罗苏伐他汀与阿伐他汀和氟伐他汀的降脂效果比较

1、rosuvastatinrosuvastatins lipid-lowering s lipid-lowering effect comparision with effect comparision with atorvastatin and fluvastatinatorvastatin and fluvastatin 罗苏伐他汀与阿伐他汀和氟伐他汀罗苏伐他汀与阿伐他汀和氟伐他汀 的降脂效果比较的降脂效果比较 湘雅医学院10级 研究背景（background） 他汀类药物是临床上常用的降脂药，罗苏 伐他汀（rosuvastatin）是近年来开发的他 汀类新品种。用于高胆固醇血症、血脂代 谢

2、紊乱症及单纯高甘油三酯血症的治疗。 是目前认为最有效的降脂药，所以被称为 “超级他汀”。 因此自主研发他汀药物罗素伐他汀，对填 补我国新药空白，促进人们身体健康水平， 取得社会效益和经济效益，都有重大意义。 实验原理（experimental principle ） 罗苏伐他汀通过抑制hmgcoa还原酶 的活性, 抑制体内胆固醇的合成, 反馈 性刺激细胞表面的低密度脂蛋白( ldl) 受体增加, 加速低密度脂蛋白胆固醇进 入细胞降解, ldl 的降低效果达到 52%63%, 其幅度比其他他汀类药物 高8.4%。1 该药有轻微升高高密度脂蛋白（hdl） 的作用。1 实验目的（实验目的（purpo

3、sepurpose） 建立建立wistarwistar大鼠高血脂模型大鼠高血脂模型 测罗苏伐他汀的降脂效果测罗苏伐他汀的降脂效果 比较阿伐他汀、氟伐他汀、和罗苏伐比较阿伐他汀、氟伐他汀、和罗苏伐 他汀降脂作用他汀降脂作用 实验步骤实验步骤(steps)(steps) 实验对象、器材选择实验对象、器材选择 动物模型建立动物模型建立 药效试验药效试验 结果记录结果记录 数据分析数据分析 （灌胃方法）（灌胃方法） （内眦取血）（内眦取血） 实验药物、器材(drug and equipment) 药物药物：阿伐他汀、氟伐他汀、罗苏伐他 汀、 生理盐水、乙醚、高脂饲料、 基础饲料 器材器材：试剂盒、医用

4、离心机;恒温振荡器; fa2004 型分析天平；751 型分光光度 计;cl -28000 全自动生化分析仪、棉 线、16号针头、注射器、毛细吸管 wistar wistar大鼠大鼠 2 2 ( (雄性 雄性, ,老龄鼠老龄鼠, ,体重相当体重相当) ) 优点：优点： 价格低、寿命长、性情温和、对他价格低、寿命长、性情温和、对他 汀类药物敏感、血量丰富汀类药物敏感、血量丰富 3 3 实验对象实验对象(experimental object) 实验方法与步骤 ( (一一) )构建大鼠高血脂动物模型构建大鼠高血脂动物模型 1.将选好的实验大鼠随机分为a、b、c、 d、e五组，每组10只，编号。 2

5、.在相同条件下灌胃法喂饲料喂养4周 高脂高脂乳剂乳剂： 高脂乳剂高脂乳剂(配方：猪油配方：猪油10% 鸡蛋黄鸡蛋黄5% 胆固胆固 醇醇12% 丙基硫氧嘧啶丙基硫氧嘧啶0.2% 普通饲料普通饲料 82.883.8%另可酌加胆酸盐另可酌加胆酸盐0.2% 左右，给予左右，给予 量量15 me(100 gd) 原理：猪油富含甘油三酯；鸡蛋黄是天然食原理：猪油富含甘油三酯；鸡蛋黄是天然食 物中含胆固醇最高的；丙基硫氧嘧啶有助于成物中含胆固醇最高的；丙基硫氧嘧啶有助于成 模，因甲状腺素促进胆固醇的分解，而丙基抑模，因甲状腺素促进胆固醇的分解，而丙基抑 制其作用；胆酸盐主要是促进胆固醇的吸收。制其作用；胆酸

6、盐主要是促进胆固醇的吸收。 实验方法与步骤实验方法与步骤 （二）药物试验（二）药物试验 3.3.第五周起，每天上午灌胃法第五周起，每天上午灌胃法给药给药（持（持 续饲料喂养）续饲料喂养） 4.4.喂药喂药2w2w后，测定各组大鼠血清后，测定各组大鼠血清tctc， tgtg，hdl,ldlhdl,ldl。（内眦静脉采血。（内眦静脉采血1 ml1 ml） 药物及剂量药物及剂量 （mg/d） 血脂及脂蛋白变化（血脂及脂蛋白变化（%） tcldl-c hdl-ctg 氟伐他汀（氟伐他汀（40）-21.4-30.1+11.2-7.3 普伐他汀（普伐他汀（20）-23.7-31.5+3.1-12.0 辛伐

7、他汀（辛伐他汀（10）-27.4-35.5+4.2-18.3 阿伐他汀（阿伐他汀（20）-34.5-44.3+12.1-33.2 常用他汀类调血脂药中，氟伐他（来适可）汀作常用他汀类调血脂药中，氟伐他（来适可）汀作 用效果相对较弱，而阿伐他汀（立普妥用效果相对较弱，而阿伐他汀（立普妥 阿乐）效阿乐）效 果最强，因此，选用这两种药物为常用他汀类药果最强，因此，选用这两种药物为常用他汀类药 物代表与新药罗苏伐他汀进行对比。物代表与新药罗苏伐他汀进行对比。 药品(8mg/d) 高 脂 饲 料 a阿伐他汀 b氟伐他汀 c罗苏伐他汀 d生理盐水 基 础 饲 料 e生理盐水 药物剂量参考db=darb/r

8、a(wa/wb)1/3 以人20mg/d为参 考标准 （da, db分别为人, 大鼠的每公斤体质量剂量(mg/kg)，rb人 体型系数，ra大鼠体型系数，wa人 体重，wb 大鼠体重， ra = 0.09；rb = 0.11)，用生理盐水配成0.4mg/ml混悬液， 每天1次连续灌胃两周。 大鼠灌胃法7 灌胃器的制作 1.用钳子将16 号针头斜面部分的针尖掐掉; 2.用直径大小适宜的铁丝插入针芯中,将针芯 灌通; 3. 将针尖毛刺用细砂纸磨掉并在酒精灯上灼 烧,确保针头部位光滑 。 灌胃方法 将大鼠放置于桌面,右手抓住其尾部, 牵制大鼠的活动,左手放在大鼠背部,并 迅速向前推移,从其颈部保定

9、迅速将大鼠翻转过来,同时左手作半握状,大 拇指用力顶住大鼠下颌骨,并适当的压住大 鼠前肢,力度要适当,以头不能抬、前肢不能 挣扎为宜,其余四指下顶住枕骨。右手也作 半握状,保定其后肢及大鼠尾巴,防止其挣扎, 左右两手用力将大鼠身体拉直,力度适宜 操作者两手将由适宜的细线做成的绳套拉 直挂在大鼠的门齿,绳套的另一端是挂在铁 架台上的,同时可以用左手从下面顶住大鼠 头部,防止大鼠头部挣扎,绳套脱落 保定助手与挂绳同时将大鼠向后拉,力度适 宜,防止大鼠在挣扎时损伤门齿,使大鼠头、 身体和绳套在一条直线,大鼠尾部略向下倾 斜 操作者可以左手食指半曲状从下面顶住大 鼠头部防止头部上面挣扎,由于助手把大鼠

10、 身体拉直,可阻止大鼠头部的左右挣扎,右手 拇指、食指、中指捏着注射器,针管方向与 大鼠身体平行向下略倾斜,从右侧口角沿上 颚向内推进 当针头完全进入大鼠口腔时,此时针头也已 沿咽后壁插入食管。如果灌胃针的位置插 入正确，小鼠可自行吞服药，灌胃针插入 位置不正确，小鼠会强烈挣扎，必须拔出 重插，否则可能将药物灌入气管，造成小 鼠死亡。 待大鼠稳定后由慢到快推药即可。 注意事项 右手对大鼠后肢及背部的保定主要以大鼠 身体成一条直线为原则 插入灌胃针时，如果遇到阻力，不能用力 继续进针，应停止进针，等待其自动吞咽 时，迅速进针。否则，容易损伤动物食道。 大鼠内眦取血6步骤 麻醉麻醉 取一只密闭容器

11、，将蘸取适量乙醚的棉花放 入其中，然后将大鼠放入，待大鼠麻醉后 采血 大鼠内眦取血步骤 采血采血 采血者以左手拇指、食指从背部紧握住大鼠颈部， 当取血时轻轻压迫大鼠颈部两侧，使眶后静脉丛充 血。以酒精擦拭大鼠眼内眦后，取长约23cm、内 径0.51.0mm消毒备用的毛细吸管，使毛细吸管与 鼠面成45的夹角，由内眦刺入，刺入深度约 45mm。当感到有阻力时停止推进，轻轻旋转毛 细吸管，血液便能自然流入毛细管中。通常弃去第 一滴血，从第二滴血开始收集，当得到所需的血量 后，即除去加于颈部的压力，同时，将毛细吸管拔 出，用消毒棉球按压穿刺处止血。体重200300g 大鼠每次可采血23ml，如有需要可

12、每周一次，左 右两眼轮换更好。此种采血方法尤其适用于需观测 血液中各项指标的动态变化。 大鼠内眦取血步骤 大鼠内眦取血注意事项（1）采血场所要有充足的光线，温度以室温20度为宜。 （2）麻醉深浅要适度，且宜浅不宜深，麻醉太深对顺利采 血不利；可以多只间隔麻醉，几个人相互配合操作更加迅 速。 （3）采血用具及大鼠采血部位要求消毒，否则易致大鼠眼 部感染。 （4）若需抗凝全血，在收集血的试管内需预先加入抗凝剂。 （5）正确掌握操作要领，严格按上述的要求操作，手法一 定要娴熟，否则会导致大鼠致盲，不利于后续实验。 （6）正确选用采血器，可以选用注射器，但是通过实际操 作，选用毛细吸管更为合适。 指标

13、 a1a10 b1b10 c1c10 d1d10 e1e10 体重kg tc ldl-c hdl-c tg x s 实验结果记录（实验结果记录（records） 罗苏伐他汀降脂作用强于阿伐他汀；罗苏伐他汀降脂作用强于阿伐他汀； 罗苏伐他汀降脂作用介于两者之间；罗苏伐他汀降脂作用介于两者之间； 罗苏伐他汀降脂作用弱于氟伐他汀。罗苏伐他汀降脂作用弱于氟伐他汀。 预期结果预期结果(prediction) 结论结论 临床试验设计（临床试验设计（clinical experimentclinical experiment） 1.1.选择选择600600名病人（名病人（1818周岁），周岁），ldl-cl

14、dl-c水平水平 160mg/dl160mg/dl、250mg/dl250mg/dl，甘油三酯（，甘油三酯（tgtg） 水平水平400mg/dl400mg/dl。 2.2.采用双盲法随机进行采用双盲法随机进行1212周的治疗，剂量分别周的治疗，剂量分别 为罗苏伐他汀为罗苏伐他汀10mg/d(n=200)10mg/d(n=200)；普伐他汀；普伐他汀 20mg/d20mg/d（n=200n=200）和氟伐他汀）和氟伐他汀20mg/d20mg/d （n=200n=200） 3.3.测量病人治疗后的测量病人治疗后的ldl-cldl-c水平，甘油三酯水平，甘油三酯 (tg)(tg)水平，水平，hdl-chdl-c水平。水平。 4.4.统计分析数据。统计分析数据。 文献来源（literature sources） 1须媚.降脂药罗苏伐他汀.世界临床用 药.2004,25(