人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒_第1页
人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒_第2页
人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒_第3页
人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒_第4页
免费预览已结束,剩余1页可下载查看

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、文档仅供参考人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA佥测试齐y人试剂盒说明书,人血清一氧化氮(NO) ELISA检测试剂盒 樊克生物专业供应:使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本血清一氧化氮(NO)含量。试验原理:NO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA 已知NO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。 先将NO和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标 记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后 加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和 样品中NO的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8C保存)

2、96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T):即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80n g/ml1 瓶( 0.6ml)1 瓶(0.3ml)按说明书进行稀 稀空白对照1 瓶(1.0ml)1 瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1 瓶(5ml)1 瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗NO抗体1 瓶(6ml)1 瓶(3.0ml):即用型亲和链酶素-HRP1 瓶(10ml)1 瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1 瓶(20ml)1 瓶(10ml)按说明书进行稀 释底物A1 瓶(6.0ml)1 瓶(3.0ml)即用型底物B1 瓶(6.0ml)1 瓶(3.0ml):即用

3、型终止液1 瓶(6.0ml)1 瓶(3.0ml):即用型标本稀释液1 瓶(12ml)1 瓶(6.0ml)即用型22020年4月19日文档仅供参考自备材料1 蒸馏水。2 加样器: 5ul、10ul、 50ul、 100ul、200ul、500ul、 1000ul。3 振荡器及磁力搅拌器等。安全性1. 避免直接接触终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体,请 尽快用水冲洗。2. 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项1 . 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的 标准品应丢弃,不可保存。2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,

4、以免变 质。3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混 用。保质前使用。4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、 B 液 时,避免使用带金属部分的加样器。5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里 的各种成份及样品。6 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应 孔中吸水。7 底物 A 应挥发,避免长时间打开盖子。底物 B 对光敏感,避 免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立 即读取 OD 值。8 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一 样。9 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处

5、理及保存方法1、血清 -操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000 X g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、 血浆EDTA柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000X g 离心 30 分钟去除颗粒。3、细胞上清液 -1000X g 离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。4、 组织匀浆 -将组织加入适量生理盐水捣碎。1000X g 离心 10 分钟,取上清液5、保存如果样品不立即使用,应将其分成小部分 -70 C保存,避免重复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂 血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37 C42020 年 4 月 19 日文档仅供

6、参考或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:80 ng/ml(6号标准 品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40 ng/ml(5号标准 品)100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液20 ng/ml(4号标准 品)100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液10 ng/ml(3号标准 品)100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液5.0 n g/ml(2号标准 品)100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液2.5 n g/ml(1号标准 品)100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0 n g/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。2. 洗涤缓冲液(50X)的稀释:蒸馏水 50倍稀释操作步骤1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

评论

0/150

提交评论