心脑通络液治疗缺血性心脏病机理的实验研究(一)

1、心脑通络液治疗缺血性心脏病机理的实验研究 (一)【关键词】缺血性心脏病； ,心脑通络液； ,基因 摘要：目的探讨心脑通络液治疗缺血性心脏病的机理。方法使用兔开 胸结扎冠状动脉造成缺血性心脏病模型，将 30只兔随机分成 5 组，即 假手术组、模型组、地奥心血康组、心脑通络液高、低剂量组。 2d 后 检测 NO 及其基因表达， ET1 及其基因表达。结果心脑通络液能升高 NO 水平，降低 ET1水平，升高 ecNOSmRNA水平，降低 ET1mRNA水平， 疗效优于地奥心血康组 (P0.05)。结论心脑通络液能从基因转录和翻译 水平对 ecNOS，ET1进行调节，显著升高家兔心肌缺血后血清中 NO

2、 水 平，降低 ET1 水平，减轻缺血状态下对心肌细胞和血管内皮细胞造成 的损害，具有保护缺血心肌细胞及血管内皮功能的功效。 关键词：缺血性心脏病；心脑通络液；基因 ExperimentalStudyonMechanismofTreatingIschemiaHeartDiseasewithXinn aotongluoyeAbstract ： ObjectiveTostudymechanismoftreatingIschemiaheartdiseasewithXinnaoto ngluoye.MethodsMadethemodelofAMIbytieinguptherabbitscoronary

3、arter y.Dividedtherabbitsintofivegroups.AftertwodaystheNO,Et1andtheirmRNAl evelwereobserved.ResultsThestudyshowedXinnaotongluoyecouldmakelev elofNOanditsmRNAupandthelevelofET1anditsmRNAdown,therelativeeffect wasmoresignificantintheXinnaotongluoyegroupthantheDiaoxinxuekanggroup(P0.05).ConclusionXinna

4、otongluoyecanimprovethelevelofNOanditsmRNA,thelevelofET1anditsmRNAtoprotectthemyocardiumagainsttheharmofIsc hemiaheartdisease.Keywords：Ischemiaheartdisease；Xinnaotongluoye；Gene 随着我国人们生活水平的提高，缺血性心脏病发病率明显增加，发病 年龄明显提前。对于缺血性心脏病的治疗目前最有力的手段是心肌血 运重建疗法， 主要是介入疗法及静脉溶栓治疗， 但介入疗法价格昂贵， 目前尚难以适应我国国情而广泛开展， 溶栓疗法也受到诸如

5、就诊时间、 年龄、禁忌证等诸多方面的限制，特别是对心肌血液重建后再灌注损 伤等问题尚无有力手段，仍需寻找新的治疗方法。中医药在治疗缺血 性心脏病方面积累了诸多经验，中医针对其病机气虚血淤的治法益 气活血法尤为重要。心脑通络液在临床上已被广泛应用，取得了良好 的疗效。本研究从分子水平探讨了心脑通络液对缺血性心脏病的治疗 作用，希望能开拓治疗缺血性心脏病的新途径，进一步丰富心脑通络 液治疗缺血性心脏病的机理。1 材料与方法1.1 模型制备选用日本大耳白兔 30 只，雄性，体重 2.02.3kg，45 月 龄，均购自黑龙江中医药大学实验动物中心。使用兔开胸结扎冠状动 脉造成缺血性心脏病模型。1.2动

6、物分组、饲养与给药将 30只雄性家兔按随机数字表法分成 5 组， 每组 6 只，即假手术组、模型组、地奥心血康组、心脑通络液高、低 剂量组。各组家兔均采用灌胃给药， 2 次/d；假手术组及模型组给予生 理盐水灌服；地奥心血康组灌服地奥心血康悬液 10ml/kg(剂量相当于 生药 0.1g/kg)；心脑通络液低剂量组灌服心脑通络液 5ml/kg；心脑通 络液高剂量组灌服心脑通络液 10ml/kg。各组灌胃量均以生理盐水平衡。 连续灌胃 3d，末次给药 1h 后进行造模。心脑通络液， 主要组成：黄芪、 丹参、当归、川芎、桃仁、红花、水蛭、瓜蒌、半夏、甘草等。由黑 龙江中医药大学附属二院制剂室提供，

7、 200ml/ 瓶。地奥心血康，成都 地奥制药集团有限公司，批号 04060580.1g/粒。1.3 方法造模 12h 后开始灌胃，灌胃 2d后用 20%的乌拉坦耳缘静脉注 射麻醉，剂量为 1g/kg，剪开腹腔，从下腔静脉按各试剂盒要求取血保 存，按各试剂盒方法检测 NO，ET1水平。打开胸腔， 取出心脏， 用 0.9% 生理盐水冲洗干净，在心脏左室心尖部剪取心肌组织，按相应原位杂 交实验要求保存，按原位杂交方法检测 NO基因表达， ET1基因表达情 况。1.4 统计学分析所有资料均以 s表示，将数据输入计算机 SPSS系统中 处理，组间差异采用方差分析，均数两两比较采用 t 检验。2 结果2

8、.1 各组家兔血清中 NO 的检测结果见表 1。表 1 中所示，实验后假手 术组、地奥心血康组、 心脑通络液低剂量及心脑通络液高剂量组 NO 数 值均高于模型组，与之比较有极显著性差异 (P0.01)；假手术组、心脑 通络液高剂量组与低剂量组比较有显著性差异 (P0.05)；而假手术组、 高剂量组组间无显著性差异 (P0.05)；心脑通络液低剂量组与地奥心血 康组有显著性差异 (P0.05)。结果表明，心脑通络液能升高 NO 水平，疗 效优于地奥心血康组，有随着剂量增大而增加趋势。2.2 各组家兔血清中 ET1 的检测结果见表 2。表 2 中所示，实验后假手 术组、地奥心血康组、心脑通络液低剂

9、量及心脑通络液高剂量组 ET1 数值均低于模型组，与之比较，地奥心血康组有显著性差异(P0.05)，假手术组、心脑通络液低剂量组及心脑通络液高剂量组有极显著性差 异(P0.01)；心脑通络液高剂量组与低剂量组比较有显著性差异 (P0.05)； 而假手术组、与低剂量组及高剂量组有极显著性差异(P0.01)；心脑通络液低剂量组与地奥心血康组有显著性差异 (P0.05)。结果表明，心脑 通络液能降低 ET1 水平，疗效优于地奥心血康组，有随着剂量增大而 增加趋势。表 1 各组家兔血清中 NO 的变化(略)与模型组比较 ,*P0.01；与低剂 量组比较 , P0.0；5 与高剂量组比 较, P0.01

10、;n=6表 2 各组家兔血清中 ET1 的变化(略)与模型组比较， *P0.01；与低剂量组比较， P0.05；与高剂量组比较， P0.0；1 n=6 2.3一氧化氮合酶原位杂交图像分析结果见表 3。表 3中所示，实验后 假手术组、地奥心血康组、心脑通络液低剂量及心脑通络液高剂量组 ecNOSmRNA数值均高于模型组，与之比较有极显著性差异 (P0.01)，地奥心血康组、心脑通络液低剂量组有极显著性差异(P0.01)；心脑通络液高剂量组与低剂量组比较有极显著性差异 (P0.01)；而假手术组、高 剂量组组间无显著性差异 (P0.05)；而假手术组、与低剂量组有极显著 性差异 (P0.01)；心脑通络液低剂量组与地奥心血康组有极显著性差异 (P0.01)。结果表明，心脑通络液能升高 ecNOSmRNA水平，疗效优于地 奥心血康组，有随着剂量增大而增加趋势。表 3 一氧化氮合酶原位杂交图像分析结果(略)与模型组比较， *P0.01；与低剂量组比较， P0.01；与高剂量组比较， P0.01;n=62.4 内皮素原位杂交图像分析结果见表 4。表 4中所示，实验后假手术 组、地奥心血康组、心脑通络液低剂量及心脑通络液高剂量组 ET1mRNA 数值均低于模型组，与之比较有极显著性差异