病性，能通过多种机制干扰宿 主防御能力，具有引发牙周破坏的潜能， 称之为牙周致病菌。 牙周病微生物学42 确定病原菌的确定病原菌的Koch法则（法则（1870s）：）： 在同样的疾病中能发现同一种病原菌在同样的疾病中能发现同一种病原菌 能从该疾病中分离出病原菌纯培养能从该疾病中分离出病原菌纯培养 纯培养菌接种于易感动物能引起相似的疾病纯培养菌接种于易感动物能引起相似的疾病 能从实验动物中重新获得病原菌纯培养能从实验动物中重新获得病原菌纯培养 如当时涉及的炭疽、结核、霍乱等病如当时涉及的炭疽

13、、结核、霍乱等病 变链基本符合此法则被视为龋病的病原菌。变链基本符合此法则被视为龋病的病原菌。 牙周病微生物学43 识别牙周可疑致病菌的识别牙周可疑致病菌的Socransky标准（标准（1992）: 在疾病部位证实细菌数目增多在疾病部位证实细菌数目增多 通过治疗去除或减少病损部的细菌，疾病中止通过治疗去除或减少病损部的细菌，疾病中止 宿主具有相应的细胞或体液免疫反应宿主具有相应的细胞或体液免疫反应 在实验动物模型中能引起疾病在实验动物模型中能引起疾病 具有毒性因子能引起牙周组织的破坏。具有毒性因子能引起牙周组织的破坏。 牙周病微生物学44 证据充分的致病菌证据充分的致病菌 伴放线放线杆菌（伴放

14、线放线杆菌（Actinobacillus actinomycetemcomitansActinobacillus actinomycetemcomitans，AaAa 牙龈卟啉单胞菌牙龈卟啉单胞菌（Pophyromonas gingivalis,PgPophyromonas gingivalis,Pg 福赛坦氏菌（福赛坦氏菌（Tannerella forsythiaTannerella forsythia，TfTf 福赛类杆菌（福赛类杆菌（Bacteroides forsythus,BfBacteroides forsythus,Bf 中等证据的致病菌中等证据的致病菌 直肠弯曲菌直肠弯曲菌 微

15、小消化链球菌微小消化链球菌 结节真杆菌结节真杆菌 中间链球菌复合体中间链球菌复合体 核梭杆菌核梭杆菌 牙密螺旋体牙密螺旋体 中间普氏菌中间普氏菌/ /变黑普氏菌变黑普氏菌( (P.nigrescensP.nigrescens,Pn) ,Pn) 1010种与牙周病关系较为密切的微生物种与牙周病关系较为密切的微生物 牙周病微生物学45 伴放线放线杆菌伴放线放线杆菌( (A actinomycetemcomitans，Aa) 生物学特性：生物学特性：革兰阴性短杆菌，无芽胞、无动力，微需氧菌，最适革兰阴性短杆菌，无芽胞、无动力，微需氧菌，最适 生长温度生长温度3737 致病性和临床意义：致病性和临床意

16、义： 血清学分型a, b, c, d, e 5个血清型(serotype)，b b型 为侵袭性牙周炎龈下菌斑中最常见的血清型，毒力 最强，d d型和型和e e型较少见型较少见，但在我国人群中分离出的 以c型为主，b型较少。 致病作用： 分泌白细胞毒素(leukotoxin) 降低宿主抵抗力： 释放内毒素及破骨细胞激活因子 骨吸收 产生成纤维细胞抑制因子 抑制成纤维细胞合成 Aa与局限型侵袭性牙周炎关系密切。 牙周病微生物学46 牙龈卟啉单胞菌牙龈卟啉单胞菌( (Porphyromonas gingivalis, Pg) ) 以前称为牙龈拟杆菌(Bacteroides gingivalis, B

17、g) 致病性和临床意义：致病性和临床意义： 产生附着和凝集因子 Pg能附着于颊粘膜、牙周袋上 皮及菌斑中其他细菌的表面 抑制白细胞趋化因子在宿主细胞的表达 阻断防御反 应，抵抗宿主先天性免疫系统 释放外膜膜泡或脱落胞壁片断 吸引和结合宿主的先 天性免疫成分，保护菌斑内其它细菌免受攻击 分泌胞外蛋白酶(如牙龈素（gingipains）、胶原酶、 肽酶)，内毒素、酸性和碱性磷酸酶、吲哚、有机酸等 代谢产物 牙周组织破坏 Pg是牙周病、尤其是慢性牙周炎病变区或活动部位最 主要的优势菌 牙周病微生物学47 福赛坦氏菌（福赛坦氏菌（Tannerella forsythia, Tf） 以前称福赛拟杆菌(

18、(Bacteroides forsythus，Bf) ) 致病性和临床意义：致病性和临床意义： 它能产生大量的毒性产物和酶，如吲哚，-岩藻糖 苷酶、N-乙酰-葡萄糖甙酶和胰蛋白酶样酶等，导 致组织损伤。 Tf常在重度牙周炎的附着丧失处的龈下菌斑中检出， 常与牙龈卟啉单胞菌、齿垢密螺旋体或具核梭杆菌 同时检出，吸烟者的检出率明显升高。 牙周病微生物学48 具核梭杆菌 n龈上菌斑、龈下菌斑、牙周袋及感染根管优势 菌，检出数量、频率与牙周组织的炎症、破坏 程度之间存在着正相关系。 n生物学特性：革兰阴性，无芽胞，专性厌氧， 最适生长温度37 n致病性和临床意义 n既可与早期定植菌如链球菌、放线菌共聚

19、，又可与 晚期定植菌如卟啉单胞菌、放线杆菌、螺旋体共聚， 是早后期定植菌的粘接桥。 n能作用于甲硝唑，失去抗菌作用 牙周病微生物学49 中间普氏菌 n生物学特性：革兰阴性，杆菌，专性厌 氧，最适生长温度3537 n致病性： n与中度或重度牙龈炎、急性坏死性溃疡性龈 炎和慢性牙周炎有关 n妊娠期龈炎中为主要优势菌，妊娠期孕激素 增多，利用孕激素来满足其对VitK的需要 牙周病微生物学50 粘放线菌 n生物学特性：革兰阳性杆菌，兼性厌氧 n致病性： n形成龈炎的初期起作用 n动物实验中可引起牙周炎和根面龋 牙周病微生物学51 齿垢密螺旋体 n生物学特性：最适生长温度37，pH7.0 n致病性和临床

20、意义 n机械性穿入 n致病性酶和侵袭性酶 n抑制成纤维细胞 n抑制免疫细胞 牙周病微生物学52 各型牙周病相关的可疑致病菌各型牙周病相关的可疑致病菌 牙周病类型牙周病类型 可疑致病菌种类可疑致病菌种类 牙龈炎牙龈炎 粘性放线菌粘性放线菌(Actinomyces viscosus,Av)(Actinomyces viscosus,Av) 内氏放线菌内氏放线菌(Actinomyces anaeslundii,An)(Actinomyces anaeslundii,An) 微小消化链球菌微小消化链球菌(Peptostreptococcus (Peptostreptococcus micros)micros) 黄褐二氧化碳噬纤维菌黄褐二氧化碳噬纤维菌(Capnocytophaga (Capnocytophaga orchracea)orchracea) 牙龈二氧化碳噬纤维菌牙龈二氧化碳噬纤维菌(Capnocytophaga (Capnocytophag