片剂微生物限度检测方法验证试验报告

1、内容:菌种:枯草芽孢杆菌 【CMCC（B）63501】、金黄色葡萄球菌【CMCC（ B）26003】、大肠埃希菌 【CMCC（ F） 44102】、白色念珠菌 【CMCC（ F） 98001】、微生物限度检测方法验证试验报告目的：确认供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性。细菌、霉菌及酵母菌数测定（即：对五株阳性对照实菌株的回收逐一进行验证）黑曲霉菌【CMCC（ F）98003】。四、方法:常规法（）；培养基稀释法（）；薄膜法（）；综合法（）。依据中国药典 2005年版二部微生物限度检查方法验证实验。五、方法验证：细菌、霉菌及酵母菌数测定，进行三次独立实验，每次平行实验回收率为 70%以上。六、实

2、 验：（1 ）菌 液 组测定所加的试验菌数。（2）供试品对照组取1m供试液注入平皿中，立即倾入营养琼脂培养基，做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。（3 ）试验 组平皿法计数，取供试品10g （ml）,加入无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml（ 1：10），作为供试液。取1ml供试液、1ml试验菌液（50100cfu/ml ）分别注入平皿中，立即倾入营养琼脂培养基，每株菌做两个平板，按平板菌落计数方法测定 其菌落数。（4）稀释剂对照组试验时，可用相应的稀释剂替代供试品，加入1ml试验菌（50100cfu/ml ）,立即倾入营养琼脂培养基，每株菌做两个平板，按平板菌落计数方法测定其菌落数。

3、、结论：通过方法学验证实验证明,采用常规法（）；培养基稀释法（）；薄膜法（）；综合法（），对5株阳性代表菌株回收率均为70%以上。该方法适用于微生物限度检查复核人:试验人:试验记录（1）批号:验证日期:试验组及（1）菌液组（2）供试品（稀释 剂）对照组(3)试 验组接种量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供试液（稀释剂）1ml +菌液1ml /皿】验证菌金黄色枯草芽白色念金黄色枯草芽白色念及稀释大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑曲霉细菌霉菌大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑八、曲霉倍数布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培养时 间及温 度CCCCCCCCCCCC小时小

4、时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数A、试验组回收率：【（3）-（2）】宁（1）X 100%AAAAAB、稀释剂对照组回收率：(3) +(1)x 100%BBBBB试 验记 录 （1）试验组及（1）菌液组（2）供试品（稀释 剂）对照组(3)试 验组接种量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供试液（稀释剂）1ml +菌液1ml /皿】验证菌金黄色枯草芽白色念金黄色枯草芽白色念及稀释大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑曲霉细菌霉菌大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑八、曲霉倍数布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培养时 间及温 度CCCCCCCCCCCC小时小时小时

5、小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数（供）（供）（稀）（稀）A、试验组回收率：【（3）-（2）】宁（1）X 100%AAAAAB、稀释剂对照组回收率：(3) +(1)x 100%BBBBB批号：验证日期:年月日试 验记 录（2）试验组及（1）菌液组（2）供试品（稀释 剂）对照组(3)试 验组接种量（菌液1ml / 皿)(1ml /皿）【供试液（稀释剂）1ml +菌液1ml /皿】验证菌金黄色枯草芽白色念金黄色枯草芽白色念及稀释大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑曲霉细菌霉菌大肠埃葡萄球孢杆菌珠菌黑八、曲霉倍数布菌菌菌布菌菌菌10-10-10-10-10-10-10-10-10-10-培养时 间及温

6、度CCCCCCCCCCCC小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时菌落数A、试验组回收率：【（3）-（2）】宁（1）X 100%AAAAAB、稀释剂对照组回收率：(3) +(1)x 100%BBBBB批 号： 验证 日 期:年月日试验组及接种量(1) 菌液组滨 4 ml / rm A（2）供试品（稀释 剂）对照组（3）试 验组接种T量试验组及接种量（困彳液 imi / 皿）（1） 菌液组（菌液 1ml / 皿）（2）供试品（稀释 剂）对照组皿）（3）试液稀蔼释剂验1ml +组液1ml /皿】验证菌 及稀释大肠埃金黄色 葡萄球 #f枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉#f(1ml / 细菌皿）霉菌大肠埃駅球 点萄%葡卄一:稀释剂）芽 孢杆菌1r白 +菌液念 珠菌1ml /皿】黑曲霉倍数证菌 及稀释希困大肠埃希菌菌黄色葡萄球菌-枯草芽 孢杆菌10-白色念 珠菌10-菌黑曲霉 却-细菌霉菌希困大肠埃希菌菌黄色葡萄球菌-枯草芽 孢杆菌10-白色念 珠菌10-菌黑曲霉1 J-Tv培养时间及温C10-菌C10-C10-C10-菌C10-CCC10-C10-C10-C10-C10-度养时间及温小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时小时11 JUEQL度 菌落数小时小时小时小时小时）（供） 小时小时小时小时小时小时(稀)(稀)菌落数A、试验组回收率:【(3)-(2)1 - (1)x