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文档简介
1、实验室工作流程(卫)振荡 离心:纺织厂实验室工作流程实验室工作流程(卫)振荡 离心 一、挑选需处理标本 (1)、血性标本制片固定好后,经盐酸酒精浸泡脱掉红细胞,再重复固定。 二、制片步骤流程 实验室制片流程图 待检标本 标本震荡 制片加样 准备离心玻片 清洁检验台 玻片固定 离心制片 制片步骤说明及规范 准备工作:实验室技术人员进入实验室制片前穿好工作服,戴口罩、手套,从待做标本处取标本,放在检验台上。 标本振荡:将标本小瓶摆放在振荡仪标本孔内(注意摆放标本要掌握左右、上下平衡原则),接通振荡仪电源线,将振荡仪时间设置20分钟,打开开关,缓慢调节振荡仪振幅频率,由小到大至5000转分。 准备离
2、心玻片:振荡标本同时,准备好离心玻片。将玻片膜面向上插入专用卡子底座内,放好直筒漏斗,用配套的固定环卡紧玻片后,摆放在检验台上备用。 制片加样:将标本小瓶与准备好的离心玻片一一对应放置检验台,并在玻片上标记该标本条码号;(有清亮标本时应相应多加入标本液),在使加样枪吸取标本时注意缓慢吸取,避免大粘液团吸入加样枪内;直筒漏斗内加液量要两两相等,在加样量不等的情况下,可以用平衡液配平;加入直筒漏斗的标本要用加样枪沿筒壁反复缓慢吸加数次,使标本液与平衡液混匀。 离心制片:接通离心制片机电源,打开开关后,抬起离心制片机盖子;离心制片机一次可以制作6张玻片,将加好标本的离心卡子放入离心机内吊篮盒中,掌握
3、对应平衡原则,要求离心卡子对应放置离心机吊篮盒中,使相对应的离心标本量相等;轻轻扣好盖子后,设置离心时间10分钟、速度20_0转,按下“START”开始离心。 1、 玻片固定:将离心好的玻片套卡取出,把直筒漏斗内上清液倒入废液瓶中,将直筒漏斗倒置在纱布垫上空干液体,打开固定环,将直筒漏斗置于消毒液中,缓慢取出玻片,放置检验台上待细胞潮干后分别插入装有95%乙醇固定缸中的染色架内。在95%乙醇中固定15分钟后即可染色,固定好的玻片必须在48小时内进行染色,95%的乙醇若浓度低于90%应及时更换。 2、 清洁检验台:玻片固定同时做好检验台清洁工作,将使用过标本收好保存,清点离心卡子(底座及固定环)
4、数量并收好备用,物品摆放整齐,用0.1%84消毒液擦拭检验台面。 三、染色步骤流程 实验室染色流程图 固定好玻片 清水漂洗 细胞核着色 清水漂洗 橘黄染色 乙醇还原 碳酸锂反蓝 清水漂洗 三步无水酒精 三步95%酒精 EA50染色 两步乙醇 封片 两步二甲苯透明 染色步骤说明及规范: 实验室技术人员应掌握各种染液的不稳定性,以便调整染色时间,并熟悉各种染液在染色后在显微镜下呈现的颜色。 1 染色目的:使细胞核结构清晰显示,各种染色反映的细胞能恰当地显示胞浆分色,使细胞透明度提高,结构清晰。 2 染色步骤:95%乙醇固定- 清水漂洗(浸提)- 苏木素2分钟到三分钟(细胞核着色)- -清水漂洗(浸
5、提)- 碳酸锂溶液反蓝 - 清水漂洗(浸提)- 95% 乙醇返回到原状态 - 橘黄染液(角化细胞着色)- 两步95%乙醇 - EA50( 胞浆着色)- 三步95%乙醇- 三步100%无水乙醇(脱水)- 两步二甲苯(透明)- 封片 四、封片 实验室封片流程 晾干 封片 滴树脂胶 已染色后玻片 阅片 封片步骤说明及规范: 1.将染色好的玻片自二甲苯中充分透明后,按照制片后放入染色架的顺序依次取出封片,将树脂胶少量的滴在离心细胞区域的中下三分之处后将玻片自下而上缓慢的压制在细胞上。 2.注意树脂胶过多的出现在玻片的周围会影响美观;玻片于盖玻片之间不能够出现气泡,防止阅片人员在阅片时因为气泡而使其在镜下变得模糊而不能做出相应的诊断;另外在各种染色,制片过程中,需要注意勿令玻片干燥,并且须特别注意如加树脂胶的时候,
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