[课件资料]止、凝血功能检查改

1、 第三节血栓与止血检测一、止血机理 (Hemostatic mechanism)二、凝血机理 (Coagulation mechanism)三、纤维蛋白溶解机理 (Fibrinogenolysis)四、出血性疾病实验诊断、临床意义. （Laboratory diagnosis and Clinical significance） 止血止血血管壁损伤血管壁损伤血小板粘附、聚集 血小板血栓 (白色血栓)封住伤口止血完成神经反射体液调节小血管收缩 血流缓慢释放ADP激活凝血 系统 血凝块 (红色血栓) 止血的三个基本条件： （1）血管结构与功能正常 收缩，释放与激活血小板、凝血系统 （2）血小板功能

2、与量的正常 凝集与释放vWF, ADP, 5-HT, AGT, PF4, 等 （3）凝血系统的正常 14个因子，(HMW Kininogen, kallikrein K)凝血酶原凝血酶凝血酶纤维蛋白原纤维蛋白单体可溶性纤维蛋白聚合体可不性纤维蛋白聚合体aCa2Ca2A肽 B肽血液凝固机理示意图内源性凝血途径 12 k pk, 12 11 9 10外源性凝血途径 3, 2 5 7 9 10胶原等带负电荷表面组织损伤释放组织因子（因子）激肽释放酶蛋白质部分 磷脂部分aa-Ca2+-凝血酶aaaa- Ca2+ -aCa2Ca2+蛋白质部分磷脂部分a血小板PF3PF3磷脂X凝血酶原纤维蛋白原凝血酶A肽

3、、B肽纤维蛋白单体可溶性纤维蛋白聚合体Ca2+不溶性纤维蛋白聚合体 作用 转变 复合物a 凝 血 机 理Ca2+ 凝血是一系列酶促反应，可归纳为：1、一种结局 2、二条途径 3、三项要素 4、四组（14个凝血）因子 凝血酶：Fg FM, PT, 5 7 8 9, Plasmin抗凝血系统细胞抗凝体液抗凝PC APC / 5a, 13a TM PS 其他抗凝蛋白 纤溶酶 纤溶酶 纤溶酶纤溶激活酶 UK, SK, Thrombin纤溶酶原纤溶酶 Plasmin 纤维蛋白 纤维蛋白降解产物（FDP）多 种肽链碎片，如X、Y、D，A、B、C，E、D-dimer 纤维蛋白原 片段X 片段Y 片段E纤维蛋

4、白 小分子多肽 片段D 片段D A、B、C纤溶机理1、抗凝血酶作用2、和纤维蛋白单体结合，从而抑制了纤维蛋白的聚合3、抑制血小板的粘附和聚集功能4、抑制a 活化因子作用。 出血、血栓性疾病的检查出血、血栓性疾病的检查1.毛细血管脆性试验（capillary resistance test,CRT)2.出血时间测定（bleeding time,BT)3.血浆内皮素-1(ET-1)测定一、血管壁结构与功能的检测 （一）毛细血管抵抗力试验（CRT）又称毛细血管抵抗力试验或束臂试验 原理原理 给毛细血管一定的压力，观察其完整性给毛细血管一定的压力，观察其完整性及脆性。及脆性。 参考值参考值5cm5cm

5、直径圆圈内新出血点：男性小于直径圆圈内新出血点：男性小于5 5个；女性及儿童小于个；女性及儿童小于1010个。个。 临床意义临床意义 新出血点数超过正常为阳性：新出血点数超过正常为阳性：1 1、血管壁结构或（和）功能异常，如过敏性、血管壁结构或（和）功能异常，如过敏性紫癜；紫癜；2 2、血小板量和（或）质异常，如原发或继发、血小板量和（或）质异常，如原发或继发性血小板减少症；性血小板减少症；3 3、血管性血友病等。、血管性血友病等。 （二）出血时间（bleeding time BT）测定。原理将毛细血管刺破，血液自然流出到自然停止所需的时间。参考值测定器法：6.92.1min，超过9min为异

6、常。临床意义 BT延长见于： 1、血小板明显减少，如血小板减少性紫癜； 2、血小板功能异常； 3、血管异常，如遗传性出血性毛细血管扩张症； 4、药物，如服用乙酰水杨酸等。 BT缩短见于某些严重的血栓前状态和血栓形成。 （三）血浆内皮素（三）血浆内皮素-1(ET-1)测定测定参考值参考值ELISA5ng/L内皮素内皮素-1(ET-1)是血栓形成的易患因素之是血栓形成的易患因素之一一二 血小板检测 （一） 血小板计数(PC/ PLT)参考值（100-300）109/L临床意义血小板减少：PC100109/L。 生成障碍，如再障； 破坏或消耗增多，如ITP、SLE、DIC 分布异常，如肝硬化致脾肿大

7、等。血小板增多：PC400109/L。 原发性增多，如原发性血小板增多症； 反应性增多，如急性感染等。 （二）血块凝缩试验（clot retraction test,CRT） 原理：血液凝固 血小板收缩酶 血块收缩、血清析出 血块凝缩影响因素： ) 血小板量和质。 ) 纤维蛋白原浓度。 3）XIII因子的水平。 4）红血球的比积。 （二）血块凝缩试验（clot retraction test,CRT） 方法：静脉采用1ml，置于内径8mm，干试管内，加塞 静止37水浴箱中, 于1/2h、1h及24h分别观察血 块凝 缩情况。 结果判断：正常于1/21h开始，24h凝缩完全。 （1）完全凝缩：血

8、块与管壁分离，血清析出1/21/3。 （2）部分凝缩：血块大部分凝缩，血清析出1/3。 （3）凝缩不良：血块略有凝缩，少量血清析出。 （4）不凝缩：血块维持原样，无血清析出。（三）血小板相关免疫球蛋白测定（PAIg） 参考值PAIgG为078.8ng/107血小板PAIgM为07.0ng/107血小板；PAIgA为02.0ng/107血小板。临床意义 增高：见于ITP、输血后紫癜、SLE等。 观察病情：治疗有效，PAIg水平下降；复发则升高。 （四）血小板粘附实验（PAdT） 参考值65.2%8.61%临床意义 增高：血栓前状态和血栓性疾病。降低:血管性血友病，血小板无力症，MDS、SLE等（

9、五）血小板聚集实验（PAgT） 参考值临床意义 增高：血栓前状态和血栓性疾病。 降低:血管性血友病，血小板无力症，MDS、ITP等（六）血浆B血小板球蛋白（B-TG）和血小板第四因子（ PF4 ）测定 参考值 ELISA B-TG 16.49.8ug/L PF4 3.22.3ug/L临床意义 增高：血栓前状态和血栓性疾病。 降低:先天性或获得性储存池病（血小板a颗粒缺陷症)三、凝血因子检测三、凝血因子检测 (一)血浆凝血酶原时间测定(PT) 血浆凝血酶原时间测定血浆凝血酶原时间测定(PPT)通常称为凝通常称为凝血酶原时间血酶原时间(PT)测定，是在血浆中加入测定，是在血浆中加入组织凝血活酶组织

10、凝血活酶(兔脑粉兔脑粉)和钙离子后，测定和钙离子后，测定凝血所需时间，为凝血酶原时间。血浆凝血所需时间，为凝血酶原时间。血浆中纤维蛋白原、中纤维蛋白原、因子含量减因子含量减少时，则凝血酶原时间延长。此试验是少时，则凝血酶原时间延长。此试验是检测检测外源性凝血系统有无障碍的筛选试外源性凝血系统有无障碍的筛选试验。验。 【参考值】凝血酶原时间【参考值】凝血酶原时间1113s。【临床意义】【临床意义】1.凝血酶原时间凝血酶原时间延长延长先天性凝血因子异常，见于凝血因子先天性凝血因子异常，见于凝血因子、之一或两种以上有质量异常之一或两种以上有质量异常时；时；后天性凝血因子异常，如严重肝病、维生后天性凝

11、血因子异常，如严重肝病、维生素素K缺乏缺乏(慢性肠道病、阻塞性黄疸等慢性肠道病、阻塞性黄疸等)、DIC后期、使用抗凝药物过多等。后期、使用抗凝药物过多等。【临床意义】【临床意义】2.凝血酶原时间凝血酶原时间缩短缩短见于血液高凝状态、多见于血液高凝状态、多发性骨髓瘤、心肌梗死等。发性骨髓瘤、心肌梗死等。3.用于抗凝疗法的监控用于抗凝疗法的监控INR为首选指标，国为首选指标，国人以人以2.03.0为宜。为宜。 （二）活化部分凝血活酶时间测定（二）活化部分凝血活酶时间测定 （APTTAPTT） 原理原理 受检血浆中加入受检血浆中加入APTTAPTT试剂和试剂和CaCa2 2后，观察凝固时间。后，观察

12、凝固时间。 参考值参考值32324343秒，较正常对照值延长秒，较正常对照值延长1010秒以上为异常。秒以上为异常。 临床意义临床意义 1. 1. 延长延长见于：见于：因子因子、减少，如减少，如A A、B B型血友病；型血友病；凝血酶原减少，如严重肝病；凝血酶原减少，如严重肝病；纤维蛋白原减少，如纤维蛋白原缺乏症；纤维蛋白原减少，如纤维蛋白原缺乏症；应用抗凝药物；应用抗凝药物；纤溶亢进；纤溶亢进；循环抗凝物增加等。循环抗凝物增加等。2. 2. 缩短缩短：见于高凝状态。：见于高凝状态。 3. APTTAPTT监测肝素治疗的首选指标监测肝素治疗的首选指标（四）血浆纤维蛋白原测定 原理：血浆纤维蛋白

13、原与氯化钙作用生成 纤维蛋白。 方法：仪器法 (定氮法) 参考值：2- 4g/L 增高多发性骨髓瘤、心肌梗死等减低DIC严重肝病等四、抗凝物质检测 (一一)血浆抗凝血酶活性测定（血浆抗凝血酶活性测定（AT:A)增高增高 可导致出血可导致出血降低降低 可导致血栓形成可导致血栓形成（二）血浆肝素定量测定（二）血浆肝素定量测定 0.20.5IU/ml 治疗有效且临床较少出血治疗有效且临床较少出血五 纤溶活性检查试验. 3P试验 (plasma protamine paracoagulation test) . 血浆纤维蛋白降解产物测定 (fibrin degradation products, FD

14、P). D-二聚体测定 (D-dimer, DD) 1、血浆鱼精蛋白副凝试验 原原 理理 纤溶过程中纤溶过程中FDP FDP 鱼精蛋白鱼精蛋白 十十 游离游离 纤维蛋白单体纤维蛋白单体 凝集凝集 参考值参考值 正常人阴性正常人阴性（plasma protamine paracoagulation test PPPT, 3P试验） 意意 义义 阳性： 1提示血中FDP增多，见于DIC/纤溶亢进 2溶栓治疗后 3假阳性：大出血（创伤、手术、咯 血、呕血），恶性肿瘤、人工流产等阴性： 1正常人 2原发性纤溶 3DIC晚期 FDP（ Fibrinogen and Fibrin Degradation

15、Products )是纤维蛋白原和纤维蛋白降解产物的总称。增高表明体内纤溶亢进，但不能鉴别原发和继发纤溶。 Latex method 参考值: 5 g/ml .FDP的测定 D-Dimer是交联纤维蛋白降解特征性产物，是继发性纤溶的标志。增高是诊断DIC的辅助条件之一。但在深部静脉血栓、肺栓塞、动脉瘤、急性早幼粒细胞白血病时也增高。 Latex method 参考值: 0.5 g/ml.D-Dimer的测定 六弥散性血管内凝血（Disseminated Intravascular Coagulation) 许多病因导致血液凝固功能增强，在微血管内发生弥漫性血小板血栓和纤维蛋白的沉着，消耗了大量血小板和凝血因子并继发纤溶功能亢进，导致临床出现