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文档简介

1、蛋白质系列cat#:90403-5常温运输、4保存中量蛋白胶回收试剂盒midi protein gel extraction kit 使用手册v1.0北京天恩泽基因科技有限公司北京市海淀区学院南路12号北师大留学生创业园57号楼301室qq:944823743，449730601（销售），948393554（技术），电话：010-62200278（销售）技术），order产品及特点十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sds-page）不仅可用于检测蛋白质的相对分子质量，而且也是分离纯化蛋白质的重要工具之一，随着蛋白质技术的微量化，有必要从凝

2、胶中回收蛋白质以用于制备抗体、免疫印迹、氨基酸组分分析或末端序列测定等。本产品就是专门为此用途开发的中量蛋白胶回收法，它具有下列特点：1. 简单，不需要复杂而昂贵的仪器（如电洗脱仪）。2. 适用于变性胶（sds-page）和非变性胶。3. 每次可以处理1 g的page胶（具体多少蛋白质取决于上样的浓度）。4. 回收率一般在50-90%之间（跟蛋白质大小，洗脱时间相关）。5. 跟后续的实验兼容，包括2-d电泳、质谱测序等。规格及成分成份5次包装溶液a5 ml溶液b50 ml20ml塑料注射器5只使用手册1份运输及保存常温运输，4保存，有效期一年。自备试剂无使用方法1. 按常规方法进行变性（sds

3、-page）或非变性蛋白电泳。2. 切取含目的蛋白的胶（尽可能地把多余的胶切除，否则会影响回收效率）。注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建议把样品分多孔上样，电泳后只切其中一个样孔的胶条进行固定和染色，然后将此胶条放回到在整体胶中原来的位置，通过显色胶条上的蛋白条带找到在未染色胶上对应区域，并切下此区域的胶进行回收。3. 将切下的、重量不超过1克的胶块转移到30 ml塑料注射器中。4. 用塑料注射器推杆将胶块从端口挤压出去，使之变成细小的碎片，用自备的15ml塑料离心管收集这些破碎的凝胶颗粒。5. 加入1 ml溶液a，4摇晃洗脱至少2-16小时（过夜）。此时最好将将要使用的溶液b放在冰箱预冷。6. 10,000 g离心10分钟，转移上清到新的10-15ml的塑料离心管中，注意不要吸取碎胶。7. 加入5倍体积的预冷的溶液b，摇晃混匀。8. -20放置至少10-30分钟。9. 室温12,000 g（注意：一定要检查使用的离心管是否能够耐受次离心力，如果不能建议将溶液分到1.5 ml的塑料离心管中再进行离心处理）离心5-20分钟，弃上清。10. 室温充分晾干，得到的沉淀即为回收的蛋白质。回收的蛋白质可溶解在适

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