血凝仪SOP文件希森美康CA500、510课件

1、精品文档全自动血凝分析系统标准操作规程1欢在下载so项码:页数：页制定人签名:日期:审核人签名:日期:批准人签名:日期:生效日期:颁发日期:周期性审查：年一次编码页码修订内容修订依据签名/日期修订登记:审查日期签名修订依据签名/日期审查登记:精品文档文件编虢：lab.sop-coa-0001版 次：01标准作业程序仝白天力而断我/ p acnn编修日期：05.09.15m 次：第1 k共4 k使用单位：王 日1 乂 ca500编 写：1 .原理ca500中具有具有2种检测原理方法的型号称 ca530,同时具有：凝固法、发色底物法1.1.1 凝固法：基本测试原理是光学法的散射光检测（用660nm

2、光电二极管检测散射光强度的变化），还并用了百分比方式 的测定原理:当试剂加入标本后，凝血开始启动，随之光学出现变化，仪器把这种光 学的变化描绘成凝固曲线：把开始出现凝集的起始点作为0%把完全凝固白终点作为 100%把50峨化点处作为凝固时间（报告点），当测定含有干扰物（黄疸、溶血、高脂血症等）或低纤维蛋白原血症的特殊标 本时，其作为起始点的 0%勺基线会随之上移或下移，相当于扣除本底干扰.以上凝固法检测原理所测定的项目包括了最常用的如pt、aptt fib、tt、内源凝血因子（f viii、xi、xi、xii ）,外源凝血因子（f ii、m vii、x）等1.1.2 .发色底物法的检测原理：是

3、通过测定产色物质的吸光度变化，以推算待测物的含量，这种方法属生物化学法，其基本原理是：试剂中为人工合成的含某种酶裂解位点的短肽，与产色物质如又硝基苯胺（pna）连接，待检物品中含有活性酶或无活性的酶原被加入的激活剂活化，在检测过程中产色物质被解离下来，使 被检物品出现颜色变化，其与被检物含量呈一定的数量关系。此方法以酶学方法为基础，可检测项目包括如：at-iii 、plg、pg ps fm pai, tpa, a 2-ap 等。2 .标本使用3.8%或3.2%（w/v）拘橡酸钠溶液作为抗凝剂；血样与抗凝剂的比例为9:1 ,如果血球压积55%则需调整这个比例，方法是：0.00185 x血液毫升数

4、100-压积尸抗凝剂毫升数；红细胞压积（%）枸檬酸钠溶液浓度（）红细胞压积（%）枸檬酸钠溶液浓度（为701.57或不同比积血样可参考下表使用不同浓度的抗凝剂（仍按9: 1比例抽血）此表参考丛玉隆血栓止 血实验质量控制应注意 的几个问题血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；一采样后60分钟内进行；一分离血浆应在 3000r/min离心10分钟，务使血小板去除;盛血浆容器应加塞，防止 ph改变;血浆应保存在2 8 c血浆存放时间不能太久:温度后效时间室温2hr28c4hr-20 cvweeks-70 c6months低温保存的样品，要在 37 c迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。3

5、试剂及配套消耗品3.1 试齐1j3.1.1 反应试剂：采用ca500血凝仪配套dade behring试剂，具体见相应项目要求2欢在下载精品文档3.1.2 系统清洁液：厂家配套sysmex clean i清洁液，用于检测过程中样品针、试剂针的冲洗；3.1.3 系统冲洗液：蒸储水，实验室自制，用于检测过程中系统管路的冲洗3.1.4 :稀释液：配套 dade behring 的 owerns veronal buffer 和 ca system buffer ,用于检测 过程中样本的稀释或定标曲线制定中标准血浆的稀释；3.2 其它消耗品3.2.1 反应杯：厂家配套 sysmx reaction t

6、ube 反应杯，货号：su-4003.3 .检测环境要求：3.3.1 温度：10 - 30 c;湿度：20 - 80% （无冷凝）3.3.2 电源：交流电100-240v, 50/60hz ;最大输入电量：最大250伏安，功率：720va3.3.3 请勿将仪器直接置于水、直射阳光、冷凝或大风的环境中 ，这样会导致不正确的检测结果并 导致仪器工作不正常而损坏3.3.4 仪器的背面和墙之间要始终保持20厘米以上的距离。否则，仪器会过热，连接导管和连接负载过大而可能引发火灾。4校准4.1 定期进行光学通道灵敏度校准检测（半年一次，由厂家工程师进行）4.2 定期进行温度检测校准（半年一次，或有相应温度

7、错误报警时进行，由厂家工程师执行）4.3 定期进行机械位置检查调校（半年一次，或有相应定位错误报警时进行，由厂家工程师执行）4.4 项目定标：入fbg、fviiii这些报告单位为含量浓度、活性单位的项目，原则上每更换一批号试剂就要进行定标曲线的重新制备，方法如下：4.4.1 按要求溶解好定标血浆，放室温10分钟后使用4.4.2 在主菜单选择 一选择项目（如fbg）选analysis setting一将定标液的定值输入assay sheet val. 处4.4.3 通过按select dil. ratio |选择合适的稀释度一在每个稀释度后面输入要测试的次数，如1或2（times）;4.4.4

8、以上全部输入完后，按return, 一 ok储存设置4.4.5 将定标液用小样本杯放置在样本架上的第一位，放在进1器上，将相应试剂 稀释液等放好在试剂盘相应位置4.4.6 按start,则定标曲线测试自动进行；4.4.7 重新进入定标曲线画面standard curve,等所有稀释点结果都测定出来后，如果曲线可接受，则按set 一储存新曲线.5质捽5.1 质控液种类：dade behring citrol i , ii , iii5.2 质控液的准备5.2.1 准备方式依照质控血浆配制要求：每瓶用 1ml蒸储水溶解，置室温15分钟后方可使用，室温下4小时内使用完；5.2.2 溶解后未使用完的质

9、控血浆注明开瓶日期，分装保存于 一20c, 3周内使用完。5.3 质控血浆使用时机5.3.1 每天做检体之前5.3.2 做完仪器校正之后5.3.3 重要的维修之后5.3.5 怀疑病患的报告有异常时5.4 质控血浆注意事项5.4.1 当作一般检体操作。5.4.2 接受范围（阀值）：按质控血浆说明书标注。5.5 超阀值之补救措施5.5.1 检查质控血浆是否过期、失效5.5.2 检查所使用的试剂、清洁、冲洗液、缓冲液等是否过期、失效5.5.3 若解决上述因素仍无法改善质控结果，必须考虑进行仪器校准及调校，联系厂家工程师进行。6操作步骤6.1 测试前准备：检查试剂、清洁液、冲洗液、反应杯等足够当日使用

10、，仪器开机自检ok无报警；6.2 开机：电源开关位于仪器左侧，打开到on状态，开机后仪器自检 约5分钟，屏幕上方notready 变为ready ,提示可进行检测；6.3 标本上机操作步骤：6.3.1 常规标本检测：从主菜单 选work list -出现样本架工作清单输入画面，选id. no. entry , 利用t键，将光本对应标本所处位置，输入样本编号- 按相应实验项目名称键 （如pt 、aptt），输入此标本要测试项目则选中项目相应位置标记为 。，- 按enter确认；用t曜，同样输入标本的编号、 项目，至全部输入完，仪器接受所输入的工作任务，将检体按编号顺序摆入样本架，放置好在进样器上

11、，注意样本架左小角凹槽要插人固定位，在仪器ready状态下，按,根据提示按first tube（从第一反应杯开始使用）或continue（从前一次剩下的杯开始使用）当“replace rack ?显示为“ yes“，可将进样架向前拉出，继续添加样本，如上述操作继续标本测试6.3.2 急诊标本检测：在检测过程中如有紧急检体插入，按interr，选择stat，当replace rack?显示为“ yes “，可将进样架向前拉出，用 id no. entry输入相应急诊样本标号，将标本放在唯一的急诊位，推入进样架，如 6.3.1 一样按项目名称键为每标本选择要测试的项目，确认，按 ,开始急诊检测。6

12、.3.3 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由”变为“哦明此试验已经完成，然后按下stored data（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单graph”，查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有 error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测6.3.4 关机前冲洗针：关机前需要洗针，在主屏幕上选rinse probe”，然后按下execute6.4 关机：回到主屏幕下，切断仪器电源。7维护保养7.1 每日维护:7.1.1 清空已用过的反应杯：，从仪器右侧取出废杯箱- 倒空废杯- 清洁废杯箱并放回7.1.2 清洁试剂位：打开遮光盖- 把试剂架取出.将试剂架连同试剂放入冰箱，

13、- 用棉纱布擦干净试剂位冷凝水- 盖好遮光盖7.2 每周维护7.2.1 液路冲洗：仪器在ready”状态下，从主菜单按special menu- 按maintain 键- 按rinse&prepare 键- 按execute键，运行此程序- 完成后按return键返回7.2.2 清洁仪器：定期用纱布、棉签等擦干净仪器内外；包括放试剂位置、放反应杯位置、检测通道和各处表面位置.7.3 需要时维护：定期清洁冲洗瓶盛蒸储盛蒸储水容器、清洁机械位置、清洁滤水器，检查防逆流瓶，有液体要清倒，清洁检测部（预温孔和测量孔）8健康和安全操作指南所有操作维护需注意以下:请只戴防护手套以序免接触相原微生物.按当地

14、的有害生物废物处理规定丢弃废液、更换卜来的部件及用过的妙赛、9参端案“捅益和存.9.1 ca500 operatormanual9.2 ca50隔规操作流程9.3 ca500日常维护及常见故障处理7欢在下载精品文档文件编虢：lab.sop-coa-0002版次：01标准操作规程注立rfn 在酶 o编修日期：05.09.15m 次：第 k共 k单位名称：编写：间测定（aptd1 .项目名称：活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time, aptt2 .检验原理：2.1. 检测原理：全自动血凝仪测定， 散射光凝固法检测 一一血浆样本经过一定时间的

15、温育后，加入反应试齐心仪器采用波长为 660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间。2.2. 反应方法学溯源：37c条件下，以糅花酸激活因子 刈和xi,以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板，在cs2+参与下，观察贫血小板血浆凝固所需时间，即为活化部分凝血活酶时间，是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。3 .设备参数：3.1. 设备:仪器型号sysmex ca150olr自动血凝分析仪3.2. 分析和计算参数：报告单位秒（s）3.3. 样本量：50 m，试剂量:50ul

16、激活齐ij,50ul cacl 23.4. 检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：190秒3.5. 重复性：cw2%4 .试剂及配套品：4.1. 激活齐j :cephaloplastin试齐1j （dade? actin ? activated cephaloplastin reagent）4.1.1. 商标：德灵（dadebehring4.1.2. 包装规格：10x10ml4.1.3. 货号：b4218-124.1.4. 成分：脑磷脂（从干燥兔脑粉中提取）加入含有缓冲液、稳定剂和防腐剂的1.0 x10-4m的糅花酸溶液4.1.5. 使用方法：液体试剂，直接使用.4.1.

17、6. 储存：没开盖试剂放28c存放至包装有效期，开盖后28c有效期7天4.2. 氯化钙溶液(calcium chloride solution )4.2.1. 商标：德灵(dadebehring4.2.2. 包装规格：10xl5ml4.2.3. 货号：orho374.2.4. 成分：0.025mol/l 的氯化钙溶液4.2.5. 使用方法 : 液体试剂 , 直接使用 .4.2.6. 储存 :没开盖试剂放28存放至包装有效期 , 开盖后28有效期7 天4.3. 清洗液( clean i ) : 用于测定过程中的吸样针冲洗4.3.1. 商标：希森美康(sysmex)4.3.2. 包装规格： 50m

18、l4.3.3. 货号：gsa500a4.3.4. 成分：1%次氯酸钠及活性成分4.3.5. 使用方法 : 液体试剂 , 直接使用 .4.3.6. 储存 :没开盖试剂放28存放至包装有效期, 开盖后放于仪器上有效期仅24 小时4.4. 校准质控血浆( ci-trol ? )4.4.1. . 商标：德灵(dadebehrin)g4.4.2. 货号：level 1 (normal), 291070 10x1mllevel 2 (abnormal),291071 10x1mllevel 3 (abnormal), 291072 10x1ml4.4.3. . 使用方法 :1ml 蒸馏水溶解置室温 15分

19、钟后使用4.4.4. 储存 : 室温 : 2h, 28 : 4h, 冷冻分装保存： -20c 2周,-70 c 6 个月5 . 操作步骤：5.1. 开机：开打印机电源开ca500仪器右侧电源-开机后机器进行自检、预热，当屏 幕上显示ready时可以进行试验5.2. 每日针冲洗：在主屏幕上选 rinse probe”，然后按下execute”进行针冲洗5.3. 准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置5.4. 准备反应杯：将杯架上每个位置排好反应杯5.5. 准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上(一个架子可放10个样本)，准备好放在进样器上5.6. 输

20、入试验项目：按下主菜单上的worklist ”键，在试验项目键点击 aptt；使 aptt项目下显示“一变为按“或，将需要测试标本如上操作选择；5.7. 输入样本号：按下“id no.entry ”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号5.8. 开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角star1w,仪器开始检测5.9. 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由 ”变为“眼明此试验已经完成，然后按 下stored date（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单graph”，查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测5.10. 关机前冲

21、洗针：关机前需要洗针，按下 rinse probe”，然后按下execute5.11. 关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。6 .参考范围：aptt（sec） : 2535s7 .临床意义：常用来筛选内源性凝血系统（viii、ix、xi、xii）及肝素抗凝治疗的监测7.1. aptt延长：见于先天性凝血因子缺乏（如血友病甲、乙，接触因子xii、xi缺乏，vwf0;多种 凝血子缺乏（如严重肝病、维生素k缺乏、dig纤溶亢进等）；血液中有抗凝物存在7.2. 对内源凝血途径因子（皿、ix、xi）缺乏较gt敏感（血小板异常不影响 aptj能 检出vffl: g小于25%勺轻型血友病。对凝血酶

22、原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感，故 a ptt延长的最常见疾病为血友病。此时可进一步做纠正试验，即于患者血浆中加入 1 /4量的正常新鲜血浆、硫酸钢吸附血浆或正常血清（试剂参见凝血酶原消耗试验的 纠正试验），再做aptt如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正， 则为因子vffl缺乏；如吸附血浆不能纠正，其余两者都能纠正，则为因子ix缺乏；如三者都不能纠正，则为病理性循环抗凝物质。7.3.aptt缩短：见于dig高凝期和妊娠高血压综合症等高凝状态7.4.是监测肝素治疗的首选指s二在使用肝素治疗时，多用 apt璐测药物用量，一般以维 持结果为基础值的2倍左右8 .标本要求：8.1. 使用

23、3.8%拘橡酸钠溶液作为抗凝剂；8.2. 血样与抗凝剂的比例为9:1 ,如果血球压积20娥55%则需调整这个比例，方法是： 0.00185 x血液毫升数100-压积尸抗凝剂毫升数；8.3. 血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；一采样后60分钟内进行；一分离血浆应在 3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除；8.4. 血浆保存条件：温度后效时间室温2hr28c4hr-20 cvweeks-70 c6months8.5. 低温保存的样品，要在 37c迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。8.6. 所有与标本接触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。8.7. 拒收标本：严重溶

24、血、黄疸、脂血或出现凝块，距采集时间超过2小时并且没有按要求 储存的7欢迎下载 。精品文档9 .参考依据：ca500自动血凝仪使用手册,试剂使用说明书10 .附件：10.1. ca500常规操作流程10.2. . aptt试剂使用说明书编写者：日期：科主任签字：文件编虢：lab.sop-coa-0003版次：01标准操作规程编修日期：05.09.15m 次：第 k共 k单位名称：目见尿口1口双编写：(pt)1 .项目名称：血浆凝血酶原时间测定(prothrombin time , pt)2 .检验原理：2.1. 检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理一一血浆样本经过一定时间的温育后，

25、加入反应试剂，仪器采用波长为 660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间。2.2. 反应方法学溯源：凝血酶原时间(pt)测定是quick于1935年创立的。在受检血浆中加入过量的组织凝血活酶 (人 脑、兔脑、胎盘及肺组织等制品的浸出液)和钙离子，使凝血酶原变为凝血酶，后者使纤维蛋 白原转变为纤维蛋白。观察血浆凝固所需要的时间即凝血酶原时间。其凝固时间取决于凝血因 子h、叩、v、x、i的水平。该试验是反映外源凝血系统最常用的筛选试验。3 .设备参数：3.1. 设备:

26、仪器型号sysmex ca50眸自动血凝分析仪3.2. 分析和计算参数：凝血酶原时间-秒(s),国际标准化比值-inr,凝血酶原活动度-%,凝 血酶原比值-ptr3.3. 样本量：50 m，试剂量：100ul03.4. 检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：120秒3.5. 重复性：cv2%4 .试剂及配套品：4.1. 反应试剂：凝血活酶含钙试剂(thromborel ? s)4.1.1 商标：德灵(dadebehring4.1.2 包装规格：10x10ml4.1.3 使用方法：每瓶用10ml蒸储水溶解，须放置室温或37c 30分钟后才使用保存 : 未溶解试剂28 至包装

27、有效期 , 试剂溶解后28 ： 7 天4.1.4 货号： ouhp494.1.5 参数：isi (国际敏感度指数)7.02( 每次更换试剂批号需将包装中所附isi 指数表中对应仪器型号的 isi 值输入仪器中.(输入方法:主菜单fstandard curvselect testpjmanual entry-光标在isi处输入isi值1.1.5. 成分： thromborel ? s reagent 中包含:a. 冻干人胎盘促凝血酶原激酶( lyophilized humanplacental thromboplastin )b. 氯化钙(calcium chloride)c. 稳定剂(stab

28、ilizers)d. 防腐剂( preservatives )1.2 清洗液( clean i ) : 用于测定过程中的吸样针冲洗1.2.1. 商标：希森美康(sysmex)1.2.2. 包装规格： 50ml1.2.3. 货号：gsa500a1.2.4. 成分：1%次氯酸钠及活性成分1.2.5. 使用方法 : 液体试剂 , 直接使用 .1.2.6. 储存 : 没开盖试剂放28存放至包装有效期, 开盖后放于仪器上有效期仅 24小时1.3 标准血浆：(standard humanplasma)-用于pt%勺定标校准1.3.1. 商标：德灵(dadebehrin)g1.3.2. 货号： orkl 1

29、31.3.3. 包装 :6x1ml1.3.4. . 使用方法 :1ml 蒸馏水溶解, 放置 15分钟后使用1.3.5. 储存 : 没开配试剂放28存放至包装有效期, 开配后保存条件 :室温：2h, 28 c: 4h, -20c分装冷冻保存：2周，-70 c分装冷冻保存：6个月1.4 . 质控血浆( ci-trol ? )1.4.1. . 商标：德灵(dadebehrin)g1.4.2. 货号：level 1 (normal), 291070 10x1mllevel 2 (abnormal),291071 10x1mllevel 3 (abnormal), 291072 10x1ml1.4.3.

30、 . 使用方法 :1ml 蒸馏水溶解置室温 15分钟后使用1.4.4. 储存 : 没开配试剂放28 存放至包装有效期, 开配后保存条件: 室温 : 2h,28: 4h, 冷冻分装保存： -20c 2 周,-70 c 6个月5. 操作步骤：5.1 开机：开打印机电源开ca500仪器右侧电源-开机后机器进行自检、预热， 当 屏幕上显示read，时可以进行试验5.2 每日针冲洗：在主屏幕上选 rinse probe”，然后按下execute”进行针冲洗5.3 准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置5.4 准备反应杯：将杯架上每个位置排好反应杯5.5 准备标本：将室内质

31、控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10个样本），准备好放在进样器上5.6 输入试验项目：按下主菜单上的worklist ”键，在试验项目键点击pt,使pt项目下显示“一变为按“或，将需要测试标本如上操作选择；5.7 输入样本号：按下“id no.entry ”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号5.8 开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角start,仪器开始检测5.9 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由 “ ”变为 “” 表明此试验已经完成，然后按下 “stored date ”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“graph”，查看凝集曲线、吸光

32、度、结果等，检查是否有 error错误信息，有错误报警 的标本需考虑重测5.10 关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下 rinse probe”，然后按下execute”5.11 关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。6. 参考范围： pt （sec）：10.8 13.5 spt%： 80% 120%ptr： 0.85 - 1.15inr ： 0.8 1.57. 临床意义：7.1 pt 延长 :7.1.1. 外源凝血系统的因子h、v、即、x和纤维蛋白原减低，如先天性某因子缺 乏症和低（无）纤维蛋白原血症，但均很少见，获得性的见于 dic、原发性纤溶、维 生素k缺乏症、肝脏疾病等。7.1.

33、2. .血循环中抗凝物质增加，如肝素或 fdm曾多等。7.2 pt 缩短 : 口服避孕药、高凝状态和血栓性疾病等。7.3 用于香豆素类等口服抗凝剂的监控7.3.1. 一般认为以维持pt值在参考值的2倍左右（1.32.5倍），或ptr为1.3 1.5（最大不超过2）为宜。7.3.2. . pt%控制在40犯上，减低到40%t出血倾向。7.3.3. 不同情况下口服抗凝药治疗的最佳抗凝强度时inr 的范围：a. 术前两周或术中口服抗凝药，inr为1.53.0 ;b. 原发或继发静脉血栓的预防，inr为23;c. 活动性静脉血栓、肺梗塞、复发性静脉血栓的预防，inr为24;d. 动脉血栓栓塞的预防，心

34、脏换瓣术后，inr为34.5。8. 标本要求：8.1 使用3.8%拘橼酸钠溶液作为抗凝剂；8.2 血样与抗凝剂的比例为9:1 ,如果血球压积20娥55%则需调整这个比例，方法是：0.00185 x血液毫升数100-压积尸抗凝剂毫升数；13欢迎下载。精品文档8.3 血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆）；一采样后60分钟内进行；一分离血浆应在 3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除;8.4 血浆保存条件：温度后效时间室温2hr28c4hr-20 cvweeks-70 c6months8.5 低温保存的样品，要在 37c迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。8.6 所有与标本接

35、触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。8.7 拒收标本：严重溶血、黄疸、脂血或出现凝块，距采集时间超过2小时并且没有按要求 储存的9 .参考依据：ca50心自动血凝仪使用手册，试剂使用说明书10 .附件：10.1 ca500常规操作流程10.2 . pt试剂使用说明书文件编虢：lab.sop-coa-0004版次：01标准操作规程血浆纤维蛋白原定量测定（fib ）编修日期：05.09.15m 次：第 k共 k单位名称：编 写：1 .项目名称：纤维蛋白原（fibinogen）2 .检验原理：2.1. 检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理一一血浆样本经过一定时间的温育后，加入反应试

36、剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程（纤维蛋白原转化为纤维蛋白）中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间.先用此方法分别测定不同 fib浓度的标准血浆制定横坐标为凝血时间 ，纵坐标为fib浓度的fib标准曲 线,在测定病人血浆时测定的凝血时间与标准曲线上对应的时间-浓度值一一对应，仪器则自动报告出 fib含量（g/l）.2.2. 反应方法学溯源：纤维蛋白原测定（ clauss法）原理-37 c条件下，凝血酶将可溶性的血浆蛋白纤维 蛋白原转化为不溶性的多聚体纤维蛋白。当凝血酶浓度较高（约为100nih/ml

37、）且纤维蛋白原浓度较低（0.05 0.8g/l ）时该反应决定于纤维蛋白原浓度，凝血酶凝血时间与纤维蛋白原浓度相比较呈线形关系。3 .设备参数：3.1. 设备:仪器型号sysmex ca150眸自动血凝分析仪3.2. 分析和计算参数：报告单位 秒（s）,fib定量g/l3.3. 样本量：1/10稀释标本100ul（10ul血浆+90ul缓冲液），试剂量:50ul3.4. 检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：190秒3.5. 重复性：cw4%4 .试剂及配套品：4.1. 反应试剂：凝血酶试剂( thrombin reagent)4.1.1 商标：德灵(dadebehrin

38、)g4.1.2 包装规格：105ml4.1.3 货号： b4233-274.1.4 成分：牛凝血酶冻干粉( lyophilized preparation of bovine thrombin )(近似100 nih units/ml )4.1.5 使用方法 :5ml 蒸馏水充分溶解后使用4.1.6 储存 : 没开配试剂放28存放至包装有效期 , 开配后保存条件: 28 : 5 天4.2. 缓冲液( dade? owrens veronal buffer 或 ca system buffer ) - 用于标本稀释4.2.1 商标：德灵(dadebehrin)g4.2.2 包装规格：10 xl5

39、ml 或 1x500ml4.2.3 货号：b4234-25 或 b4265-354.2.4 成分：a.2.84m02m的巴比妥钠(sodium barbital)b.1.25m01m 的氯化钠(sodium chloride)c.ph7.35 0.14.2.5 使用方法 : 每次倒出刚够当天使用的量放置于仪器上使用.4.2.6 储存：没开配试剂放28c密封存放至包装有效期，开盖后放置仪器上保存：24h,使 用放置时间太长的缓冲液会导致凝血时间延长即 fib 含量测定偏低!4.3. 清洗液( clean i ) : 用于测定过程中的吸样针冲洗4.3.1 商标：希森美康(sysmex)4.3.2

40、包装规格： 50ml4.3.3 货号：gsa500a4.3.4 成分：1%次氯酸钠及活性成分4.3.5 使用方法 : 液体试剂 , 直接使用 .4.4. 标准血浆 :(standard humanplasma) - 用于 fib 的定标校准4.4.1 商标：德灵(dadebehrin)g4.4.2 货号： orkl 134.4.3 包装 :6x1ml4.4.4 . 使用方法 :1ml 蒸馏水溶解, 放置 15分钟后使用4.4.5 储存 : 没开配试剂放28存放至包装有效期, 开配后保存条件 :室温：2h, 28 c: 4h, -20c分装冷冻保存：2周，-70 c分装冷冻保存：6个月4.5.

41、质控血浆( ci-trol ? )4.5.1 . 商标：德灵(dadebehrin)g4.5.2 货号：level 1 (normal), 291070 10x1mllevel 2,291071 10x1mllevel 3, 29107210x1ml4.5.3 . 使用方法 :1ml 蒸馏水溶解置室温15分钟后使用4.5.4 储存 : 没开配试剂放28 存放至包装有效期 , 开配后保存条件: 室温 : 2h,28: 4h, 冷冻分装保存： -20c 2 周,-70 c 6个月5 . 操作步骤：5.1. 开机：开打印机电源开ca1500仪器右侧电源-开机后机器进行自检、预热， 当屏幕上显示rea

42、d，时可以进行试验5.2. 每日针冲洗：在主屏幕上选rinse probe”，然后按下execute”进行针冲洗5.3. 准备试剂：按照仪器试剂位置设定，把上述每项的试剂准备好，放在相应的位置5.4. 准备反应杯：将杯架上每个位置排好反应杯5.5. 准备标本：将室内质控和离心好的样本放在相应的样本架上（一个架子可放10个样本），准备好放在进样器上5.6. 输入试验项目：按下主菜单上的“worklist ”键，在试验项目键点击fib ，使fib 项目下显示“一变为按 wu将需要测试标本如上操作选择；5.7. 输入样本号：按下“id no.entry ”，按顺序输入样本的序号或病人的病历号5.8.

43、 开始检测：待一切准备工作就绪，按下屏幕右上角starts,仪器开始检测5.9. 查看结果：返回主屏幕，检测的项目如果由 “ ”变为 “” 表明此试验已经完成，然后按下 “stored date ”（储存结果）键，屏幕会换到结果显示界面，按下边第一个菜单“graph”，查看凝集曲线、吸光度、结果等，检查是否有error错误信息，有错误报警的标本需考虑重测5.10. 关机前冲洗针：关机前需要洗针，按下 rinse probe”，然后按下execute”5.11. 关机：回到主屏幕下，切断仪器电源，关闭打印机。6 . 参考范围： fbg ： 2 4g/l7 . 临床意义：7.1. fib 减少见于

44、：先天性低（无）纤维蛋白原血症、严重肝脏疾病、原发性纤维蛋白溶解、dic、异常纤维蛋白原血症、新生儿及早产儿、某些产科意外、恶性肿瘤等。7.2. fib 增高见于：各种血栓前状态及血栓栓塞病、月经期及妊娠期、糖尿病、动脉硬化、结缔组织病、手术后、休克、癌肿、骨髓瘤、放射治疗后等。8 . 标本要求：8.1. 使用3.8%拘橼酸钠溶液作为抗凝剂；8.2. 血样与抗凝剂的比例为9:1 ,如果血球压积55%则需调整这个比例，方法是： 0.00185 x血液毫升数100-压积尸抗凝剂毫升数；8.3. 血浆分离（如果不能立即测试，应尽快分离血浆） ；15欢迎下载。精品文档一采样后60分钟内进行；一分离血浆

45、应在 3000r/min 离心10分钟，务使血小板去除;8.4. 血浆保存条件：温度后效时间室温2hr28c4hr-20 cvweeks-70 c6months8.5. 低温保存的样品，要在37c迅速解冻，减低凝血因子的消耗，并立即测试。8.6. 所有与标本接触的试管、吸管等均采用用塑料或硅化处理的。8.7. 拒收标本：严重溶血、黄疸、脂血或出现凝块，距采集时间超过2小时并且没有按要求 储存的9 .参考依据：ca500自动血凝仪使用手册,试剂使用说明书10 .附件：10.1 ca500常规操作流程10.2 . fib试剂使用说明书编写者：日期：科主任签字:文件编虢：lab.sop-coa-00

46、05标准操作规程编修日期：05.09.15版次：01rfrr 而后 口d psi。川1 之 / rtm 次：第 k共 k单位名称：域皿叫h巾日例je ( ii)编 写：1 .项目名称：血浆凝血酶时间测定(thrombin time , tt)2 .检验原理：2.1. 检测原理：全自动血凝仪测定，散射光凝固法检测原理血浆样本经过一定时间的温育后，加 入反应试剂，仪器采用波长为660nm的光照射反应物，通过测量散射光光强度的改变来测定凝血过程(纤维蛋白原转化为纤维蛋白)中的浊度变化，从散射光光强度的测定可得凝集曲线，再通过百分比原理方法求得凝血时间。2.2. 反应方法学溯源：受检血浆中加入凝血酶试

47、剂，使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，观察血浆凝固所需的时间即凝血酶时间。3 .设备参数：3.1. 设备：仪器型号sysmex ca500全自动血凝分析仪3.2. 分析和计算参数：凝血酶原时间-秒(s)3.3. 样本量：50 pl ,试齐j量：100ul03.4. 检验时间：在最长检验时间之内测出结果，标准设置最长检验时间：120秒3.5. 重复性：cvm%4 .试剂及配套品：4.1. .反应试剂：凝血活酶含钙试剂(test thrombin reagent )4.1.1 商标：德灵(dadebehring)4.1.2 包装规格：10x5ml,货号：owhm134.1.3 使用方法 : 每瓶用 5ml 专用缓冲液溶解, 须放置室温10分钟后才使用保存 : 未溶解试剂28 至包装有效期 , 试剂溶解后 28 ： 7 天机上有效期(15)：1