《液相色谱基础知识》ppt课件

1、石油石油醚醚碳酸碳酸钙颗钙颗粒粒色素色素色色谱谱组组分分正相正相HPLCHPLC色色谱谱柱柱Silica gelSiSi-Si-CH2CH2CH2CN-Si-CH2CH2CH2NH2-Si-CH2CH2CH2OCH(OH)-CH2(OH)Modified Si反反 相相 HPLC HPLC 色色 谱谱 柱柱-Si-C18H37Si 保管保管时间时间和疏水性和疏水性OHOHC18 (ODS) StrongWeak固固 定定 相相 作作 用用C18 (ODS) StrongC8samplesamplesampleC4MediumWeak液相色谱流程图输输液液泵泵进样进样器器色色谱谱柱柱柱温箱柱温箱

2、检测检测器器溶溶剂剂数据数据处处置置流动相溶溶 剂剂 等等 级级波长波长 (nm)纯化水纯化水去离子水去离子水由于不纯物的存在，去离子的吸光率较高由于不纯物的存在，去离子的吸光率较高纯化水中去除了无机和有机的污染物纯化水中去除了无机和有机的污染物水水 / MeOH梯度梯度ODS 柱柱鬼峰鬼峰Gradient Curve1 ml/min, 0-100% MeOHover 10 mins and hold for15 mins.溶溶 剂剂 等等 级级溶溶 剂剂 等等 级级都经过蒸馏和都经过蒸馏和0.45u的过滤的过滤(除纤维毛除纤维毛,未溶解的机械颗粒未溶解的机械颗粒优级纯的纯度比分析纯大优级纯的

3、纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂但里面含有防腐剂和抗氧化剂HPLC级经过级经过0.2u的过滤的过滤,且除去有紫外吸收的杂质且除去有紫外吸收的杂质甲醇甲醇 乙睛乙睛 正己烷正己烷分析纯级和 HPLC 级溶剂的吸光度比较图溶溶 剂剂 等等 级级溶剂前处置溶剂前处置前往输液泵单单向向阀阀马马达和凸达和凸轮轮柱塞杆柱塞杆柱塞杆密封圈柱塞杆密封圈泵头泵头10 -100uL输输液液泵泵进样进样器器色色谱谱柱柱柱温箱柱温箱检测检测器器 A 泵泵进样进样器器色色谱谱柱柱柱温箱柱温箱检测检测器器 B泵泵AB时间时间B 浓度MeOH / H2O = 6 / 4MeOH / H2O = 8 / 2( co

4、lumn : ODS type )95%30%MeOH 浓度浓度测器，而不能运用对流动相组成变化敏感测器，而不能运用对流动相组成变化敏感的通用型检测器如示差折光检测器的通用型检测器如示差折光检测器混合器混合器低低压压梯度比例梯度比例阀阀 高高压压梯度梯度低低压压梯度梯度脱气机脱气机前往进样器前往手动进样器的原理图手动进样器的原理图 装填形状进样形状进样形状前往进样进样体体积积 检检测测器器呼呼应应值值定量管体定量管体积积的一半的一半3倍定量管体倍定量管体积积全量注入全量注入部分注入部分注入进样体积与呼应值关系进样体积与呼应值关系前往柱温箱柱温控制的优点：柱温控制的优点：色谱柱前往ODS柱的运用

5、留意点：柱的运用留意点：流动相留意点流动相留意点LC检测检测器器紫外可见检测器紫外可见检测器紫外可见检测器样样品池品池参比池参比池光光电电管管光光电电管管EinEinEin光栅光栅D2 / W 灯灯l lEout岛津岛津VPVP系列紫外检测器功能系列紫外检测器功能NEXT前往前往280nm220 nmratio280/220前往前往二极管阵列检测器二极管阵列检测器SPDSPDM10AVPM10AVP样样品池品池二极管二极管阵阵列列512个个单单元元光栅光栅D2 / W灯灯每一每一单单元可元可检测检测一个一个波波长长下的吸光度下的吸光度时间波长吸光度色色谱谱光光谱谱二极管阵列检测器的优点NEXTInitial detection Initial detection pointpointFinal Final detection detection pointpointT1T3T2peak toppeak topup slopeup slopedown slopedown slope1/2 1/3乙酰水杨酸乙酰水杨酸下降点下降点上升点上升点, ,