尿液分析的标准化及其尿沉渣定量检测技术新进展ppt课件

1、l1590年荷兰人詹森发明了世界上第一台复合显微镜 l1673年，Frederick Dekkers用加热醋酸酸化尿液的方法检测蛋白 l1896年，Daiber出版了他的尿沉渣图谱 l1911年，Benedict提出了稳定方便的尿糖检测方法lJohns Hopkins Hospital 的Charles Emerson发表名著 l1956年Alfred Free发明的CLINISTIX，尿液分析史上第一个“浸入即读的测试方法 l5060手工化学分析l7080手工化学分析尿沉渣镜检l8090尿液干化学分析l2K2K1 尿液干化学分析 尿沉渣镜检l2K2完好的尿液分析=l 干化学+尿流式+镜检确认

2、l更准l为临床提供更为准确可靠的检验结果l更快l缓解检验科不断添加的样品量的压力l为临床提供更为及时的检验报告l更多l为临床提供更多的实验室诊断目的“应对医疗纠纷举证倒置政策对临床和检验科的要求l更准？l过分依赖尿液干化学分析l尿沉渣镜检的方法学不精细性l样品处置过程所带来的干扰l人工镜检客观要素的影响l更快？l单个样品：9.75分钟*l批量处置：5.25分钟*l更多？l*尿液分析最正确方法,Frank Bailey，ASCP例如：白细胞：肾移植病人淋巴尿不表现脂酶尿糖：受其它复原物质的影响呵斥假阴性细菌：只能检测革兰氏阴性杆菌定性结果，不能用于疗效的监测 结论：不能替代镜检l红细胞：泌尿系出

3、血、泌尿系恶变、出血性疾病l白细胞：泌尿系感染、急性肾小球肾炎、肾移植排异l上皮细胞：肾小管病变l管型l红细胞管型：急性肾小球肾炎、肾堵塞l白细胞管型：急性肾小球肾炎、肾综合症、肾盂肾炎l上皮细胞管型：肾小管病变，如肾脏疾病、多种中毒l透明管型：肾小球毛细管损害l颗粒管型：肾盂肾炎、慢性肾疾病l细菌：泌尿道感染lUF-100、CD-3500、计数板三种方法对、计数板三种方法对比比l 检测检测104份脑脊液份脑脊液l在低白细胞数的检测中，在低白细胞数的检测中，l UF-100的的CV为为4.9% l CD-3500的的CV为为28%l镜检法的镜检法的CV为为40%不同检验员间镜检结果的差别实验室

4、实验室检验员检验员RBCRBCW BCW BCECECCastCastBactBact1 1大量大量10-15/HPF10-15/HPF+A A2 2少量少量7-10/HPF7-10/HPF+-3 3大量大量3-5/HPF3-5/HPF+-1 1大量大量10-15/HPF10-15/HPF+-B B2 2大量大量5-7/HPF5-7/HPF+-3 350-70/HPF50-70/HPF3-5/HPF3-5/HPF+-l标本在分析前形状改动l标本混合不当l离心的尿量不同l离心速度和时间不同l尿沉渣重悬的液量不同l尿沉渣重悬的方法不同l镜检一滴沉渣的液量不同l盖片或计数板的差别l视野数目和位置的差

5、别l成份识别上的人员差别l显微镜视野大小的差别050100150200250300350400450500RBC count (/mL)Sample 1Sample 2Sample 3Sample 4Sample 5原液400G, 5min500G, 5min 500G, 15min不同离心条件上清液中RBC的残留量l标本的搜集及运送l2.2 标本的运送 按上述要求留取尿液应在2小时内完成检验。l尿沉渣检验的操作步骤l3.2 镜检 计数细胞数或管型，按/l报告。l资料与器械l1.5 自动化设备 有条件的实验室也可运用各类自动、半自动的尿沉渣分析仪作为尿沉渣分析，或用作过筛，但此类仪器必需经权威

6、机构认可。DiaSys R/S2000系统l主要部件为一个玻璃的光学计数板l计数板固定在显微镜上并衔接一个加样泵l尿液标本首先按照常规步骤进展处置l将加样管插入离心管的底部，启动加样泵汲取180微升的沉渣并利用涡流混合重悬l在加样泵作用下尿沉渣流入检测区，分布在光学计数板上l计数后，系统自动用700微升的盐水冲洗管路和计数板以防止交叉污染为什么要运用全自动尿沉渣分析仪？l更准？l过分依赖尿液干化学分析l尿沉渣镜检的方法学不精细性l样品处置过程所带来的干扰l人工镜检客观要素的影响l更快？l单个样品：9.75分钟*l批量处置：5.25分钟*l更多？l*尿液分析最正确方法,Frank Bailey，

7、ASCPF彻底排除样品处置过程的干扰要素以及人工镜检客观要素的影响，提高分析中质量控制F提高挑选效率，保证样品的质量，强化分析前质量控制C. V. ( % )C. V. ( % )A ARBC ( / uL )RBC ( / uL )98.738.1WBC ( / uL )WBC ( / uL )107.333.5B BRBC ( / uL )RBC ( / uL )54.24.5WBC ( / uL )WBC ( / uL )39.77.4UFUF-100-100C CRBC ( / uL )RBC ( / uL )192.83.4WBC ( / uL )WBC ( / uL )284.13

8、.5D DRBC ( / uL )RBC ( / uL )938.62.2WBC ( / uL )WBC ( / uL )568.13.3l9-氮杂菲Phenanthridinel染色DNA和RNAl发射荧光为: 橙色l对死细胞胞膜穿透性强l羰花青Carbocyaninel细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色l发射荧光为：绿色彩色打印报告-科研报告80 100 ch80 100 chlToru Hyodo, Kazuo Kumano et al. Detection of glomerular and non-glomerular red blood cell by automated ur

9、inary sediment analyzer. Jpn J Nephrol 37:35-43,1995.l UF-100：敏感性 100， 特异性 92.54%*l 镜检法： 敏感性 95.83%，特异性 93.33%l马骏龙，丛玉隆等。全自动尿沉渣分析仪检测尿红细胞鉴别血尿来源的讨论。中华医学检验杂志 V20 (5), 1997。l UF-100：敏感性 100， 特异性 78.2%l *Hyodo所选非肾小球病变对象排除了血尿同时伴菌尿病人临床运用输尿管结石，肾盂肾炎临床运用肾病综合症临床运用用于检测脑脊液中的白细胞lUF-100、CD-3500、计数板三种方法对、计数板三种方法对比比l

10、 检测检测104份脑脊液份脑脊液l在低白细胞数的检测中，在低白细胞数的检测中，l UF-100的的CV为为4.9% l CD-3500的的CV为为28%l镜检法的镜检法的CV为为40%Reinhard Ziebig, Andreas Lun, Pranav SinHA. Leukocyte Counts in Cerebrospinal Fluid with the Automated Hematology Analyzer CellDyn 3500 and the Urine Flow Cytometer UF-100. Clinical Chemistry 46:2 242247 (200

11、0)流式细胞仪分析脑脊液标本流式细胞仪分析脑脊液标本lUF-100及显微镜检测红细胞有好的相关及显微镜检测红细胞有好的相关性，性，r=0.919lUF-100与白细胞的相关性为与白细胞的相关性为r=0.886lUF-100与细菌的相关性为与细菌的相关性为r=0.605，CSF出血标本细菌计数不可信出血标本细菌计数不可信l颅咽管瘤病人的颅咽管瘤病人的CSF中新形隐球菌、酵母中新形隐球菌、酵母菌及胆固醇结晶可检测出菌及胆固醇结晶可检测出JosT.Van Acker, Joris R. Delanghe et al. Automated Flow Cytometric Analysis of Cerebrospinal Fluid. Clinical Chemistry 47:3 556-560 (2001)lUF的快速挑选功能大大降低人工镜检的任务量l处理阳性样品的漏检问题，防止了医疗纠纷l定量的规范化报告方式l大大提高结果的准确性l适用于临床治疗监测 l提供新的临床信息lRBC形状信息，用于血尿来源的鉴别诊断没有UF有了UF报告报告报告l试纸条挑选、沉渣分析、化学定量、微生物检查等是尿液分析不可短少的内容。l采用自动化仪