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文档简介

1、羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇

2、膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁

3、肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅

4、袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀

5、膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇

6、羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁

7、膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅

8、肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿

9、衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄

10、肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈

11、羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅

12、膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿

13、肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃

14、衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈

15、肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂

16、羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆

17、膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃

18、罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇

19、袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂

20、肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆

21、羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀

22、腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅

23、羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿

24、芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆

25、肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀

26、袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄

27、膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀蒂蚆膈荿薄袂肄蒈蚇蚅羀蒇莆袀袆蒆葿蚃芅蒅蚁羈膁蒄螃螁肇蒄蒃羇羃肀薅蝿衿聿蚈羅膇膈莇螈肃膈蒀羃罿膇薂螆羅膆螄蕿芄膅蒄袄膀膄薆蚇肆膃虿袃羂膂莈蚅袈节蒀袁膆芁薃蚄肂芀螅衿肈艿蒅蚂羄芈薇羇袀芇虿螀腿芆荿羆肅芆蒁蝿羁莅薄羄袇莄蚆螇膆莃莆薀膁莂薈袅肇莁蚀蚈羃莀莀袃衿莀 iso15189质量管理体系范 生化室作业指导书文件编号:区妇幼保健院 -3-sf-0161 第a版 编制: 审核: 批准: 生效日期:2010年2月22日区妇幼保健院检验科目 录 修 订 页 血清总胆

28、红素(t-bil)测定 1. 实验原理血清中的胆红素分为直接(结合)胆红素和间接(未结合)胆红素。大多数方法是在1883年ehrlich提出的重氮法胆红素测量法,一些改良的方法已被用来增进反应。这些改良的方法是使直接胆红素直接和重氮化合物进行反应,生成一种有颜色的化合物,而间接胆红素需要一种溶剂,如表面活性剂后才能进行反应。申能总胆红素试剂是改良的重氮法。使用一种稳定的重氮盐,2,4-二氯苯胺重氮盐(dca),与胆红素反应,形成红色偶氮化合物,它在540nm吸光度最大。在540/600nm时的吸光度与标本中总胆红素的浓度成正比。胆红素+dca 色偶氮化合物表面活性剂2. 标本: 12.1 病人

29、准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型:血清、肝素或edta血浆,应避光保存。3. 标本存放:1525保存可稳定2天;28保存可稳定7天;-20保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。4. 标本运输:常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6. 实验材料6.1 试剂:申能总胆红素试剂盒(141 0817170 1 试剂1试剂2)6.1.1 试剂组成试剂1:664 ml磷酸缓冲液 40mmol/l氯化钠 9g/l表面活性剂,稳定剂 适量试剂2:616 ml2,4-二氯苯胺重氮盐 1mmol/l盐酸 30mmol

30、/l表面活性剂 适量 6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用,不要入口,毒性还末确定;警告!腐蚀剂!不要入口;避免和眼睛,皮肤或衣服接触,如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟,接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。6.2 校准品:使用diasys公司提供的trucal u校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.sop文件6.3 质控品

31、:参见生化检验校准品和质控品.sop文件7. 仪器:奥林巴斯au1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件。8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件。9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室 au总胆红素(mol/l) = 校准液浓度as12. 参考值范围:婴儿: 出生24小时 150mol/l出生第2天 22-193mol/

32、l出生第3天 12-217mol/l出生第46天 1.7-216mol/l儿童: 一个月 3.4-17mol/l成年人: 1.7-21mol/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义:胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为gilb

33、ert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 14. 操作性能14.1 线性范围:1.2513mol/l14.2 精密度:精密度的评估是根据nccls推荐的标准方法,au1000批内精密度小于3%或sd0.07,总精密度小于5%或sd0.10。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls的规则。5t-bil检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.00x-0.00mo

34、l/l;r=1.000。 14.4 灵敏度:本试剂的检测限为1.2mol/l。 14.5 病人结果可报告范围:1.2513mol/l15. 超出范围结果处理:本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。16. 病危报警值的处理 当新生儿血清标本测定结果总胆红素340mol/l时,在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。 17. 方法局限性17.1 本法线性上限为513mol/l。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。17.2 干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度170

35、4mol/l,血红蛋白浓度5.00g/l,甘油 三酯浓度22.6mmol/l时没有观察到干扰。18. 补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。19. 参考文献1. thomas l ed. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt:th-books verlagsgesellschaft; 1998.p.192-202.2. tolman kg, rej r. liver function. in: burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical ch

36、emistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999. p.1125-77.3. rand rn, di pasqua a. a new diazo method for the determination of bilirubin. clin chem 1962;6:570-8.20. 其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。 血清直接胆红素(d-bil)测定 1. 实验原理直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物,在酸性条件下呈红色。2. 标本:2.1 病人准备:无特殊要求。最好用

37、禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型:血清、肝素或edta血浆,应避光保存。3. 标本存放:1525保存可稳定2天;28保存可稳定7天;-20保存可稳定3个月,如冰冻保存,不可反复冻融!。4. 标本运输:常温条件下避光保存运输。5. 标本拒收标准:标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6. 实验材料6.1 试剂:申能总胆红素试剂盒:141 0827170 1 试剂试剂26.1.1 试剂组成试剂1:1664mledta-na2 0.07mmol/l氯化钠 6.6g/l氨基磺酸 70mmol/l试剂2:616ml2,4-二氯苯胺重氮盐 0.09mmol/l盐酸 130mmol/le

38、dta-na2 0.02mmol/l6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于28,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存。试剂不可冰冻。6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6.1.5 注意事项:此试剂为体外诊断用。警告!腐蚀剂!不要入口。避免和眼睛,皮肤或衣服接触。如果接触到,立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服,立即寻找医疗保护。6.2 校准品:使用diasys公司提供的trucal u校准品对自动分析仪进行校准,参见生化检验校准品和质控品.sop文件 6.3 质控品:参见

39、生化检验校准品和质控品.sop文件 7. 仪器:奥林巴斯au1000生化分析仪 8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件 8.2 仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室以trucal u复合校准品校准仪器后,在病人结果可报告范围 au直接胆红素(mol/l) =-校准液浓度 as 12. 参考值范围:6.8mm

40、ol/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义:胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强,几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中,胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血(肝前黄疸)、实质的肝损伤(肝性黄疸)和胆管堵塞(肝后黄疸)都会导致血液胆红素增高,形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症,称为gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多,使6070%的婴儿血液出现总胆红素增高。常用的胆红素检测方法能检测总胆

41、红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素,因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。 14. 操作性能14.1 线性范围:1.7171mmol/l14.2 精密度:精密度的评估是根据nccls推荐的标准方法,au1000批内精密度小于4%或sd0.04,总精密度小于5%或sd0.07。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls的规则。5 14.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对85个样品进行dbil检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=0.95x+0.68mol/l;r=0.995。 14.4 灵敏度:1.

42、7mmol/l。14.5 病人结果可报告范围:1.7171mol/l15 超出范围结果处理 本法线性上限为171mmol/l。样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。 16. 病危报警值的处理 无。 17. 方法局限性17.1 本法线性上限为171mmol/l。样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。17.2干扰物质:当样品中抗坏血酸浓度1704mol/l,甘油三酯浓度22.6mmol/l时没有观察到干扰。血红蛋白浓度0.50g/l将产生干扰。18. 补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。

43、19. 参考文献:tietz, n.w.(ed), fundamentals of clinical chemistry, 3 edition, w.b. saunders,1987. van den bergh, a. and mueller, p., biochem z,77:90,1916 nccls, interference testing in clinical chemistry, ep7-p,1986.young, d.s., effects of drugs on clinical laboratory tests, 4 edition, aacc press, 1995.

44、nccls, evaluation protocol ep5-t2,1992.rand, r. n., di pasque, a., clin chem 1962; 8: 570henry, j., cannon, d. c., winkelmann, j. v., clinical chemistry, principles and technics, harper & row publishers ins., hagerstown maryland, 1974:1042thomas, l.: labor and diagnose, 4 edition, die medizinisc

45、he verlagsgesellschaft, marburg, 1992: 23520. 其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。ththrd 血清总蛋白液体(tp)双缩脲法测定 1. 实验原理双缩脲比色终点法。在碱性条件下,蛋白与铜离子生成紫蓝色复合物。显色强度和蛋白浓度成正比。oh蛋白质 + cu -紫红色复合物2. 标本采集2.1 病人准备:无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型:血清或血浆。3. 标本存放 2025保存可稳定6天;48保存可稳定4周;-20保存至少可稳定1年。4. 标本运输 室温条件下运输5. 标本拒收标准:细

46、菌污染的不能做测定。6. 实验材料:6.1 上海申能总蛋白测定试剂盒 货号试剂1试剂26.1.1 试剂组成试剂1(r1):664ml氢氧化钠酒石酸钾钠试剂2(r2):616ml氢氧化钠酒石酸钾钠碘化钾硫酸铜 100 mmol/l 16 mmol/l 15 mmol/l 6 mmol/l 80 mmol/l 12.8 mmol/l 2+6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于225,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6

47、.1.5 注意事项:试剂中含有氢氧化钠,不可入口!如与皮肤及粘膜接触,请立即用大量水冲洗。使用试剂时应采取必要的防护。6.2 校准品:使用diasys公司提供的trucal u校准品对自动分析仪进行校准,具体参见生化检验校准品和质控品.sop文件。6.3 质控品:具体参见生化检验校准品和质控品.sop文件。7. 仪器:奥林巴斯au1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应把非

48、定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.sop文件。11. 计算方法:以trucal u复合校准品总蛋白校准值或标准品标准值校准仪器后,在病人结果可报告范围内,仪器直接报告可靠的检测结果,以g/l报告。12. 参考值范围 g/l成人:儿童/青少年:130天16个月6个月1岁118岁 4262 4466 5679 5780 4163 4767 5570 5780 男 6688 女(注:各实验室应有自己的参考范围。)参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建

49、立自己的参考值。13. 临床意义:总蛋白检测对于多种疾病的诊断都有价值。肝脏蛋白合成缺陷、肾功能损伤引起蛋白丢失、肠道吸收不良或营养不良时总蛋白浓度下降。而在慢性炎症疾病、肝硬化和脱水时总蛋白浓度升高。14. 操作性能14.1 线性范围:0.5150g/l14.2 精密度:重复性的评估是根据nccls推荐的标准方法,au1000批内重复性小于3%,总不精密度小于3%。用于分析的质控血清和数据处理符合以上的nccls的规则。 14.3 方法学比较:本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂盒(x),同时对68个样品进行tp检测,将检测结果作方法学比较,其统计结果如下:y=1.00x-0.7g/l;r=0

50、.997。 14.4 灵敏度:本试剂的检测限为0.5g/l。14.5 病人结果可报告范围 0150g/l,如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。15. 超出范围结果处理:本法线性上限为150g/l。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。 16. 病危报警值的处理 无。 17. 方法局限性17.1 本法线性上限为150g/l。如样品测定值超过上限时,应将样品用0.9氯化钠溶液作1:1稀释,重新测定,结果乘以2。17.2 干扰物质:静脉滴注大量右旋糖酐的病人血清或血浆,使用双缩脲方法的检测结果会明显增高

51、,请选用其它方法(如凯氏定氮法);当样品中抗坏血酸浓度1704mmol/l,胆红素浓度684mmol/l,血红蛋白浓度5.00g/l,甘油三酯浓度11.3mmol/l时没有观察到干扰18. 补救措施:当仪器发生故障时,迅速联系仪器厂家进行维修。 19. 参考文献1. thomas l, editor. clinical laboratory diagnostics. 1st ed. frankfurt: th-books verlagsgesellschaft; 1998.p.644-7.2. johnson am, rohlfs em, silverman lm. proteins. in:

52、 burtis ca, ashwood er. editors. tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. philadelphia: w. b. saunders company; 1999.p.477-540.20. 其他:仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处置管理规定执行。 血清白蛋白(alb)溴甲酚绿(bcg)法测定 1. 实验原理在ph值4.2时,白蛋白和溴甲酚绿染料结合产生蓝绿色复合物,在630nm处比色,颜色的深度与白蛋白浓度成正比。ph4.2白蛋白+溴甲酚绿-绿色化合物2. 标本采集2.1 病人准备:无特殊要求

53、。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型:血清、肝素或edta血浆。3. 标本存放 留取标本后请尽快分离血清/血浆。在室温条件下(1525)可以稳定一周,在冰箱保存的条件下(28)稳定一个月,-20保存至少可以稳定3个月。4. 标本运输 室温条件下运输5. 标本拒收标准:细菌污染的不能做测定。6. 实验材料:6.1 上海申能白蛋白测定试剂盒(货号:11202271701,870ml)6.1.1 试剂组成柠檬酸盐缓冲液 ph 4.2 30mmol/l溴甲酚绿(bcg) 0.26mmol/l表面活性剂 适量6.1.2 试剂准备:试剂为即用式。6.1.3 试剂稳定性与贮存:试剂避光保存于2

54、25,若无污染,可稳定至失效期。试剂有效期为24个月。试剂不可冰冻。开盖后应避免污染。6.1.4 变质指示:当试剂有浊度时,表明有细菌污染,不能继续使用。6.1.5 注意事项:避免试剂与皮肤及粘膜接触。6.2 校准品:参见生化检验校准品和质控品.sop文件6.3 质控品:参见生化检验校准品和质控品.sop文件7. 仪器:奥林巴斯au1000生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪项目测定参数.sop文件8.2仪器操作步骤:参见生化检验奥林巴斯au1000生化分析仪操作规程.sop文件 9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制:在每一批标本中都应

55、把非定值血清水平i与ii质控做为未知标本进行分析,以2s为质控警告限,3s为失控限,绘制质控图,判断是否在控。质控规则参见生化室室 校准液浓度 as 12. 参考值范围成人 3552g/l参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验,每个实验室应建立自己的参考值。13. 临床意义:白蛋白是血浆中多种物质重要的结合与运输蛋白,并是维持血浆渗透压的主要组分。血清白蛋白可用于众多疾病的诊断。血清白蛋白升高通常见于脱水的。血清白蛋白降低多见于营养不良、肾脏疾病,肝脏疾病,感染性疾病,严重的烧伤和癌症。白蛋白的定量测定有助于对肝脏疾病如肝硬化的诊断与监视。此外,白蛋白量反映了个体的健康与营养状况,因此可用于营养不良的诊断及老年住院患者的预后评估。 14

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