羊肚菌原种配方筛选实验方案.doc

1、羊肚菌原种配方筛选实验方案羊肚菌原种配方筛选试验方案一、羊肚菌的生物学特性1、生态环境羊肚菌发生地生态环境复杂多样，而且不同种类也有生态上的变化，羊肚菌与植被类型也极为复杂。多生长于阔叶林地上及路旁，单生或群生。还有部分生长在杨树林、果园、草地、河滩、榆树林、槐树林及上述林边的路旁河边。2、土壤羊肚菌是一种土生菌，菌丝分布在土壤中。大多羊肚菌发生在腐殖土、黑（黄）色壤土、沙泥混合土中。3、发生时间羊肚菌主要发生在两个季节：春末夏初和夏末秋初，这两个时段的典型特征是前后存在温差的变化，或先低后高，或先高后低。4、温度研究认为羊肚菌属低温型真菌，菌丝在 3-28 均能生长，生长最适温度为 18-2

2、2 ，孢子萌发最适宜温度 15-20 ，子实体生长最适宜温度为 15-18 。昼夜温差大，能促进子实体的形成。5、水分和湿度羊肚菌生长基质的含水量与一般食用菌相似，最适含水量为 60%-65% ，在子囊果生长地土壤的含水量在 20%-30% 为宜，子囊果只有在空气相对湿度为 75%-95% 的条件下才能正常生长。6、光照和空气羊肚菌菌丝和菌核生长阶段不需要光照。光线过强会抑制菌丝生长，菌丝在暗处或微光条件下生长很快。光照对子囊果的形成有一定的促进作用，太强或过弱不利于子囊果的生长发育。羊肚菌也是好氧真菌，足够的氧气和良好的通风场所是保证羊肚菌正常发育下的必要条件，菌丝生长阶段对空气无明显的要求

3、，子囊果生长发育则对空气有较强的要求， CO2 浓度不得超过 0.3% 。7、PH研究认为，羊肚菌生长的最适PH 在 6.5-7.5 之间，趋于中性。二、供试菌株选取 3 种羊肚菌菌种作为供试菌株三、母种的制作1、母种培养基的制作配方：马铃薯综合培养基（1L）马铃薯 200g+葡萄糖 20g+琼脂 20g+磷酸二氢钾 3g+硫酸镁 1.5gNote：马铃薯需挖去芽眼、削皮、切块加水煮30min 左右用四层纱布过滤取滤液，称取其他原料一同置于锅中加热煮沸定容至一定的体积，分装到试管或锥形瓶中置于高压灭菌锅过灭菌 1h 左右，灭完菌后待高压锅压力降至 0，取出培养基摆斜面或分装到无菌的培养皿中冷却

4、接种。2、母种的接种及培养在超菌工作台上按照要求进行接种，接种后置于 20 的培养箱中避光培养三天即可长满培养皿表面， 4-6 天就可长出菌核。四、原种的制作1、配方选择 配方 1 棉籽壳 75% 、木屑 8% 、麦麸 12% 、石灰 1% 、腐殖土 4% 配方 2 木屑 75% 、麸皮 20% 、磷肥 1% 、石膏 1% 和腐殖土 3%配方 3 麦粒 60% 、谷壳 20% 、石膏 1% 、腐殖土 19% 配方 4 麦粒 75% 、土壤 23% 、石灰 1% 、过磷酸钙 1%配方 5 棉籽壳 30% 、腐殖土 30%、木屑 40% 、磷酸二氢钾0.2%配方6 全麦粒100%2、培养基制备将配方 1 至配方 8 的基料按比例称好，加入适量的水，使含水量达 60% 左右；用手握时，指缝间有水溢出，但不滴下；然后装入 25 mm250 mm 的试管，使装入量及松紧度一致。每个处理装 10 支试管，高温、高压灭菌，置于暗处冷却备用。3、注意事项麦粒需用水浸泡24h 后沥干水分装试管要均匀、松紧度一致，多余的用塑料折角袋或玻璃瓶装。高压灭菌 2h 左右接种量、接种方式等均需相同。3、培养条件置于 18 左右的恒温培养箱中暗培养五、菌丝长势的观察记录