医学遗传学：第18章 遗传病的治疗

1、第第1818章章 遗传病的治疗遗传病的治疗 Chapter 18 treatment of hereditary disease 教学要求教学要求 v1掌握：掌握：遗传病治疗的基本方法遗传病治疗的基本方法；基因治疗的基因治疗的 基本概念、策略、途径和方法基本概念、策略、途径和方法。饮食治疗、药物饮食治疗、药物 治疗的一般原则。治疗的一般原则。 v2了解：遗传病的手术治疗、药物治疗；基因了解：遗传病的手术治疗、药物治疗；基因 治疗目前存在的问题和基因治疗的临床应用。治疗目前存在的问题和基因治疗的临床应用。 手术治疗手术治疗 药物治疗药物治疗 饮食治疗饮食治疗 基因治疗基因治疗 L o g o 第

2、第1 1节节 手术治疗手术治疗 v遗传病组织器官已出现损伤，用外科手术对病损遗传病组织器官已出现损伤，用外科手术对病损 器官进行修复、切除或组织器官移植，可以有效器官进行修复、切除或组织器官移植，可以有效 改善某些症状。改善某些症状。 v一、手术修复一、手术修复 v二、手术去除二、手术去除 v三、组织器官移植三、组织器官移植 WilsonWilson病致病机制病致病机制p104p104 铜铜 铜蓝蛋白铜蓝蛋白 P P型铜转运型铜转运ATPATP酶酶 从胆汁从胆汁排出排出 储存于储存于血浆、组织血浆、组织 铜肝细胞聚集铜肝细胞聚集 铜入血，沉积于脑、肾、铜入血，沉积于脑、肾、 角膜等组织致病角膜

3、等组织致病 肝细胞坏死肝细胞坏死 L o g o 第第2 2节节 药物治疗药物治疗 v对症治疗对症治疗 v原则：补其所缺、去其所余原则：补其所缺、去其所余 v1 1、补其所缺（补充疗法）、补其所缺（补充疗法） v针对病因，补充其所缺乏的物质。针对病因，补充其所缺乏的物质。 v如：补充代谢物、辅助因子、激素、酶等。如：补充代谢物、辅助因子、激素、酶等。 v甲型血友病甲型血友病抗血友病球蛋白抗血友病球蛋白 v垂体性侏儒症者垂体性侏儒症者生长激素生长激素 v家族性甲状腺肿家族性甲状腺肿甲状腺制剂甲状腺制剂 v免疫缺陷病人免疫缺陷病人免疫球蛋白免疫球蛋白 v先天性睾丸发育不全先天性睾丸发育不全睾酮睾酮

4、 v先天性性腺不全患者先天性性腺不全患者雌激素雌激素 v对症治疗对症治疗 v原则：补其所缺、去其所余原则：补其所缺、去其所余 v1 1、补其所缺（补充疗法）、补其所缺（补充疗法） v针对病因，补充其所缺乏的物质。针对病因，补充其所缺乏的物质。 v如：补充代谢物、辅助因子、激素、酶等。如：补充代谢物、辅助因子、激素、酶等。 v2 2、去其所余（排除疗法）、去其所余（排除疗法） v针对病因，排除其所堆积的物质。针对病因，排除其所堆积的物质。 v用理化方法将多余物质清除或排除：用理化方法将多余物质清除或排除： v如：用青霉胺或锌剂加速铜离子的清除来改善肝豆状如：用青霉胺或锌剂加速铜离子的清除来改善肝

5、豆状 核变性的症状；血浆置换和血浆过滤治疗家族性高胆核变性的症状；血浆置换和血浆过滤治疗家族性高胆 固醇血症。固醇血症。 v用代谢抑制剂降低代谢缺陷病的代谢率：用代谢抑制剂降低代谢缺陷病的代谢率： v如：别嘌呤醇可抑制黄嘌呤氧化酶，减少尿酸形成，如：别嘌呤醇可抑制黄嘌呤氧化酶，减少尿酸形成， 治疗原发性痛风和自毁容貌综合征。治疗原发性痛风和自毁容貌综合征。 v减少对所忌物质的吸收：减少对所忌物质的吸收： v如：苯酮尿症患者口服苯丙氨酸氨酶胶囊，使苯丙氨如：苯酮尿症患者口服苯丙氨酸氨酶胶囊，使苯丙氨 酸转化成苯丙烯酸而减少吸收。酸转化成苯丙烯酸而减少吸收。 L o g o 第第3 3节节 饮食治

6、疗饮食治疗 一、饮食控制的一般原则一、饮食控制的一般原则 v禁其所忌禁其所忌 （1）制定特殊食谱）制定特殊食谱 v 半乳糖血症患儿（避免乳类食品的摄入）半乳糖血症患儿（避免乳类食品的摄入） v 家庭性高胆固醇血症患者（低胆固醇饮食治疗）家庭性高胆固醇血症患者（低胆固醇饮食治疗） v 苯丙酮尿症患儿（低苯丙氨酸奶粉及饮食）苯丙酮尿症患儿（低苯丙氨酸奶粉及饮食） （2）减少患者对所忌物质的吸收）减少患者对所忌物质的吸收 v 家族性高胆固醇血症患者（服用糠麸）家族性高胆固醇血症患者（服用糠麸） 二、把握时机二、把握时机 v（一）饮食治疗越早越好（一）饮食治疗越早越好 v应尽量在损害发生前进行治疗。应

7、尽量在损害发生前进行治疗。 v（二）饮食治疗适应病情（二）饮食治疗适应病情 v饮食治疗应随病情的发展而有所改变以有效的控饮食治疗应随病情的发展而有所改变以有效的控 制疾病。制疾病。 L o g o 第第4 4节节 基因治疗基因治疗 v基因治疗（基因治疗（gene therapygene therapy）：）：是运用是运用DNADNA重组技术重组技术 修复患者细胞中有缺陷的基因，使细胞恢复正常修复患者细胞中有缺陷的基因，使细胞恢复正常 功能而达到治疗遗传病的目的。功能而达到治疗遗传病的目的。 一、基因治疗的策略和途径一、基因治疗的策略和途径 v（一）基因治疗的策略（一）基因治疗的策略 2 基因基

8、因 置换置换 3 基因基因 增补增补 4 基因基因 干预干预 1 基因基因 修正修正 一、基因治疗的策略和途径一、基因治疗的策略和途径 v（二）基因治疗的途径（二）基因治疗的途径 1 生殖细胞生殖细胞 基因治疗基因治疗 2 体细胞体细胞 基因治疗基因治疗 二、基因治疗的方法二、基因治疗的方法 v直接体内疗法：直接体内疗法：将目的基因装配于真核表达载体将目的基因装配于真核表达载体 直接导入体内有关的组织或器官，使其进入相应直接导入体内有关的组织或器官，使其进入相应 的细胞并进行表达。（未广泛运用）的细胞并进行表达。（未广泛运用） v间接体内疗法：间接体内疗法：将目的基因体外导入合适的靶细将目的基

9、因体外导入合适的靶细 胞，经过筛选并增殖，回输给患者，使该基因在胞，经过筛选并增殖，回输给患者，使该基因在 患者体内有效表达相应产物。（常用方式）患者体内有效表达相应产物。（常用方式） 间接体内疗法的基本过程间接体内疗法的基本过程 （一）克隆正常基因（一）克隆正常基因 （二）靶细胞的选择（二）靶细胞的选择 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 （四）基因转染细胞的筛选（四）基因转染细胞的筛选 （五）基因转染细胞的鉴定（五）基因转染细胞的鉴定 （六）回输体内（六）回输体内 （一）克隆正常基因（一）克隆正常基因 v 靶细胞（靶细胞（target celltarget cell）是指接受转移基因

10、的体细胞。是指接受转移基因的体细胞。 v 靶细胞应满足下列靶细胞应满足下列条件条件： v 较为坚固，便于体外培养和进行遗传技术操作，并易于由人体分离较为坚固，便于体外培养和进行遗传技术操作，并易于由人体分离 和输回体内和输回体内 v 具有增殖优势，生命周期长具有增殖优势，生命周期长 v 易受外源易受外源DNADNA转化转化 v 在选用反转录病毒载体时，目的基因表达最好具有组织特异性的细在选用反转录病毒载体时，目的基因表达最好具有组织特异性的细 胞胞 v 目前使用得较多的是造血干细胞、皮肤成纤维细胞、肝细胞、血管内目前使用得较多的是造血干细胞、皮肤成纤维细胞、肝细胞、血管内 皮细胞和肌细胞等。皮

11、细胞和肌细胞等。 （二）靶细胞的选择（二）靶细胞的选择 基因转移是指将外源基因导入靶细胞内。基因转移是指将外源基因导入靶细胞内。 v1 1、化学法、化学法 v应用磷酸钙沉淀法改变细胞膜通透性，以加强细应用磷酸钙沉淀法改变细胞膜通透性，以加强细 胞从培养液中摄取胞从培养液中摄取DNADNA的能力。的能力。 v转移效率低，成功率约为转移效率低，成功率约为1/101/102 210103 3。 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 v2 2、物理法、物理法 v（1 1）电穿孔法）电穿孔法 v借助电流穿击靶细胞膜使其对借助电流穿击靶细胞膜使其对DNADNA通透性增加。通透性增加。 v有可能使细胞受

12、到损伤。有可能使细胞受到损伤。 v（2 2）显微注射法）显微注射法 v用显微技术向细胞核内直接注射外源基因。用显微技术向细胞核内直接注射外源基因。 v主要应用于转基因动物。主要应用于转基因动物。 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 v2 2、物理法、物理法 v（3 3）微粒子轰击法）微粒子轰击法 v利用亚微粒钨或金吸附利用亚微粒钨或金吸附DNADNA，包裹形成微粒，利用，包裹形成微粒，利用 基因枪技术使微粒高速进入靶细胞。基因枪技术使微粒高速进入靶细胞。 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 v2 2、物理法、物理法 v（1 1）化学法）化学法 v（2 2）显微注射法）显微注射法 v

13、（3 3）微粒子轰击法）微粒子轰击法 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 v3 3、载体介导基因转移、载体介导基因转移 v载体能将外源基因特异的转移至靶细胞。载体能将外源基因特异的转移至靶细胞。 v分为：分为： 病毒载体病毒载体非病毒载体非病毒载体 （三）目的基因的转移（三）目的基因的转移 v病毒载体：病毒载体：将将RNARNA和和DNADNA病毒去除致病性基因，同病毒去除致病性基因，同 时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。 v病毒介导基因转移病毒介导基因转移(virus mediated gene (virus mediated gene tra

14、nsfer)transfer)是指以病毒为载体，将外源性目的基因是指以病毒为载体，将外源性目的基因 通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重通过基因重组技术，组装到病毒载体上，并使重 组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。组病毒感染受体宿主细胞，完成基因转移。 病毒载体病毒载体 v病毒载体：病毒载体：将将RNARNA和和DNADNA病毒去除致病性基因，同病毒去除致病性基因，同 时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。 病毒载体病毒载体 种类：种类： （1 1）反转录病毒载体）反转录病毒载体 （2）腺）腺 病病 毒毒 （3）腺病毒相关病毒（腺伴随病毒）腺病毒

15、相关病毒（腺伴随病毒） v病毒载体：病毒载体：将将RNARNA和和DNADNA病毒去除致病性基因，同病毒去除致病性基因，同 时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。时具有携带目的基因特性的人工改造病毒。 病毒载体病毒载体 优点：优点： v 转染效率高转染效率高 缺点：缺点： v 存在疫原性、细胞毒作用、携带外源基因的大小受限、存在疫原性、细胞毒作用、携带外源基因的大小受限、 病毒滴度不易提高。病毒滴度不易提高。 非病毒载体非病毒载体 缺点缺点： v 转染效率较低转染效率较低 优点：优点： v 安全、制备简单和携带外源基因较大。安全、制备简单和携带外源基因较大。 种类：种类： （1 1）脂质体）脂

16、质体 （2）真核细胞表达质粒载体）真核细胞表达质粒载体 （3）非生物性聚合载体）非生物性聚合载体 （4）人工染色体）人工染色体 间接体内疗法间接体内疗法 1、克隆正常基因、克隆正常基因 2、靶细胞的选择、靶细胞的选择 3、目的基因的转移、目的基因的转移 4、基因转染细胞的筛选、基因转染细胞的筛选 5、基因转染细胞的鉴定、基因转染细胞的鉴定 6、回输体内、回输体内 四、基因治疗的临床运用四、基因治疗的临床运用 v1.1.腺苷脱氨酶缺乏严重联合免疫缺陷病腺苷脱氨酶缺乏严重联合免疫缺陷病 （adenosine deaminase-deficient severe combined immunodef

17、iciency ， ADA-SCIDADA-SCID） 重症联合免疫缺陷重症联合免疫缺陷（Severe Severe combined immunodeficiency combined immunodeficiency diseasedisease，简称，简称SCIDSCID），），患者缺患者缺 乏正常人体免疫功能，其乏正常人体免疫功能，其染色体染色体 上编码腺苷脱氨酶（简称上编码腺苷脱氨酶（简称ADAADA） 的基因发生突变所致。的基因发生突变所致。由于由于ADAADA 是嘌呤代谢中的一种酶，是嘌呤代谢中的一种酶，该基因该基因 缺陷将导致患者身体细胞中脱氧缺陷将导致患者身体细胞中脱氧 腺苷

18、的累积，腺苷的累积，达到高浓度时脱氧达到高浓度时脱氧 腺苷将对免疫系统细胞（如腺苷将对免疫系统细胞（如T-T-细细 胞和胞和B-B-细胞）产生毒性。细胞）产生毒性。 Ashanti DiSilva, the first person to be treated by gene therapy. 将正常将正常ADAADA基因与基因与反转录病毒反转录病毒载体载体 相连，构建重组病毒表达载体。相连，构建重组病毒表达载体。 从患体体内分离有免疫缺陷的从患体体内分离有免疫缺陷的T T淋淋 巴细胞。巴细胞。 用重组病毒感染体外培养的用重组病毒感染体外培养的T T淋巴淋巴 细胞，使正常细胞，使正常ADAAD

19、A基因插入到基因插入到T T淋巴淋巴 细胞基因组中。细胞基因组中。 培养细胞并确认该基因正常表达。培养细胞并确认该基因正常表达。 将含有正常基因的将含有正常基因的T T淋巴细胞回输淋巴细胞回输 到患者骨髓组织中。经到患者骨髓组织中。经5-65-6个月治个月治 疗，患者体内疗，患者体内T T淋巴细胞的数量恢淋巴细胞的数量恢 复到正常水平，体内复到正常水平，体内ADAADA酶几乎达酶几乎达 到正常水平，免疫功能得到恢复。到正常水平，免疫功能得到恢复。 1990年，美国第一次对年，美国第一次对SCID病人作基因治疗，其步骤为：病人作基因治疗，其步骤为： 四、基因治疗的临床运用四、基因治疗的临床运用

20、v2 2、血友病、血友病B B v血浆中缺乏凝血血浆中缺乏凝血因子所致因子所致 v我国人体基因治疗第一成功的个例子。我国人体基因治疗第一成功的个例子。 O1991,1991,薛京伦薛京伦 (复旦大学复旦大学) O携带人携带人FF因子因子cDNA cDNA 的的逆转逆转 录病毒载体录病毒载体(HBSF - F)(HBSF - F) O皮肤成纤维细胞皮肤成纤维细胞 OFactor IX: 5%Factor IX: 5% 肿瘤的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充） v1、细胞因子：、细胞因子： 将细胞因子（白细胞介素将细胞因子（白细胞介素1-181-18、干扰素、肿瘤坏死、干扰素、肿瘤坏死 因子、

21、粒细胞等集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、粒细胞等集落刺激因子、粒细胞巨噬细胞集落刺激 因子）基因作为目的基因导入细胞，使宿主细胞或肿瘤局因子）基因作为目的基因导入细胞，使宿主细胞或肿瘤局 部持续产生一定量的细胞因子，达到抑制肿瘤生长的目的。部持续产生一定量的细胞因子，达到抑制肿瘤生长的目的。 1984198419871987年，淋巴激活的杀伤细胞年，淋巴激活的杀伤细胞(LAK)(LAK) 19861986年，肿瘤浸润淋巴细胞年，肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)(TIL)结合结合IL-2IL-2 19911991年，肿瘤坏死因子年，肿瘤坏死因子(TNF)(TNF)治疗黑色素瘤治疗黑色素瘤 v

22、2 2、“自杀基因自杀基因” 将编码某种酶的基因（自杀基因）转染到肿瘤细胞将编码某种酶的基因（自杀基因）转染到肿瘤细胞 中，然后用药物杀死细胞。这种药物对正常细胞无毒，对中，然后用药物杀死细胞。这种药物对正常细胞无毒，对 肿瘤细胞有选择性杀伤作用，因为导入的肿瘤细胞有选择性杀伤作用，因为导入的“自杀基因自杀基因”所所 编码的酶使这种药物转化为对肿瘤有害的物质，使其编码的酶使这种药物转化为对肿瘤有害的物质，使其DNADNA 不能复制而死亡。不能复制而死亡。 肿瘤的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充） v2 2、“自杀基因自杀基因” 将编码某种酶的基因（自杀基因）转染到肿瘤细胞将编码某种酶的基因

23、（自杀基因）转染到肿瘤细胞 中，然后用药物杀死细胞。这种药物对正常细胞无毒，对中，然后用药物杀死细胞。这种药物对正常细胞无毒，对 肿瘤细胞有选择性杀伤作用，因为导入的肿瘤细胞有选择性杀伤作用，因为导入的“自杀基因自杀基因”所所 编码的酶使这种药物转化为对肿瘤有害的物质，使其编码的酶使这种药物转化为对肿瘤有害的物质，使其DNADNA 不能复制而死亡。不能复制而死亡。 19921992年，单纯庖疹病毒（年，单纯庖疹病毒（HSVHSV）- -胸腺嘧啶激酶（胸腺嘧啶激酶（TKTK） 和和 GCVGCV（GanciclovirGanciclovir药物）药物） 肿瘤的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充

24、） v3 3、多药抗药基因：、多药抗药基因： 分离患者的造血干细胞，将分离患者的造血干细胞，将MDRMDR从体外转导进去，使从体外转导进去，使 这种干细胞获得多药耐药性，再输给病人，而使这类被修这种干细胞获得多药耐药性，再输给病人，而使这类被修 饰的干细胞繁衍的白细胞具有耐药性，肿瘤细胞未获得耐饰的干细胞繁衍的白细胞具有耐药性，肿瘤细胞未获得耐 药性，这样在加大剂量或长时间化疗情况下，大量杀死癌药性，这样在加大剂量或长时间化疗情况下，大量杀死癌 细胞，而正常细胞较少受损。细胞，而正常细胞较少受损。 肿瘤的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充） 肿瘤的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充） 肿瘤

25、的基因治疗（补充）肿瘤的基因治疗（补充） 2002 2002年，美国年，美国HoodHood等人应用阳离子纳米颗粒转等人应用阳离子纳米颗粒转 导目的基因，阻断肿瘤组织新生血管生成。导目的基因，阻断肿瘤组织新生血管生成。 三、基因治疗的必须条件三、基因治疗的必须条件 v 1. 1. 疾病的分子缺陷必须已知，即确定所涉及的基因或疾病的生化基础。疾病的分子缺陷必须已知，即确定所涉及的基因或疾病的生化基础。 v 2. 2. 详尽了解目的基因及其表达产物。详尽了解目的基因及其表达产物。 v 3. 3. 能够得到基因本身或其能够得到基因本身或其cDNAcDNA克隆。如果基因或克隆。如果基因或cDNAcDN

26、A很长，不能连接很长，不能连接 到载体，则应当能够删减不重要的部分以得到大小适当的功能拷贝。到载体，则应当能够删减不重要的部分以得到大小适当的功能拷贝。 v 4. 4. 有理想的靶细胞、安全高效的基因导入系统、导入的基因能够适量有理想的靶细胞、安全高效的基因导入系统、导入的基因能够适量 表达并接受机体的调控。表达并接受机体的调控。 v 5. 5. 了解疾病的病理生理学机制，确保所选择的基因操作可以准确纠正了解疾病的病理生理学机制，确保所选择的基因操作可以准确纠正 表型异常。例如由于基因突变导致功能丧失所引起的疾病，需导入功表型异常。例如由于基因突变导致功能丧失所引起的疾病，需导入功 能基因进行

27、替代。能基因进行替代。 v 6. 6. 基因治疗的安全性必须得到动物试验和临床前研究的证实。基因治疗的安全性必须得到动物试验和临床前研究的证实。 v 7. 7. 与其他治疗方法相比，只有在具有更有利的风险与其他治疗方法相比，只有在具有更有利的风险效益比的前提下效益比的前提下 才能选择基因治疗。才能选择基因治疗。 123 存在的问题存在的问题 导入基导入基 因的持因的持 续表达续表达 导入基导入基 因的高因的高 效表达效表达 安全性安全性 问题问题 目前临床试用的基因治疗遗传性疾病目前临床试用的基因治疗遗传性疾病 疾疾 病病传递的基因或产物传递的基因或产物靶细胞或组靶细胞或组 织织 载载 体体

28、-抗胰蛋白酶缺乏症抗胰蛋白酶缺乏症 慢性肉芽肿慢性肉芽肿 囊性纤维化囊性纤维化 家族性高胆固醇血症家族性高胆固醇血症 Fanconi-deToniFanconi-deToni综合征综合征 GaucherGaucher病病 享特综合征享特综合征 腺苷脱氨酶缺乏引起的腺苷脱氨酶缺乏引起的 免疫缺陷病免疫缺陷病 -抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶 P47PHoXP47PHoX 囊性纤维化跨膜调囊性纤维化跨膜调 节蛋白节蛋白 低密度脂蛋白受体低密度脂蛋白受体 互补组互补组C C基因基因 葡糖脑苷脂酶葡糖脑苷脂酶 艾杜糖醛酸艾杜糖醛酸-2-2-硫酸硫酸 腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶 呼吸道呼吸道 骨髓细胞骨髓细胞 呼吸道呼

29、吸道 肝细胞肝细胞 造血祖细胞造血祖细胞 周围血细胞周围血细胞 或造血干细或造血干细 胞胞 淋巴细胞淋巴细胞 淋巴细胞淋巴细胞 脂质体脂质体 反转录病毒反转录病毒 腺病毒、脂质腺病毒、脂质 体腺伴随病毒体腺伴随病毒 反转录病毒反转录病毒 反转录病毒反转录病毒 反转录病毒反转录病毒 反转录病毒反转录病毒 反转录病毒反转录病毒 小小 结结 v掌握：掌握： v基因治疗的定义、策略和途径基因治疗的定义、策略和途径 v基因治疗的基本方法：基因治疗的基本方法： v克隆正常基因方法、基因转移方法和载体、靶细克隆正常基因方法、基因转移方法和载体、靶细 胞选择。胞选择。 v药物治疗和饮食治疗的基本原则药物治疗和

30、饮食治疗的基本原则 v了解：了解： v目前基因治疗存在的问题目前基因治疗存在的问题 v 1目前，饮食疗法治疗遗传病的基本原则是目前，饮食疗法治疗遗传病的基本原则是( ) v A少食少食 v B多食肉类多食肉类 v C口服维生素口服维生素 v D禁其所忌禁其所忌 v E补其所缺补其所缺 v 2药物治疗的原则可以概括为药物治疗的原则可以概括为( ) v A去其所余去其所余 v B补其所缺补其所缺 v C用其所余用其所余 v D食其所需食其所需 v E取其所劣取其所劣 v 3. 遗传病的对症治疗中，肝移植可有效治疗（遗传病的对症治疗中，肝移植可有效治疗（ ） v A. 地中海贫血地中海贫血 v B.

31、 垂体性侏儒垂体性侏儒 v C. 肝硬化肝硬化 v D. 1抗胰蛋白酶缺乏症抗胰蛋白酶缺乏症 v E. 胱氨酸尿症胱氨酸尿症 v 4.新生儿苯丙酮尿症患者可采用的治疗方法是（新生儿苯丙酮尿症患者可采用的治疗方法是（ ） v A药物治疗药物治疗 v B手术治疗手术治疗 v C基因治疗基因治疗 v D饮食治疗饮食治疗 v E器官移植器官移植 v 5去其所余临床治疗方法包括去其所余临床治疗方法包括( ) v A应用鳌合剂应用鳌合剂 v B应用促排泄剂应用促排泄剂 v C利用代谢抑制剂利用代谢抑制剂 v D血浆置换或血浆过滤血浆置换或血浆过滤 v E平衡清除法平衡清除法 v A. 手术修复手术修复 v

32、 B. 手术去除手术去除 v C. 饮食治疗饮食治疗 v D. 药物治疗药物治疗补其所缺补其所缺 v E. 药物治疗药物治疗去其所余去其所余 v 6. 多指患者可以采取的治疗方式是（多指患者可以采取的治疗方式是（ ） v 7. 半乳糖血症患儿早期可以采取的治疗方式是（半乳糖血症患儿早期可以采取的治疗方式是（ ） v 8. 垂体性侏儒症患者可以采取的治疗方式是（垂体性侏儒症患者可以采取的治疗方式是（ ） v 9. 家族性高胆固醇血症患者常用治疗方式是（家族性高胆固醇血症患者常用治疗方式是（ ） v 10. 先天性心脏病患者可以采取的治疗方式是（先天性心脏病患者可以采取的治疗方式是（ ） v A.

33、 A. 基因置换基因置换 v B. B. 基因修正基因修正 v C. C. 基因增补基因增补 v D. D. 基因突变基因突变 v E. E. 基因干预基因干预 v 11. 11. 通过特定的方法将基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保通过特定的方法将基因的突变碱基序列纠正，而正常部分予以保 留的方法称为（留的方法称为（ ） v 12. 12. 用特定的方式抑制某个基因的表达或通过破坏某个基因的结构而用特定的方式抑制某个基因的表达或通过破坏某个基因的结构而 使之不能表达，称为（使之不能表达，称为（ ） v 13. 13. 用正常的基因原位替换致病基因，使用正常的基因原位替换致病基因，使DNA

34、DNA完全恢复正常的方法称完全恢复正常的方法称 为（为（ ） v 14. 14. 将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物能修将目的基因导入病变细胞或其他细胞，目的基因的表达产物能修 饰缺陷细胞的功能或使原有的某些功能得以加强，称为（饰缺陷细胞的功能或使原有的某些功能得以加强，称为（ ） v A直接体内疗法直接体内疗法 v B回体转移回体转移 v C间接体内疗法间接体内疗法 v D导入导入 v E移植移植 v 15外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培外源基因克隆至一个合适的载体，首先导入体外培 养的自体或异体的细胞，经筛选后将能表达外源基因的受养的自体或异体的细胞，经筛选后

35、将能表达外源基因的受 体细胞重新输回受试者体内称之为体细胞重新输回受试者体内称之为( ) v 16将含有外源基因的重组病毒、脂质体或裸露的将含有外源基因的重组病毒、脂质体或裸露的DNA 直接导入体内称之为直接导入体内称之为( ) v 17.基因治疗时，靶细胞应满足下列条件是（基因治疗时，靶细胞应满足下列条件是（ ） v A易于取材易于取材 v B具有增殖优势，生命周期短，便于体外培养具有增殖优势，生命周期短，便于体外培养 v C便于进行遗传技术操作，易受外源便于进行遗传技术操作，易受外源DNA转化转化 v D安全回输安全回输 v E靶向性靶向性 v 18.将正常基因转移到患者的生殖细胞中而使之

36、发育成一将正常基因转移到患者的生殖细胞中而使之发育成一 个正常的个体称为个正常的个体称为( ) v A体细胞基因治疗体细胞基因治疗 v B生殖细胞基因治疗生殖细胞基因治疗 v C胚胎细胞的基因治疗胚胎细胞的基因治疗 v D胚胎组织细胞基因治疗胚胎组织细胞基因治疗 v E胎儿的基因治疗胎儿的基因治疗 v 19对于缺陷型遗传病患者进行体细胞基因治疗，可以对于缺陷型遗传病患者进行体细胞基因治疗，可以 采用的方法为采用的方法为( ) v ASSCP v B基因添加基因添加 v C三螺旋三螺旋DNA技术技术 v D反义技术反义技术 v EcDNA杂交杂交 v 20.下列哪项是当今最有效的目的基因转移方法

37、（下列哪项是当今最有效的目的基因转移方法（ ） v A. 同源重组法同源重组法 v B. 基因枪技术基因枪技术 v C. 通过受体载导目的基因通过受体载导目的基因 v D. 病毒转移法病毒转移法 v D. 膜融合法膜融合法 v 21.下列基因转移的方法中属于化学法的是（下列基因转移的方法中属于化学法的是（ ） v A. 电穿孔法电穿孔法 v B. 显微注射法显微注射法 v C. 微粒子轰击法微粒子轰击法 v D. 直接注射法直接注射法 v E. 磷酸钙沉淀法磷酸钙沉淀法 v 21.我国首次进行基因治疗的遗传病是（我国首次进行基因治疗的遗传病是（ ） v A. 囊性纤维化囊性纤维化 v B. 乙

38、型血友病乙型血友病 v C. 甲型血友病甲型血友病 v D. 苯丙酮尿症苯丙酮尿症 v E. ADA缺乏症缺乏症 v 22对于进行成功的基因治疗来说，必要条件是对于进行成功的基因治疗来说，必要条件是( ) v A选择合适的疾病选择合适的疾病 v B掌握该病分子缺陷的本质掌握该病分子缺陷的本质 v C矫正遗传病的治疗基因得到克隆矫正遗传病的治疗基因得到克隆 v D克隆基因的有效表达克隆基因的有效表达 v E克隆基因的有效调节克隆基因的有效调节 复习思考题复习思考题 v1 1、传统的遗传病治疗包括哪几个方面，各有什么、传统的遗传病治疗包括哪几个方面，各有什么 优缺点？优缺点？ v2 2、何谓基因治

39、疗？目的基因转移有哪几种方法？、何谓基因治疗？目的基因转移有哪几种方法？ 各有何优缺点？各有何优缺点？ v3 3、反转录病毒和腺病毒作为基因治疗的载体各有、反转录病毒和腺病毒作为基因治疗的载体各有 何优缺点？何优缺点？ L o g o 唇唇 裂裂 手术前手术前手术后手术后 多多 指指 并指合并多指并指合并多指 v 基因修正（基因修正（gene correctiongene correction）：）： 指通过特指通过特 定方法，将致病基因的定方法，将致病基因的突变碱基序列纠正突变碱基序列纠正, ,对对 突变突变DNADNA进行进行原位修复原位修复。 v操作困难。操作困难。 v基因置换：基因置换

40、：在在原位定点导入原位定点导入外源正常基因，外源正常基因，代替代替 突变基因突变基因的的直接直接疗法。疗法。 v目的：纠正突变基因，进行精确的原位修复而不目的：纠正突变基因，进行精确的原位修复而不 涉及基因组其他任何的改变。涉及基因组其他任何的改变。 v是是理想的理想的基因治疗基因治疗策略策略，已用于的动物实验，但，已用于的动物实验，但 尚未应用于临床，基因治疗的远期目标。尚未应用于临床，基因治疗的远期目标。 v基因增补（基因添加）：基因增补（基因添加）：非定点导入非定点导入外源正常基因，而外源正常基因，而 没有没有真正真正去除去除或或修复突变基因修复突变基因。 v 外源正常基因导入体内后，可

41、代替突变基因表达具有正常外源正常基因导入体内后，可代替突变基因表达具有正常 功能的蛋白而发挥治疗作用，属于功能的蛋白而发挥治疗作用，属于间接间接治疗。治疗。 v 增：向靶细胞中导入其原本不表达的基因；增：向靶细胞中导入其原本不表达的基因； v 补：导入突变基因的正常基因。补：导入突变基因的正常基因。 v 目前应用最为广泛和深入的一种方法，并已付诸临床实践。目前应用最为广泛和深入的一种方法，并已付诸临床实践。 v基因干预：基因干预：用特定的方式用特定的方式抑制抑制某个基因的某个基因的表达表达或或 破坏破坏某个基因某个基因使之不能表达使之不能表达，以达到治疗疾病的，以达到治疗疾病的 目的。目的。

42、v常用方法：常用方法：应用反义核苷酸、核酶或应用反义核苷酸、核酶或RNARNA干扰技术干扰技术 抑制体内过度表达的基因。抑制体内过度表达的基因。 v靶基因一般都是过度表达的癌基因或是病毒基因。靶基因一般都是过度表达的癌基因或是病毒基因。 v生殖细胞基因治疗生殖细胞基因治疗 (germ cell gene therapy) v将正常基因转移到患者的精子、卵子或受精卵校将正常基因转移到患者的精子、卵子或受精卵校 正遗传缺陷，使其发育成正常个体。正遗传缺陷，使其发育成正常个体。 v特点：特点：能将新的正常基因传给下一代，从而使遗能将新的正常基因传给下一代，从而使遗 传病得到根治，有害基因不再在人群中散布。传病得到根治，有害基因不再在人群中散布。 理想，但理想，但 目前尚难在目前尚难在 人类实现。人类实现。 v体细胞基因治疗体细胞基因治疗 (somatic cell gene therapy) v将基因转移到个体