复方积雪草苷凝胶膏剂研究

1、复方积雪草苷凝胶膏剂研究 湖北中医药大学学位论文原创性声明本人声明: 所呈交的学位论文是在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了论文中特别加以标注和致谢的地方外,本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得湖北中医药大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出贡献的个人和集体,均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:一一彩卅晚二一三年五月二十四日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解湖北中医药大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保留学位论文,允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的

2、全部或部份内容,可以采用复印、缩印或其他手段保留学位论文;学校可以根据国家或湖北省有关部门的规定送交学位论文。同意中国优秀博硕士论文全文数据库出版章程的内容。同意授权中国科学技术信息研究所将本人学位论文收录到中国学位论文全文数据库。保密论文在解密后遵守此规定论文作者张刮让导师张聘高埘专年譬月日圳四洲四四洲四四四目 录中文摘要?.缩略词表前 言?.第一章 复方积雪草苷凝胶膏剂处方工艺的研究.仪器与材料.仪器与试剂?.实验动物.?.方法与结果.基质处方设计?.单因素考察.正交试验.透皮吸收促进剂的选择?.复方积雪草苷凝胶膏剂制备工艺?.讨论?.小结?.第二章 复方积雪草苷凝胶膏剂质量标准的建立仪器

3、与材料.药品与试剂?.仪器.方法与结果.性状.鉴别.检查.复方积雪草苷凝胶膏剂中药物的含量测定?.讨论?.小结?.第三章复方积雪草苷凝胶膏剂体外透皮及在体透瘢痕实验的研究?.仪器与材料.药品与试剂?.仪器.实验动物.方法与结果.体外透皮试验.在体透瘢痕实验.讨论?.小结?.第四章 复方积雪草苷凝胶膏剂皮肤刺激性及急性毒性试验的研究.仪器与材料.药品与试剂?.实验动物方法与结果.皮肤刺激性试验.急性毒性试验.讨论?.小结?.第五章 复方积雪草苷凝胶膏剂对兔耳增生性瘢痕治疗作用的研究.仪器与材料.药品与试剂?.仪器.实验动物方法与结果.兔耳增生性瘢痕模型的建立?.实验分组与给药?.?.形态学观察?

4、.组织中油含量的测定?.染色.?.染色?.讨论.?小结?.结语与创新?.参考文献综 述增生性瘢痕形成机制及治疗药物研究进展?参考文献?.已发表论文?.致 谢?中文摘要 增生性癜痕 ,是伤口愈合过程中组织异常 增生所致,长期以来,增生性癜痕的治疗困扰着广大医药研究者。在癜痕 的生长期,以药物治疗为主,常用的有激素类、硅制剂、抗肿瘤药物、免 疫抑制剂及细胞因子等,激素类药物常用于瘢痕的局部注射,副作用明显, 患者顺应性差;硅制剂由于其透气性能差,在热天气下皮肤易产生小丘疹 甚至溃烂;抗肿瘤药物细胞毒性大,有效剂量接近中毒剂量,剂量难控制, 故临床应用困难;免疫抑制剂及细胞因子副作用多、价格贵,临床

5、上应用 不多。本文旨在选择疗效确切的药物及合适的剂型为临床提供安全有效的 治疗的新产品与新制剂。 积雪草总苷是从伞形科植物积雪草中提取的三萜皂苷化合物,实验证 明积雪草总苷可抑制成纤维细胞的生长,临床上常用积雪苷霜软膏外涂, 外加芙原片积雪草苷口服,联合使用治疗增生性癜痕。醋酸曲安奈德 是一种治疗癜痕疗效确切的类固醇类激素,能有效抑制瘢痕胶原的合成, 提高胶原酶的活性,并促使胶原分解,常用于局部注射治疗增生性瘢痕。 维生素常用于滋润保护干燥脆薄的瘢痕皮肤。但是衣物摩擦会造成软膏 剂药物损失,且口服药物发挥全身作用,疗效降低,长期使用激素类药物 会导致明显的副作用,且局部注射疼痛,患者的顺应性差

6、。为更好的发挥 药效,减少不良反应,延长作用时间,本实验将积雪草总苷、醋酸曲安奈 德和维生素作为药物组合,发挥协同作用,制成复方交联型凝胶膏剂, 进行处方工艺、质量标准、药效学及急毒刺激性研究,为临床提供安全有 效治疗增生性瘢痕的产品。 本实验通过凝胶膏剂基质材料筛选,最终确定部分中和聚丙烯酸钠 为凝胶膏剂基质的骨架材料,甘羟铝为交联剂,? 和? 为增粘剂,甘油为保湿剂,高岭土为填充剂。 通过单因素考察及正交实验,以初粘力、持粘力为指标,考察对凝胶 膏剂基质性能影响较大的聚丙烯酸钠、甘羟铝、?和甘油的用量水平,采用正交设计法对上述四个因素的用量进行优化, 安排四因素三水平,试验,最终优化得到:

7、甘羟铝:?: 甘油.:.:.:。优化处方制备的基质外观均匀,柔软适中,皮 肤追随性好,贴敷性好。 采用改良的扩散池,以离体小鼠皮肤为渗透膜研究%氮酮,% 丙二醇,.%薄荷醇,%氨酮%丙二醇对凝胶膏剂中积雪草总苷和醋酸 曲安奈德体外透皮的影响,最终筛选出%氮酮%丙二醇可作为复方积雪 草苷凝胶膏剂的促渗剂。 本实验通过对复方积雪草苷凝胶膏剂的含膏量、赋形性、初粘力及重 量差异进行考察,建立了积雪草苷,羟基积雪草苷和醋酸曲安奈德的含量 测定方法,结果表明自制的凝胶膏剂符合药典要求。 本实验通过离体透小鼠皮肤实验和在体透瘢痕实验,考察了凝胶膏剂 和软膏剂中醋酸曲安奈德和积雪草总苷的渗透效果,结果表明凝

8、胶膏剂中 药物的单位面积滞留量要高于软膏剂。 本实验建立兔耳增生性瘢痕模型,以康瑞保和积雪苷霜软膏作参比对 照,通过肉眼观察,含量测定,染色和染色考察各组瘢痕增生 形态学变化,结果表明复方积雪草苷能使瘢痕变软,颜色变淡,抑制瘢痕 增生,且其作用优于积雪苷霜软膏。 本实验采用自身对照的方法,考察了复方积雪草苷凝胶膏剂对日本大 耳白兔皮肤的刺激性,结果表明复方积雪草苷凝胶膏剂对皮肤无刺激性。 本实验以积雪苷霜软膏为阳性对照,考察了高中低三个剂量组的复方 积雪草苷凝胶膏剂对大鼠的急性毒性实验,结果显示复方积雪草苷凝 胶膏剂安全性高,毒性小,在常用剂量下使用是安全的。 结论:本文研制的复方积雪草苷凝胶

9、膏剂,处方工艺合理可行,可工 业化大生产;建立的制剂质量可控,符合药典要求;具有明显的抑制瘢痕 增生作用,优于市售积雪苷霜软膏;制剂安全性高,刺激性小,具有良好 的应用前景。 关键词:积雪草苷羟基积雪草苷醋酸曲安奈德凝胶膏剂增生性瘢痕仃锣: :阳 岫聊 危枷培. 培,缸.恤 锄瞎喀.勾够 玛雒, 印, , 幽,硫证唱,】:】叭吼锄 ,彘 瓯蠲; 劬廿;【时 【伍 ,雎 , 们,击伍 .; 饪. 试, 印. 伍删任 砬仃缸 . 触舶印血也舔皿.嬲, 仃, 小觚:.骶仃 ., & ,弱时 缸恤 址【,巧 卵卜.锄. 洫叩 ,锄衔,仃.,武趾 嘶咖 髓, 硒 毹 血, . .仃. ?, 任., ,吐

10、咖吐 僦龇,仃锄. 玛,时蚰啪止耐,: 枷 、 由砌 【锣砒 仃.缸.恤饨.池锄,缸 舰 证缸 枷巧?豳耐,啪嬲 .【,酏 百、析 【 仃砒 玛仃嬲 啪巧,碍,血臼奴王., 锄.,岫点眦 ,刎 恤: 碍皿】:出疵证.:.:.:.缸 印啪,妇劬 .亿伍 佃。嬲仃 、恐 咖 %,.%,%,一? %,一 ?们:够%嬲.呻 ,懿仃 嬲.【血 廿 ,冯讹粤皿龇 彘 舔, ?如 ,以龇 ,吐舔唧 吐也 幽 .廿咖加曲 衙 ,臼培 舵 锄,也 、缸 乜锄 舭 曲 锄. 叩 缸 .,咖 印? 培.曲 ,珊曲,皿幽 切. 嬲,印、 码 毹 甜嬲 锄. 枞 印锄 【砥, 嬲一确倒 .陆血 撕锄 ,纳【虹 曲,啪

11、印 恤眦嬲 疵 胁. 也恤 蕊曲时 【咄 . 洫 .:,删, 嘶 ;劬慨;尚 叭 鸡趾;印蹦 ,印 .锄 碰:商咖缩略词表复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 上? 刖 舌瘢痕是外伤、烧烫伤及外科手术后创面愈合形成的一种产物,皮肤损 伤后组织过度修复的一种病理现象,通常我们说的癜痕是指“病理性瘢 痕,病理性瘢痕包括增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。瘢痕疙瘩的本质是皮肤上 的一种持续性的具有很强增生能力的结缔组织瘤,主要表现为瘢痕向周围 正常皮肤呈蟹足样浸润,瘢痕突出于皮肤表面,高低不平,形状不规则, 质地较硬,常伴有奇痒,好发于耳朵、上颈部、胸部、上臂部及肩部等部 位,其发生可能与个体的特殊体质有关。增生性癜痕表现

12、为突出皮肤表面, 形状不规则,高低不平,颜色潮红,质地实韧,伴有灼痛及瘙痒感。增生 性瘢痕一般增生范围不超过原创沿,往往迁延数月,甚至数年以后,才会 逐渐发生退行性变。 本课题主要研究的是增生性瘢痕 ,它是 伤口愈合过程的异常增生所致,其组织学特点为:大量的成纤维细胞 增生,胶原、蛋白多糖、纤维粘连蛋白等细胞外基质过度沉积,胶原纤维 排列紊乱。然而纤维过度增生的病因未明,现代细胞生物学和分子生物学 的研究认为,成纤维细胞的大量增殖与凋亡抑制及细胞外基质中胶原合成 与降解失衡,部分细胞因子的大量产生构成了的生物学基础。增生性 瘢痕的治疗是长期以来困扰着广大医药研究者的一个重大课题,迄今为止 尚未

13、发现一种理想的治疗增生性瘢痕的方法、药物及制剂乜。 目前临床治疗增生性瘢痕的方法主要分为手术治疗和非手术治疗,非 手术治疗包括药物治疗、放射治疗、激光治疗、冷冻治疗、生物活性因子 治疗、压迫治疗、基因治疗等。激光手术治疗通常用于治疗稳定期的瘢痕, 而在瘢痕的生长期,通常以药物治疗为主,常用的药物有类固醇激素,抗 肿瘤药物,钙离子拮抗剂,抗组胺药物,细胞因子,硅制剂,金属离子, 维甲酸,中药有效成分及提取物等。其中类固醇激素中的醋酸曲安奈德 是一种公认的疗效确切的药物,常用于瘢痕的局部注射,类固醇激素能有 效抑制瘢痕胶原的合成,提高胶原酶的活性,并促使胶原分解,但是长期湖北中医药大学届硕士学位论

14、文全身用药会导致明显的副作用,而且局部注射疼痛,部分患者需在局麻下才能完成。积雪草苷和羟基积雪草苷是从伞形科植物积雪草中提取的三萜化合物,研究表明积雪草苷和羟基积雪草苷能抑制细胞和巨噬细胞释放碱性成纤维细胞生长因子,具有抑制的增殖、促进瘢痕凋亡、减少免疫细胞数目、封闭血管、疏松胶原纤维的作用。增生性瘢痕药物剂型在临床上应用的剂型主要以局部注射剂、膏剂、霜剂等传统剂型为主,归纳整理如下:片剂如维甲酸片、肤康片积雪苷片;局部注射剂如激素类药物局部注射液、一注射液、细胞因子注射液;外用膏剂、霜剂如美比欧、海普林软膏、湿润烧伤膏、肤康霜、维芎霜;贴剂如瘢痕贴、锶敷贴、中草药贴膏;埋置剂如埋置缓释药膜;

15、凝胶剂如胶体磷酸铬、硅凝胶膜;药物绷带如可调式药物绷带;溶液剂如硼酸肤疾宁溶液;膜剂如疤痕敌贴膜、辣椒素药膜、丹芎瘢痕涂膜;喷雾剂如硅酮喷雾剂;散剂如复春散二号;离子导入剂如复方秋水仙碱离子导入剂。由于口服片剂发挥全身作用,药物的疗效降低;注射剂造成局部注射疼痛,患者的顺应性差;膏剂,霜剂,溶液剂,凝胶剂,喷雾剂会因衣物摩擦造成药物损失;埋置剂和离子导入剂使用不方便。因此,选择合适的剂型对成功治疗增生性瘢痕显得尤其重要。本文将采用凝胶膏剂这种新型的透皮给药剂型,凝胶膏剂亦称巴布剂中国药典一部定义为:药材提取物、药物与适宜的亲水性基质混匀后,涂布于无纺布上制成的外用制剂。它不仅具有经皮给药制剂的

16、全部优点,还有其特有的优势强:水溶性基质与药物相容性好,载药量大,在温度、湿度变化的储藏条件下硬度适宜,不易变质,稳定性高;更易使皮肤角质层软化,透皮效果好;对皮肤有较好的相容性,透气性和耐汗性好;生产过程中不使用汽油和其它有机溶剂,避免污染;与橡胶膏剂比,一般不使用增粘剂、抗氧剂,对皮肤刺激小,无致敏作用。本文选用对增生性瘢痕有确切疗效的积雪草总苷和醋酸曲安奈德作为药物组方,发挥协同作用,并加入维生素滋润保护干燥脆薄的瘢痕皮复方积雪草苷凝胶膏剂的研究肤;同时,采用保湿好、透气好、无刺激的凝胶贴剂新剂型,不仅可促进药物在局部持续地释放,发挥联合药效,凝胶膏剂自身的粘附压力,还可进一步抑制瘢痕的

17、形成。本文所研制的复方积雪草苷凝胶膏剂有望成为一种理想的治疗增生性瘢痕的新型药物制剂。主要研究内容:本文对复方积雪草苷凝胶膏剂的处方工艺、质量标准、体外透皮及在体透瘢痕实验、急性毒性刺激性实验及药效学进行研究。创新点:本课题以积雪草总苷和醋酸曲安奈德为药物组方,制备复方积雪草苷凝胶膏剂,其相关内容均未见国内外报道,具有创新性。意义:本文研制的复方积雪草苷凝胶膏剂,保湿好、透气好、无刺激、疗效好,有望成为一种理想的治疗增生性瘢痕的新型药物制剂。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究第一章 复方积雪草苷凝胶膏剂处方工艺的研究凝胶膏剂俗称巴布剂基质主要由背衬层、基质层、覆盖层三部分组成,其中,基质层是凝胶膏剂性

18、能的关键。近年来,随着新技术的发展,凝胶膏剂基质组成成分也有了新的发展,主要采用水溶性高分子聚合物作为基质,其主要成分包括凝胶骨架成分、保湿剂、增粘剂、交联剂、交联调节剂、透皮促进剂、填充剂和水等本部分实验首先筛选基质各组成成分,采用单因素分析法,考察各个因素对基质性能的影响。采用正交设计试验,以初粘力、持粘力为指标,优化复方积雪草苷凝胶膏剂处方。最后,考察不同促渗剂对积雪草总苷和醋酸曲安奈德的促渗效果,筛选出合适的促渗剂。仪器与材料.仪器与试剂聚丙烯酸钠药用级 美国国际特品公司聚丙烯酸钠药用级 美国国际特品公司聚丙烯酸钠药用级美国路博润聚乙烯吡咯烷酮药用级 美国国际特品公司美国国际特品公司聚

19、乙烯吡咯烷酮药用级羧甲基纤维素钠?药用级 武汉德合昌食品添加剂卡波姆 药用级 美国诺誉化工亚太甘油分析纯 湖南尔康制药可乐丽贸易上海甘羟铝分析纯氯化铝分析纯 国药集团化学试剂氢氧化铝分析纯 国药集团化学试剂吐温药用级南京威尔化工苯氧乙醇分析纯 德国巴斯夫公司维生素药用级 德国巴斯夫维生素湖北中医药大学届硕士学位论文二氧化钛药用级 江苏宏远药业高岭土药用级 山西琚丰高岭土酒石酸分析纯 杭州临安金龙化工乙二胺四乙酸一钠一 分析纯 石家庄杰克化工湖南尔康制药丙二醇分析纯氮酮药用级 天门科捷制药安徽太岛薄荷药业薄荷醇药用级乙腈色谱纯 天津科密欧生物科技天津科密欧生物科技甲醇色谱纯初黏力测试仪 自制自制

20、持黏力测试仪剥离强度测试仪 济南兰光机电技术测试钢球? 济南兰光机电技术型高效液相色谱仪 美国安捷仑公司一电子分析天平 梅特勒一托利多仪器上海?智能透皮试验仪 天津药典标准仪器厂型实验室中药凝胶膏剂小型成型机 天津大学制造一低速台式离心机 上海安亭科学仪器厂上海司乐科学仪器厂?型恒温磁力搅拌器.实验动物昆明种小鼠,雌性辛,只,?,武汉大学动物实验中心提供,许可证号一鄂?方法与结果.基质处方设计.骨架材料复方积雪草苷凝胶膏荆的研究 高分子骨架材料是交联型凝胶膏剂基质中不可或缺的一种辅料,是形 成交联三维空间结构的基础。常用的骨架材料有部分中和的聚丙烯酸钠 和及聚丙烯酸钠。根据下表卜分析,粘度 高

21、,分子链长,低,交联速度慢,而刚好相反。中聚丙烯酸 从和聚丙烯酸钠的比例相等,粘度、分子链长度、交联 速度适中,因此选用作为骨架材料。 表卜 聚丙烯酸钠的型号与规格 ,一 卯锄 陷衄 .交联剂 交联剂作为交联型凝胶膏剂基质中重要的辅料,是基质形成交联三维 空间的基础,通常为高价金属化合物,如钙、铝化合物,高价金属离子与 水溶性聚合物聚丙烯酸钠形成交联网状结构,三价阳离子能够形成最有效 的三维空间结构,故选取铝化合物甘羟铝、氯化铝和氢氧化铝作为交联剂, 进行考察。配制%溶胀液三份、,分别添加.%的甘羟铝、 氯化铝和氢氧化铝水合物,测定粘度,判断各自的交联速度和交联程度。 结果见表卜。 表与交联剂

22、的交联作用 . 、 .】 组别 完全交联时间 甘羟铝 氯化铝 氢氧化铝 适中 太快 太慢湖北中医药大学届硕士学位论文由上表可知,氢氧化铝水合物与 交联太慢,容易漏膏,不利于实验的进行;氯化铝水合物与交联速度太快,不易控制反应,影响凝胶膏剂基质的涂布与混匀;而甘羟铝与的交联速度适中,便于基质的制备和涂布,缩短了整个制备周期,因此,选用甘羟铝为交联剂。.增粘剂增粘剂是凝胶膏剂基质的主要组成成分,当基质的粘性不够时,需要加入增粘剂。膜残留性是指凝胶膏剂剥离皮肤时的残留量,是凝胶膏剂基质内聚力的一个指标,粘附性包括皮肤贴敷性以及关节追随性。凝胶膏剂的膜残留量越少,粘附性越大,则越好。本实验以膜残留性和

23、粘附性为指标,考察常用的增粘剂聚乙烯吡咯烷酮,、卡波姆以及羧甲基纤维素钠?对凝胶膏剂性能的影响。结果发现,分子量大的高分子材料卡波姆制备的凝胶膏剂膜残留量少,但是粘附性不佳,基质较硬。分子量小的高分子材料如和制备的凝胶膏剂基质较柔软,粘附性好,但是膜残留量多。预实验发现单一的增粘剂并不能同时具备膜残留性少和粘附性好的优点。经综合评价,选用和?作为基质的增粘剂。.交联调节剂交联调节剂主要有柠檬酸、酒石酸和功等。由于呈弱酸性,加入交联调节剂后在酸性条件下,与甘羟铝发生交联反应,同时加入螯合剂可控制交联反应速度和程度。参考文献资料阻,选用酒石酸和一作为基质的交联调节剂。.保湿剂凝胶膏剂含水量高,使得

24、基质的水合程度高,有利于基质中药物的透皮吸收。在储存过程中,水分易丢失,基质中高含水结构改变,膏体的稳定性遭到破坏,容易变硬,出现粘附性、内聚力降低,皮肤追随性变差等。因此,凝胶膏剂基质中必须添加合适的保湿剂,防止水分损失,并且可以起到分散高分子材料的作用,有利于其充分溶胀。常用的保湿剂有甘油、丙二醇、山梨醇和聚乙二醇等。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 本实验选取甘油丙二醇和山梨醇为考察对象,筛选凝胶膏剂的保湿 剂。将各保湿剂一水按:的比例混合均匀,分别涂于玻璃板上,约 /,将载有溶液的玻璃板称重,置于的恒温箱中,放置后, 取出称重,按式卜计算保湿率四,保湿率越小,保湿性能越好。结果 见表卜. 保

25、湿率%一/一 %卜:玻璃板质量, 。:放置前质量, :放置后质量, 表卜不同保湿剂在的保湿效果 ?仃侬硼 由上表卜可知,甘油的保湿效果要优于山梨醇和丙二醇,故选择甘 油为凝胶膏剂的保湿剂。 .填充剂 凝胶膏剂中的填充剂主要作用是提高基质的赋形性和成型性,提高内 聚力。通常所用的填充剂主要有高岭土、氧化锌、碳酸钙和二氧化钛等, 高岭土不与主药发生反应,性质稳定,对皮肤无刺激性,价廉易得。二氧 化钛具有遮光的作用,综合考虑,选用二氧化钛和高岭土作为本凝胶膏剂 处方的填充剂。 .单因素考察 初粘力是指凝胶膏剂粘性表面与被粘物自然接触时,膏体与被粘物之 间的粘着力。 持粘力是指基质本身的强度,即凝胶膏

26、剂粘贴后抵抗外力作用的能湖北中医药大学届硕士学位论文 力。 皮肤追随性是将成型的凝胶膏剂贴于手腕背部,用力甩下不脱落。 .聚丙烯酸钠用量的考察 聚丙烯酸钠是凝胶膏剂基质的高分子骨架材料,与交联剂中的 铝离子发生交联固化,形成三维网状结构,其常用量为%一%,本实验 考察其含量在%一%范围内对基质性能的影响。结果见下表卜。 表对基质性能的影响 丑啪 吐屺脚 砒由上表可知,随着用量的增加,胶凝时间也随之增加,基质的 粘性增强,但其用量过多会和交联剂过度交联,使得持粘力过强,基质变 硬,难以铺展。因此,的用量应控制在%左右。 .甘羟铝用量的考察 甘羟铝作为本凝胶膏剂处方中的交联剂,可以与高分子骨架材料

27、交联 形成网状结构,本实验考察其用量在.%一.%范围内对凝胶膏剂基质性 能的影响。结果见下表卜。 表卜甘羟铝对基质性能的影响 ?融硼】加 廿嬲用量 现象 基质粘性较弱,持粘力小 基质粘性适中,成型性好 粘性较弱,持粘力小 由上表可知,甘羟铝含量不断增加,基质的粘性开始时随着交联的进 行有明显提高,当达到峰值后,随着交联剂的用量增多,会导致交联过度, 出现沉淀现象,持粘力减小。因此,甘羟铝的用量应控制在.%左右。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 .甘油用量的考察 甘油作为本凝胶膏剂基质处方的保湿剂,其常用量为%一%,本实 验考察其用量在%一%范围内对凝胶膏剂基质性能的影响。结果见下表 ?。 表卜甘油对

28、基质性能的影响 ?酉 位墒皿锄 娜踟 由上表可知,甘油的用量对凝胶膏剂基质性能产生了重要影响,随着 甘油用量的增加,基质的胶凝时间明显缩短,可能的原因是甘油含量高, 水溶性高分子分散比较均匀,容易发生交联反应,铺展性随着甘油用量增 大有一定的改善。因此,甘油的用量应控制在%左右。 . ?用量的考察 ?是本凝胶膏剂处方中的增粘剂,其常用量为%一%们,实验发 现,随着增粘剂用量的增加,初粘力降低,剥离强度显著增加,持粘力先 增加,后降低,是由于?轻微交联,持粘力升高,当其含量增加, 制备的基质较软,持粘力下降。 .高岭土用量的考察 填充剂高岭土是凝胶膏剂成型的关键,其常用量为%一 %,实验 发现,

29、高岭土的用量越大,所制得的基质越硬,黏性越小。当其用量为 %时,对其他因素影响不大,制得的基质成型性较好,所以确定高岭土的 用量为%。 .正交试验 .评价指标 .初黏力湖北中医药大学届硕士学位论文将合适的系列钢球分别滚过平放在倾斜钢板上的黏性基质面,根据供试品的黏性面能够粘住的最大钢球号,评价其初黏力的大小。以测得的钢球质量的最大值为分,钢球质量每减少一级就减分。.持黏力将凝胶膏剂贴于洁净的钢板表面,垂直放置,沿其长度方向悬挂一的砝码,记录凝胶膏剂滑移直至完全脱落的时间或在一定时间内下移的距离扪。实验中以测得脱落时间的最大值为分,其余的以与其相比的百分率计算得分。.综合得分将上述两项得分相加,

30、计算综合得分,采用正交设计软件处理数据。原则上,综合得分越高越好。.正交实验设计在查阅文献射,预实验及单因素实验的基础上,固定填充剂及增粘剂?等的含量,以初黏力和持黏力为评价指标,考察对凝胶膏剂基质性能影响较大的聚丙烯酸钠 、甘羟铝、?和甘油的用量水平,采用正交设计法 对上述四个因素的用量进行优化,安排四因素三水平,试验。见表?.表卜正交试验因素及水平表吐.正交试验结果正交试验结果见表卜,直观分析结果见表卜,方差分析结果见表?。表卜正交试验结果复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 表卜方差检验结果 ?吼由表卜可知各因素对凝胶膏剂基质的影响程度依次为聚丙烯酸钠 甘羟铝?甘油,且:,:的综合评分最高。由表卜

31、的 方差分析结果可知,聚丙烯酸钠和甘羟铝对凝胶膏剂的初黏力和持湖北中医药大学届硕士学位论文 黏力的综合评分有显著性影响.,增粘剂?对其基质的影响 次之,甘油对凝胶膏剂基质性能影响较小。综上所述,通过直观分析和方 差分析,得出最佳处方为:。:,即:甘羟铝:?:甘油.: .: .: 。.验证试验 采用正交试验得到的最优处方,制备三批样品,并对其初黏力、持黏 力和感官指标进行评价,结果见下表卜。通过验证实验说明优选出的 凝胶膏剂基质稳定、可行,所制得的凝胶膏剂黏性和内聚力好,外观光滑 均匀,基质柔软适中,皮肤追随性好。 表卜验证试验结果 出 沁 透皮吸收促进剂的选择 药物透皮吸收过程包括释放、穿透及

32、吸收进入血液循环三个阶段。释 放:药物从基质中脱离出来并扩散到皮肤或粘膜表面上。穿透:药物通过 表皮进入真皮、皮下组织,主要对局部组织起作用。吸收:药物通过皮肤 微循环或粘膜接触后通过血管或淋巴管进入体循环而产生全身的作用九。 药剂上主要采用添加透皮吸收促进剂,常用透皮吸收促进剂有氮酮,异丙 醇,冰片、薄荷等。机理:与脂质双分子层极性区作用;与双分子层的水 性区作用;与类脂疏水链形成的疏水区作用,通过增加角质层类脂流动或 溶解皮肤的类脂来增加药物的透皮吸收。特点要求:无色无臭,刺激小; 有效浓度低,对亲水亲油性药物均有促进作用。 本实验参考文献,及预实验的结果,制备含不同促渗剂的凝胶膏 剂,考

33、察%氮酮, %丙二醇,.%薄荷醇,%氮酮%丙二醇对凝胶膏复方积雪草苷凝胶膏剂的研究剂中积雪草总苷和醋酸曲安奈德体外透皮的影响。.皮肤透过液中积雪草总苷和醋酸曲安奈德含量测定方法的建立具体内容参照第三章“.项下.离体皮肤的制备具体内容参照第三章“.”项下.体外透皮实验方法具体内容参照第三章“.”项下.数据处理具体内容参照第三章“.”项下.实验结果结果见图卜,卜及表卜,卜。含%氮酮及%丙二醇组含%氮酮组矿。含.%薄荷醇组璧含%丙二醇组、不含促渗剂组注:积雪草总苷含量指积雪草苷和羟基积雪草苷含量之和。图卜 复方积雪草苷凝胶膏剂中积雪草总苷体外累计透过量一时间曲线图?唧 .含%氮酮及%丙二醇组含%氮酮

34、组石.含%丙二醇组曲十含.%薄荷醇组.不含促渗剂组湖北中医药大学届项士学位论文图复方积雪草苷凝胶膏剂中醋酸曲安奈德体外累计透过量一时间曲线图.? 圮饥眦: 罂嬲撕 唧嬲 】 岖表卜 积雪草总苷经皮渗透动力学参数结果 商锄田表卜醋酸曲安奈德经皮渗透动力学参数结果锄 甜 锄瑚匝结果分析:与不含促渗剂的凝胶膏剂相比,含有促渗剂的积雪草苷和醋酸曲安奈德的单位面积累积渗透量,渗透速率均明显增加。各组促渗剂对积雪草苷的促渗能力大小为%氮酮%丙二醇%氮酮.%薄荷醇%丙二醇。各组促渗剂对醋酸曲安奈德的促渗能力大小为%氮酮%丙二醇%氮酮%丙二醇.%薄荷醇。即当%氮酮与%丙二醇联合使用时,可促进积雪草苷和醋酸曲安

35、奈德的透皮吸收。因此,%氮酮%丙二醇可作为复方积雪草苷凝胶膏剂的促渗剂。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 .复方积雪草苷凝胶膏剂制备工艺 根据单因素考察及正交实验结果确定凝胶膏剂基质的优化处方为:聚 丙烯酸钠:甘羟铝: ?:甘油.:.:.:。按处方 量称取聚丙烯酸钠,吐温,?,甘氨羟铝,高岭土,二氧化钛分 散于甘油中,加入适量苯氧乙醇,混匀,作为油相备用;另取处方量的积 雪草苷,?,酒石酸,功一,加适量纯化水,磁力搅拌至澄清 透明液体,加入适量苯氧乙醇,混匀,作为水相备用。称取处方量的醋酸 曲安萘德,维生素于适量乙醇中,混匀后加入至上述油相。油相和水相 置于减压真空干燥器中反复抽真空以除去气泡,再将

36、水相缓慢加至油相 中,迅速搅匀,上机均匀涂布于无纺布上,同时盖膜,剪裁为 大小,铝箔袋密封包装,贴标签即得成品。成品中每 药膏含积雪草 苷原料药.相当于积雪草总苷.和醋酸曲安奈德。具体流程 图见下图。 ,吐温,一, 分散 甘氨羟铝,高岭土,二氧 化钛,甘油 混合均匀 油相 醋酸曲安奈德,维生素 溶解 ,乙醇 积雪草总苷,., 溶解 酒石酸,矾.,苯 水相 氧乙醇,纯化水 图卜制备工艺示意图 一湖北中医药大学届硕士学位论文讨论本处方基质中含有二氧化钛,其可作为填充剂,同时也有抗紫外线吸收的作用,具有良好的自清洁性耐腐蚀性和抗菌效果,用于人的皮肤安全可靠,性能十分稳定,二氧化钛应用于治疗增生性瘢痕

37、的凝胶膏剂基质中,对皮肤可具有一定的保护作用。目前,常用的促渗剂有数十种,本文在预实验的结果的基础上,重点考察了氮酮,丙二醇及薄荷醇对透皮吸收的影响。在预实验中曾分别考察了不同浓度的氮酮,丙二醇及薄荷醇对透皮吸收和基质性能的影响。结果发现应用单一促渗剂时,%氮酮与%氮酮的促渗能力无显著差异,%氮酮的促渗能力最强,但%氮酮组凝胶膏剂的表面有渗油现象,粘性小,防粘层可直接撕开,影响成品的外观性状。不同浓度丙二醇的促渗作用并不随着其浓度增加而增加,丙二醇的浓度为%时较好。由于增生性瘢痕皮肤角质细胞脆性高,表面有许多裂纹,角质层的屏障功能减弱 ,且薄荷醇清?具有刺激性,因此,薄荷醇的浓度为.%较合适。

38、应用二元促渗剂时,%氮酮%丙二醇组的促渗能力最强。本文考察了不同促渗剂对复方积雪草苷凝胶膏剂中两个主要成分积雪草苷和醋酸曲安奈德的影响,结果表明采用%氮酮%丙二醇作为促渗剂,可显著提高两药的透皮效果;通过方程拟合比较,含促渗剂组与不含促渗剂组凝胶膏剂中积雪草苷符合方程释放规律;复方积雪草苷凝胶膏剂中醋酸曲安奈德符合零级缓释药规律,起到稳定释放效果。皮肤角质层是许多药物透皮吸收的一道生理屏障,尤其是水溶性药物较难透过皮肤,在角质层中的扩散是其主要的限速过程。应用透皮吸收促进剂可降低药物通过皮肤阻力,加速药物穿透皮肤。氮酮进入角质层后可扩大角质层细胞间隙,提高通过细胞间隙水溶性药物的透过量,同时,

39、可对原有的脂质进行重排,从而增加药物通过角质层的渗透性。丙二醇可增加角质层的水合作用,提高类脂的流动性,促进药物的吸收,但是丙二醇与氮酮联合应用时促渗效果明显强于丙二醇单用的效果。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究 凝胶膏剂的制备主要有以下三种方法旺引:水性分散法,它以水作 为溶媒,避免了使用有机溶剂,有利于环保,但是由于许多适于透皮给药 的药物难溶于水,所以此法的应用受到了限制。有机溶剂分散法,此 法存在有机溶剂使用的危险和不利于环保,但是其操作简便,易于实验室 和工业生产,所以此法常用于凝胶膏剂的制备。热熔工艺法,在 将药物和辅料共同熔融铺胶,缺点是增塑剂的用量太大,对于热敏 感的药物和辅料不适用

40、幢。 小结 本实验通过凝胶膏剂基质材料筛选,最终确定部分中和聚丙烯酸钠 为凝胶膏剂基质的骨架材料,甘羟铝为交联剂,?和? 为增粘剂,甘油为保湿剂,高岭土为填充剂。 本实验通过单因素实验,考察 、甘羟铝、甘油、?和高岭 土对凝胶膏剂基质性能的影响。单因素实验为正交实验设计提供了依据。 本实验在基质筛选和单因素考察的基础上,采用正交实验优化处方, 以初粘力、持粘力为指标,考察对凝胶膏剂基质性能影响较大的聚丙烯酸 钠、甘羟铝、?和甘油的用量水平,采用 正交设计法对上述四个因素的用量进行优化,安排四因素三水平,试 验,最终优化得到:甘羟铝: ?:甘油.:.:.:。 优化处方制备的基质外观均匀,柔软适中

41、,皮肤追随性好,贴敷性好。 本实验采用改良的扩散池研究%氮酮, %丙二醇,.%薄荷 醇,%氮酮%丙二醇对凝胶膏剂中积雪草总苷和醋酸曲安奈德体外透皮 的影响,最终筛选出%氮酮%丙二醇可作为复方积雪草苷凝胶膏剂的促 渗剂。复方积雪草苷凝胶膏剂的研究第二章 复方积雪草苷凝胶膏剂质量标准的建立仪器与材料.药品与试剂复方积雪草苷凝胶膏剂 自制积雪草总苷原料药 广西昌洲天然药业,含量:%醋酸曲安萘德原料 天津天药药业股份,含量:.%积雪草苷对照品 中国药品生物制品检定所,批号:?羟基积雪草苷对照品 广西昌洲天然药业一环糊精 安徽山河药业甲醇 天津科密欧生物科技,色谱纯乙腈 天津科密欧生物科技,色谱纯纯化水

42、 自制.仪器美国安捷仑公司 岗状。匕。厶型高效液相色谱仪一电子分析天平 梅特勒一托利多上海一超声波药品处理机 济宁中冠超声波有限责任公司自制初黏力测定仪方法与结果按照处方比例,连续制备三批含药凝胶膏剂,进行质量考察。.性状本品为淡黄色膏体涂布于无纺布上的凝胶贴剂。湖北中医药大学 届硕士学位论文 .鉴别 参照“.”含量测定项下的方法,以法鉴别积雪草苷,羟基积 雪草苷和醋酸曲安奈德。结果见图图。结果显示,积雪草苷对照品 在左右出峰,羟基积雪草苷对照品在和左右出峰,空 白基质辅料对积雪草苷和羟基积雪草苷的测定无干扰,由图可知,供试 品图中在,左右均有出峰。本实验所用的积雪草 总苷中积雪草苷的含量为%

43、,羟基积雪草苷的含量为%。醋酸曲安奈 德在 左右出峰,空白基质对其含量测定无干扰,供试品溶液中 左右也有出峰。 图?积雪草苷对照品为积雪草苷 图?羟基积雪草苷对照品和是同分异构体,齐敦果烷型三萜乌苏烷型 三萜复方积雪草苷凝胶膏剂的研究图?积雪草总苷原料药 图?空白凝胶膏剂图?供试品凝胶膏剂 图?醋酸曲安奈德对照品为醋酸曲安奈德对照品图?空白凝胶膏剂 图?供试品凝胶膏剂.检查.含膏量的测定乜叫按照中国药典版一部附录 ,取三批凝胶膏剂供试品各片,除去盖衬,精密称定,放置烧杯中,加适量水,加热煮沸至布与膏体分离后,将布取出,用水洗涤至布面无残留膏体,晾干,在烘箱中干燥,移置干燥器中,冷却,精密称定,

44、减失重量即为膏重,按标示面积换算成每 的含膏量为 .。含膏量湖北中医药大学届硕士学位论文 结果如下表?所示。 表:复方积雪草苷凝胶膏剂含膏量 蹦砭笋 舡撕 卸锄 .赋形性试验乜们 按照中国药典 版一部附录 ,取三批凝胶膏剂供试品各片, 置、相对湿度%的恒温、恒湿箱中,取出,用夹子将供试 品固定在一平整钢板上,钢板与水平面的斜角为。,放置,观察膏 面有无流淌现象。结果三批供试品赋形性良好,膏面无流淌现象。 .初黏力测定乜 按照中国药典版一部附录贴膏剂黏附力测定第一法,取 三批凝胶膏剂供试品各片,除去防粘层,置于与水平面成 。的不锈钢 板上,膏面向上,斜面上部 和下部 用涤纶薄膜覆盖,中间留出 膏

45、面,将不同规格的钢球自斜面顶端自由滚下,记录能在测试段粘住 的最大钢球质量。三批供试品凝胶膏剂均可粘住号钢球,钢球质量为 .。.复方积雪草苷凝胶膏剂中药物的含量测定 .色谱条件 .积雪草苷和羟基积雪草苷乜 色谱柱: 。柱衄.衄,;流动相:乙腈: 衄/ 一环糊精:;检测波长:;流速:./;进 样量: 肛;柱温:。 .醋酸曲安奈德 色谱柱:订 。柱衄.衄,岫;流动相:甲醇: 水:;检测波长:;流速:。;进样量:; 柱温:。复方积雪革苷凝胶膏剂的研究.溶液的制备.积雪草苷标准储备液的制备取积雪草苷对照品适量,精密称定,加甲醇溶解,定容,摇匀,制成/的标准储备液,备用。.羟基积雪草苷标准储备液的制备取羟基积雪草苷对照品适量,精密称定,加甲醇溶解,定容,摇匀,制成/的标准储备液,备用。.醋酸曲安奈德标准储备液的制备取醋酸曲安奈德原料药,精密称定,置容量瓶中,加甲醇溶解,定容,摇匀,即得/的标准储备液,备用。.供试品溶液的制备钉任取凝胶膏剂供试品片,除去离型膜,精密称定重量,再剪成细条状,置三角烧瓶中,加甲醇,用薄膜密封瓶口,置水浴中磁力搅拌约,次日超声,将提取液移至容量瓶中;残留物中再加入甲醇 ,置水浴中磁力搅拌后,再超声,提取液移