植物组织培养技术说课讲解

1、植物组织培养技术精品文档三组培苗生长环境有何特点？如何针对这些特点提高移栽成活率？1. 组培炼苗是组培过程较为重要的一个环节，是一个较为复杂的技术体系，提 高炼苗成活率是决定组培成败和降低组培成本的关键。试管苗一般在高湿 （ 100% ）、弱光（ 3000-4000Lux ）、恒温（ 25 ）下培养， 2.1 组培苗的特点叶片无保护组织（角质层、蜡质、表皮毛等），加之细胞间隙大，气孔 开张大，因此水分散失较快，易于萎蔫。根无根毛或极少，并且有些从愈伤组 织上发育的根与芽的疏导组织不相同，因此吸水能力较弱。2.2 提高移栽成活率的方法而当炼苗移栽时，环境有了极大的改变：湿度降低、光照增强、温度升

2、 高、温差变大。具以上特点的组培苗，在此环境下，叶片失水较严重，根系吸 水能力不足，即吸水量小于蒸腾水量，从而造成植物萎蔫，炼苗失败。另一种 情况是，空气温度上升要比基质温度上升快，而根系的吸水能力在一定范围内 与温度是成正比的，当气温升高时，加之湿度较低，叶片蒸腾急速增加，此时 基质温度上不去，根系吸水能力不够，造成蒸腾大于吸水的失衡状态，从而萎 蔫死亡。要想获得高的炼苗成活率就得针对以上问题，一方面提高出瓶苗的质 量，提高其抗逆性，生根前的壮苗、理想的生根配方和生根培养环境的调控是 关键；另一方面就得有针对组培苗特点创造一个适宜的炼苗环境，比如保证空 气湿度，平衡空气和基质的温度平衡关系等

3、。 四、生长素类分裂素类调节剂在主培中有哪些生理作用？在快速繁殖的起始， 芽增殖及生根培养阶段应该如何使用？收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档培养中生长素一方面用于诱导愈伤组织的形成和生根，另一方面是与一定 量的细胞分裂素配合使用共同诱导不定芽的分化，侧芽的萌发与生长以及某些 植物胚状体的诱导。在植物组织培养中的细胞分裂素的主要功能是促进细胞的分裂和分化，打 破顶端优势，诱导芽的分化和增殖，促进组织和器官的不定芽发育。当培养基 中的细胞分裂素与生长素的比例高时，诱导芽的分化，反之，诱导根的分化。快速繁殖的起始阶段 培养基中加入适量的生长素和细胞分裂素类 芽增殖阶段向培养基中加入较多的

4、细胞分裂素类的物质促进芽的分化生根培养阶段向培养基中加入较多的生长素类物质促进根的分化 五利用组织培养技术生产苗木及次生代谢物的手段有哪些？培养对象分别是什么？培养新品种的手段有哪些？培养对象分别是什么？培养苗木及次生代谢物的手段培养对象植物器官培养 .离体根，离体的茎尖，离体叶或离体的 茎。分生组织培养凡是有分化能力的细胞都可以植物胚胎培养离体胚植物细胞培养（悬浮培养，细胞悬浮培养，细胞培养等）具有活性的细胞和细胞小聚体植物微繁技术外植体培养新品种的手段培养对象植物细胞培养（悬浮培养，细胞悬浮培养，细胞培养等）具有活性的细胞和细胞小聚体植物原生质体培养去了细胞壁的有活性的细胞原生质体融合原生

5、体植物花药和花粉培养植物有活性的花粉和花药收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档六影响植物组织培养成功的因素有哪些？1) 实验室要合适，要很好的控制好光照，湿度和温度。2) 培养材料及所需要的实验用具要洗净，严格的消毒灭菌。3) 培养基配置技术要合理，要注意调溶液的 PH 等(如：如果要培养长根的话，可以适 当的加大生长素的浓度)4) 注意无菌操作技术5) 实验操作是要注意无菌操作(操作幅度不要过大，手要消毒彻底等)6) 外植体的选择(同一植物不同部位的细胞活性不同，一般植物鲜嫩的部位比较好，比 如说茎尖。像木质部就不合适。)7) 各种激素类物质的配合比例要合适。七阐述植物组织培养的主要

6、障碍，发生原因及防治措施？植物组织培养的主要障碍发生的原因防治措施褐化1) 材料的基因型差异2) 材料的生理状态3) 培养基成分4) 其他因子的影响(培养时间的长短 等)1. 选择适当的外植体和培 养条件2. 抗氧化剂和抑制剂的作 用3. 其 他 防 止 褐 变 的 措 施 (连续转移或预处理 等)玻璃化1. 玻璃化苗的形态学，解剖学特征2. 玻璃花苗的生理生化特点3. 外植体4. 培养环境条件5. 培养成分1. 选择适当的外植体2. 改善培养基组成3. 改善培养条件遗传的稳定性自身的遗传特性选择合适的外植体控制好培养条件污染污染的来源(材料的本身，由外界环境侵入)1) 供体材料的选择(选择

7、健康，无病毒的植株)2) 培养物的检验3) 合理的扩繁程序4) 严格的无菌操作规程八某地区的一种马铃薯经多年种植后，植株变得矮小，产量和品质下降，请用所学组织知识分析原因，并设计一个解决方案。原因： 几乎所有的栽培植物都发现感染甚至几种病毒，大部分的病毒属于 RNA 病毒，病毒对植物的生长发育产生不良的影响，常常会导致植物矮小，产 量和品质的下降。收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档解决方案：（分生组织培养脱毒法）1. 分生组织的分离 从大田中取健壮的植株的顶芽或萌发芽，带回实验室除去可见叶，材料清洗 干净。用 75% 酒精漂洗，在用 20 倍的次氯酸钠消毒 8-10 分钟，无菌水 冲

8、洗 3 次，然后在无菌操作室进行无菌操作。切下生长点转入合适的培养 基进行培养。2. 培养茎尖分生组织分离后转入到琼脂培养基上于 25 -27 条件下进行光培 养。3. 建立无性繁殖体系 利用生长点培养无毒苗的成活率和脱毒率都非常低，培养出来的新苗要进行 鉴定，鉴定无毒后再用新苗的茎尖再进行培养新苗。4. 脱毒苗试管株的移栽和品种特性鉴定将试管苗移栽到土壤中，这个转变要有一个逐渐锻炼适应。九 现有 MS 培养基母液 6 瓶，母液 1 为 50 倍，母液 2 为 50 倍，母液 3 为 50 倍，母液 4 为 100 倍，母液 5 为 20 倍，母液 6 为 200 倍，激素母 液有 1mg/m

9、l IAA,0.5mg/ml NAA,2mg/ml 6-BA,4mg/ml KT,以及蔗糖和琼脂若干，请利用这些材料配置 2L MS+2mg/L IAA+1mg/L NAA+3mg/L6-BA+3%蔗糖 +0.7% 琼脂培养基，写出配制方法步骤及灭菌过程。配制方法：配制 2L 的各种物质的用量如下：吸取母液的用量为： 母液 1 ：2000ml/50=40ml收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档母液 2 ：2000ml/50=40ml母液 3 ：2000ml/50=40ml母液 4 ：2000ml/100=20ml母液 5 ：2000ml/20=100ml母液 6 ：2000ml/200

10、=10ml激素用量：IAA ：吸取 1mg/ml IAA 母液 4mlNAA: 吸取 0.5mg/ml NAA 母液 4ml6-BA: 吸取 2mg/ml 6-BA 母液 3ml蔗糖： 60g 琼脂： 14g灭菌过程：将混合的培养液加琼脂加热，到适宜的温度后调 PH 值为 5.8 后倒入培养瓶 中，冷却看是否凝固，如果凝固的话放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌。（ 0.1Mpa 121 20 分钟）灭菌之前要看灭菌锅中是否有水，如果水不够是话要加水， 灭菌好了之后，关掉电源放气，当指针指到 0 Mpa 时就可以打开灭菌锅的盖 子，最后拿出培养瓶放好，千万不要打开瓶盖。十简述植物无糖组培的意义及技术要点？无糖组培的意义： 传统的主旨植物组织培养都使用含糖的培养基，杂菌很容易 侵入培养容器并在培养基中繁殖造成污染，是造成组织培养的一大障碍。为了 防止杂菌的侵入，在组织培养中通常将培养容器完全密闭，这种方式使植物生 长相对缓慢，且易出现形态及生理的异常，同时也大大提高人工费用和生产成 本。而无糖组培解决了这些问题。无糖组培在培养基中不加入糖，只是通过提收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档高培养空间的光照度，二氧化碳的浓度，温度和