ELISA试验报告

1、酶联免疫吸附测定实验报告 ELISA 一实验原理 酶联免疫吸附测定（enzyme-l inked immunosorbent assay,简称ELISA）是在免疫酶技 术（immunoenzymatic techniques）的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术。ELISA过 程包括：抗原（抗体）吸附在固相载体上一一包被，加待测抗体（抗原），加相应酶标记抗体（抗 原），生成抗原（抗体）-待测抗体（抗原）-酶标记抗体的复合物，在于该酶的底物反应生成有 色产物。然后借助分光光度计的光吸收计算抗体（抗原）的量。待测抗体（抗原）的定量与有色 产生成正比。 ELISA常用的有4种方法，分别是直接法、

2、间接法、双抗体夹心法和竞争法。在我们的 实验中，采用的是间接法。主要步骤有：将抗原吸附于固相载体表面；加抗体，形成抗原- 抗体复合物；加酶标抗体；加底物（测定底物的降解量二抗体量）。 二实验用品及器具 1聚苯乙烯微量细胞培养板（平板，96孔） 2酶联免疫检测仪 3辣根过氧化物酶羊抗兔IgG 4包被液 L碳酸缓冲液（pH Na2C0; NaHCOi 墓镭水稀释至lOOmL 5 稀释液（PBS-Tween） NaCl8g KC1 KH2P0. 四实验数据 内含溶液说明 Well 1 Well 2 Well 3 Average (the green numbers are not used) 2 1

3、:400 3 1:800 4 1:1600 5 1:3200 6 1:6400 7 1:12800 8 1:25600 9 1:51200 10 No first Antibody ( 11 No Antigen 数据图表如下：(从图表中可以看出，在1:400到1 ：51200浓度的范围内，数据基本上是呈线 由图线可知，在误差范围内，吸光度与被检血淸浓度接近正比关系。这与公式吸光度=e X光径X浓度”是吻合的。 五实验后感想 这是我进入大学以来真正意义上的第一个实验，虽然整个实验的过程可以说有些枯燥乏 味，因为大部分的时间都在等待中度过，但是不得不说，在这次实验中还是收获了不少的东 西。 首先

4、，这次实验所涉及的内容是我以前完全没有接触过的。在中学里学到的知识也许只 能勉强解释一下抗原抗体是什么，是怎么工作的，但是在定量检测的这一块却从来没有接触 过。所以这一次的实验也算是给自己开了开眼界，增长了知识。也许在以后的学习中，可能 也会用到相关的知识，毕竟我是学生物医学工程的，以后难免会遇到一些有关的问题，这也 算是一次提前学习吧。 其次，相对于其他实验来讲，像这种类型的实验，对于每种试剂的量的要求是相当高的， 也就是说，可能只是手轻轻一抖，整个实验就必须得重新来过，所以这也是一个对自己的耐 心、细心程度的锻炼。 做实验，团队合作是必不可少的，一个人做一个实验，总会出现这样那样的问题，导致 实验失败，而两人的团队合作，就会使错误发生的概率降到很低，从而大大增加了实验的效 率。 最后还要感谢辛苦的老师和助教们。在这次实验中，让我见识了一位最可爱的生物老师 余老师，在她不到一个小时的讲解时间里，都不知道被我.们的笑芦打断多少次了，幽默