不同产地当归中阿魏酸藁本内酯及总多糖含量比较

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯及总多糖含量比较（作者：单位：邮编：）【摘要】目的 通过测定不同产地当归中阿魏酸、藁本内酯和总多糖的含量，探讨产地对当归药材质量的影响及当归道地性的科 学依据。方法 采用高效液相色谱法和比色法，测定甘肃、云南、四川、 陕西等地所产当归中阿魏酸、藁本内酯和总多糖的含量。结果在4个产地的当归中，阿魏酸、藁本内酯和总多糖的含量均以甘肃产当归 为最高。结论 甘肃产当归质量较好，甘肃当归的道地性是有科学依据 的。【关键词】当归；阿魏酸；藁本内酯；总多糖；高效液相色谱法Abstract : Objective To study the af

2、fection of cultivatingregions to the quality of Radix Angelicae Sinensis and thescientificbasis of authenticity of Radix Angelicae Sinensis.Methods The amounts of ferulic acid, ligustilide and total polysaccharide in Radix Angelicae Sinensis cultivated in Gansu, Yunnan, Sichua n, Shanxi provin ces w

3、ere determ ined by HPLC andUV spectrophotometry. Results Radix AngelicaeSinensis cultivated in Gansuprovince possesses the highest contents of ferulic acid, ligustilide and total polysaccharide among that from four regions. Conclusion The quality of Radix AngelicaeSinensis cultivatedin Gansu provinc

4、e is better than that fromother regi ons. Itis reas on able to regard Radix An gelicaeSinen sis cultivated in Gansu province as authe ntic medical herbs.Key words： Radix Angelicae Sinensis ；erulic acid ; ligustilide ; total polysaccharide ; HPLC当归为伞形科植物当归 An gelica si nen sis（Oliv.） Diels的干燥根，具有补血活血

5、、调经润肠功效1,主产于甘肃，云南、陕西、四川 等地亦有栽培。据考证，中国历代一直以现今甘肃岷山山脉所产当归 为道地品种，早在公元六世纪初，就已作为贡品2。为探讨产地对当 归药材质量的影响及当归道地性的科学依据，我们对产于甘肃、云南、 四川、陕西等地当归中阿魏酸、藁本内酯及总多糖含量采用高效液相 色谱法和比色法测定。1仪器与材料LC-10Avp高效液相色谱仪（日本岛津）,包括LC-10Avp泵、 DAD SPD-M10Av紫外-可见光检测器,C-R6A数据处理机；722G型分 光光度计（上海光学仪器厂）。阿魏酸对照品（美国Sigma； StLouis,MO）;藁本内酯对照品由总后卫生部药检所提

6、供；右旋糖苷(dextran,分子量 10000-20000,美国 Sigma; St.Louis, MO。当归采 自甘肃岷县、宕昌，云南丽江、中甸，四川宝兴、南平，陕西龙县、平 利。经过笔者鉴定为当归 An gelica si nen sis (Oliv.)Diels 。乙腈 为色谱纯,其它试剂均为分析纯。2方法与结果2.1色谱条件Nova-Pak C18色谱柱(150 mm X 3.9 mm,4 卩 m),预柱 Nova-Pak C18(20 mnX 3.9 mm,4卩m)。流动相为乙腈-水(磷酸调至pH4.0), 梯度洗脱,010 min,5%35临腈；1030 min,35%70临腈；

7、30 40 min,70%5%乙青。检测波长为284 nm,体积流量为1 mL/min,柱 温为室温，进样量20卩L。在上述色谱条件下，阿魏酸、藁本内酯与 样品中其它组分色谱峰可达基线分离，相邻色谱峰分离度大于1.5。色谱图见图1。2.2对照品溶液的制备及对照品纯度检查精密称取阿魏酸、藁本内酯对照品(五氧化二磷减压干燥36 h)适量，加甲醇制成1 mg/mL阿魏酸和2 mg/mL藁本内酯的混合对照 品溶液,即得。将混合对照品溶液稀释10倍,备用。吸取混合对照品 稀释溶液和空白试剂各 20卩L,注入液相色谱仪，记录色谱图。除去 甲醇溶剂峰后，按峰面积归一化法计算各对照品纯度,2种对照品质量 分数

8、均大于99%另精密称取右旋糖苷(105 C干燥至恒重)0.1 g,定 容至100 mL量瓶中，得0.1%右旋糖苷储备液。2.3供试品溶液的制备取当归药粉约0.5 g,精密称定,置50 mL离心管中，加甲醇20 mL,超声提取（功率120 W频率40 kHz）40 min,离心后收集上清液， 重复提取1次,合并两次提取液，回收甲醇至干，精密加甲醇2 mL溶解, 供阿魏酸、藁本内酯测定。另精密称当归药粉5.0 g,加水40 mL，加热，沸腾后保持40 min。煎煮2次,过滤,滤液离心,合并2次上清液,冰冻干燥,即得。再 精密称取该提取物0.5 g,加水2 mL溶解，再加95%醇使其浓度达 85%静

9、置24 h,抽滤。滤饼用70%S醇洗涤5次,然后溶解在60 C 水中,2 000 r/min 离心5 min,收集上清液，加水定容至100 mL容量 瓶中,供测定多糖用。2.4线性关系考察精密吸取阿魏酸、藁本内酯混合对照品稀释液2、4、& 16、32、64卩L,依次注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件测定峰面积。 以峰面积积分值为纵坐标，各对照品含量（卩g）为横坐标,绘制标准曲线。另精密吸取右旋糖苷储备液0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL分别置100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，摇匀，得各 标准溶液系列。精密吸取各标准溶液 2.50 mL于10 mL具塞

10、试管中， 加入5.00 mL0.2%蒽酮-浓硫酸显色剂，摇匀,置沸水浴中加热10 min, 取出,放至室温,于625 nm波长处进行比色测定。另取2.5 mL蒸馏水 同样操作，作空白对照。各对照品的回归方程、相关系数及线性范围(mg/mL)如下：阿魏酸：Y= 2X 10-7X + 0.036 2,0.999 4,0.1 1.6 ; 藁本内酯：Y= 4X 10-7X 0.013 2,0.999 6,0.812.8 ;右旋糖苷：Y = 6.01 X 10-3X + 4.71 X 10-3,0.999 1,0.010.11。2.5精密度试验分别精密吸取阿魏酸、藁本内酯对照品稀释液20卩L,重复进样6

11、次,测定峰面积。另取当归总多糖测定样品液 2.50 mL,按照样 品多糖含量测定方法测定吸收值，重复测定5次。结果阿魏酸、藁本 内酯和多糖的精密度 RSD分别为1.36% 1.34%、2.21%。2.6重现性试验取当归样品0.5 g,平行制备供试品溶液5份，进样,测定阿 魏酸、藁本内酯峰面积积分值。另取当归样品 5.0 g,平行制备供测 定多糖用的供试品溶液5份，按“样品含量测定”项下多糖测定方法 操作，测定多糖含量。各对照品重现性 RSD为：阿魏酸0.77%,藁本内 酯 1.20%,多糖 2.81%。2.7回收率测定精密称取2批已知含量的当归样品各5份,分别供测定多糖及阿魏酸、藁本内酯的回收

12、率。其中供测多糖的样品每份5.0 g,测阿魏酸、藁本内酯的样品每份 0.5 g。2批样品分别加入右旋糖苷对 照品5.0 mg,阿魏酸、藁本内酯对照品各1.0 mg,制备供试品溶液，按“样品含量测定”项下各对照品测定法操作，测定各对照品含量，计算回收率。各对照品平均回收率（）分别为：右旋糖苷97.12,阿魏 酸 97.83,藁本内酯 97.82。其 RSD分别为 2.39%、1.23% 2.13%。2.8稳定性试验取各供试品溶液，分别于配制后0.5、1、1.5、2、3、4、6、& 10、12 h,按“样品含量测定”项下各对照品含量测定法操作 ，测 定各对照品含量。阿魏酸、藁本内酯含量在 12 h

13、内基本稳定，多糖在2 h内稳定，其中阿魏酸、藁本内酯多糖 RSD分别为0.82% 0.50%、2.12%。2.9样品测定阿魏酸、藁本内酯的测定：分别精密吸取对照品和供试品溶 液,注入液相色谱仪，测定峰面积积分值，按外标法计算，即得。多糖测 定：精密量取供试品溶液2.50 mL,按多糖标准曲线项下做比色测定， 计算样品中多糖含量。含量测定结果见表1。表1不同产地当归中阿 魏酸、藁本内酯及总多糖含量测定结果（略）注：与云南、四川、陕西 产当归相比,*P0.013讨论当归中的有效成分主要是阿魏酸、藁本内酯及多糖类。其中阿魏酸具有抑制血小板凝集的作用，藁本内酯能抑制子宫平滑肌，多 糖类可促进造血功能。

14、这些成分通常作为当归质量优劣的评价指标 3-4。因此,本实验通过测定这些成分的含量来评价不同产地当归的 品质。结果表明：在甘肃、云南、四川、陕西4个省区所产的当归中， 甘肃产当归中阿魏酸、藁本内酯和总多糖含量明显高于其它产区，具有显著性差异。因此,甘肃当归质量的确要优于其它产区的当归，其道 地性有一定的科学依据。【参考文献】1 国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）S.北京： 化学工业出版社，2005.71.2 胡世林.中国道地药材M.哈尔滨：黑龙江科技出版社,1989.461.3 Liu CX, Xiao PG, Li DP.Modern Research andApplication of Chinese Medicin