不同种源毛脉酸模根中主要次生代谢产物动态积累的研究

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减不同种源毛脉酸模根中主要次生代谢产物动态积累的研究（作者：单位：邮编：）作者：李瑞明，王振月，林万里，程建蕊，李春燕【摘要】目的研究毛脉酸模次生代谢产物动态积累的种内变异及其遗传规律，为优质种源选育提供科学依据。方法通过HPLC法检 测同一生长条件下的3种不同种源毛脉酸模根中主要次生代谢产物 的含量动态变化规律。结果不同种源的毛脉酸模在同一生长环境下种植，其根中白藜芦苷、白藜芦醇、酸模素、大黄酚苷4种次生代谢产物的含量水平有明显差别，而大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量 水平没有显著性差异，但其各自含量随时间的动态积累规律基本保持 一致。结论在同一生长环境下，

2、毛脉酸模根中主要次生代谢产物含量 的差异更多的是由其种源所决定的。这一研究结果为药用植物种质资 源研究提供参考依据。【关键词】 毛脉酸模；次生代谢产物；不同种源Abstract : ObjectiveTo study the intraspecific variationand gen etic rule of dyn amic accumulati on of the main sec on dary metabolites so to offer a scientific basis for breeding of highqualityprove nan ces in Rumex gme

3、li ni.Methods Todeterm ine thecontent differe nee of mai n sec on dary metabolites from 3 differe nt prove nan ces roots of Rumex gmeli ni pla nted in the same growth conditionby HPLC. ResultsIt showed that thecontents of polydat in, resveratrol, n epod in and chrysophaol1 拟glucoside was obviouslydi

4、fferent,and the contents ofemodin, chrysophanol and physcion was not obviously different among different seed sources. But with time going by, the fluctua ntlaw of dyn amic accumulati on of sec on dary metaboliteswas the same.C on clusi on The differe nee of the mai n sec on dary metabolites is dete

5、rm ined by the prove nan ces in the root of Rumexgmelini planted in the samegrowth condition.This resultoffers a theoretical prin ciple for the idioplasmic resource research of offic inal pla nts.Key words : Rumex gmelini Turcz; Secondary metabolites; Differe nt seed source随着对次生代谢生理生化及生态适应方面认识的深入以及

6、分子生物学手段的渗透，植物次生代谢分子调控的研究发展迅速，人们已着手从次生代谢角度在分子水平上探讨植物与环境因子的关系。 因此，环境因子对生物次生代谢产物作用的研究，具有很大的理论和实践意义13。毛脉酸模Rumexgmelini Turcz.为蓼科酸模属多年生宿根草本植物， 广泛分布于黑龙江省大小兴安岭及张广才岭等地区，是黑龙江省、吉 林省、吉林长白山地区的重要药用资源植物4,在民间以根入药， 对淋病、上呼吸道感染、癣病和疮毒有确切疗效5。酸模属的利用 和研究领域较广，毛脉酸模是酸模属目前所知唯一含有白藜芦醇的植 物，具有很强的药用价值，其根中含有酸模素、大黄酚、大黄素、白 藜芦醇、白藜芦醇苷

7、、大黄素甲醚等多种有效成分69，具有抗肿瘤、抗病原微生物、降血脂等作用10。本实验采用HPLC法:11测定了在同一生长条件下培育不同种源毛 脉酸模根中主要次生代谢产物动态积累的差异，为药用植物种质资源研究提供理论依据。1仪器与材料1.1药材样品与试剂样品为苗期毛脉酸模根部，2003-05播种于 黑龙江中医药大学药用植物园，200関戈07拟.31日第1次采样。间隔 15 d取样1次，采样7次。白藜芦醇、白藜芦醇苷由美国 SIGMA公司提供；大黄酚苷（大黄酚 拟1拟O以B拟葡萄糖苷）、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚均由中国 药品生物制品检定所提供；酸模素由课题组成员从毛脉酸模植物中提 取分离得到，经波

8、谱分析鉴定结构，HPLC归一化法测得含量98% 甲醇（色谱纯，美国DIKMA试剂公司）、磷酸（分析纯，天津市天河 化学试剂厂）、水（饮用纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司）。1.2仪器与设备美国 Waters高效液相色谱仪（Waters 2695型 泵，2996型二极管阵列检测器，Empowe色谱工作站）；Mettler 电 子天平AE 240； ZU.82B型真空干燥箱（上海市实验仪器总厂）。2方法及结果2.1色谱条件色谱柱 Planetsil C18 分析柱（5卩m 4.6 mmx 200 mn）,预柱 Phenomenex ODS-C18 （4. 0 mmx 3.0 mm）;流动相为 甲醇-

9、0.1%磷酸水；梯度洗脱条件：流动相从 30%甲醇到100%?醇， 分析时间为50 min ;流速1 ml min-1 ;检测波长254 nm;含量测 定波长选择：二苯乙烯类 303 nm、酸模素225 nm、蒽醌类254 nm; 柱温40C ;进样量20 l。在此条件下，7种化学成分实现基线分 离。见图1。2.2样品含量测定样品自然阴干后，粉碎过 80目筛，在50C下 干燥至恒重。每个样品精密称取 0.2 g，置索氏提取器内加50总醇 65 ml提取4 h，滤过，滤液置蒸发皿中蒸干。残渣用适量甲醇溶解， 定容到10 ml。此溶液再过0.45卩m的微孔滤膜，弃去初滤液取续 滤液作为供试品溶液。

10、精密吸取各样品的供试液20卩l注入高效液相色谱仪，测得不同样品中的白藜芦醇苷、白藜芦醇、大黄酚苷、酸 模素、大黄素、大黄酚和大黄素甲醚含量。结果见图2&2.3样品含量结果分析结合图25直观分析可以看出不同种源毛脉酸模在同一生长环境下其根中白藜芦苷、白藜芦醇、酸模素、大黄酚苷4种次生代谢产物的含量水平有明显差别，但其各自含量随 时间的动态积累规律基本保持一致。以白藜芦醇苷和白藜芦醇含量为 指标从整个生长期来看3个种源间存在差异，次序为绥棱药圃塔 河（见图23）;以酸模素含量为指标从整个生长期来看 3个种源间 存在差异，次序为绥棱塔河药圃（见图 4）;以大黄酚苷含量为 指标从整个生长期来看3个种源

11、间存在差异，次序为药圃绥棱塔 河（见图5）。结合图68直观分析可以看出不同种源毛脉酸模在同一生长环境 下其根中大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量水平在绥棱和药圃种之 间没有显著性差异，而且动态积累规律也一致。3小结结果分析表明不同种源毛脉酸模在同一生长环境下种植其根中白藜 芦苷、白藜芦醇、酸模素、大黄酚苷4种次生代谢产物的含量水平有 明显差别，大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的含量水平在绥棱和药圃种 之间没有显著性差异，但其各自含量随时间的动态积累规律基本保持 一致。含量动态规律的一致表明含量波动是由植物自身生长节律导 致，而与种源没有太大的相关性。在同一生长环境下毛脉酸模根中次 生代谢产物的含量水平

12、的差异则更多的是由种源不同所决定。这一研究结果为药用植物种质资源研究提供参考依据。【参考文献】:1陈晓亚，叶和春.植物次生代谢及调控M0 .北京:高等教育出版社，1998:293.2 Josepp, Joa n L. Effects of carb on dioxide, water supply, and seas on ally on terpe ne content and emissi on by Ros marinus officials J . Journal of Chemical Ecology, 1997, 23: 979.3 shelton A L. Variable ch

13、emical defenses in plantsand their effects on herbivore behavior J . EvolutionaryEcology Research, 2000, 2: 231.:4王振月，叶万辉，杨润福，等.毛脉酸模药材资源的 调查研究J.中药材，1996，19( 12): 603.:5吉林省中医中药研究所.长白山植物药志M .长春: 吉林人民出版社，1982: 299.:6王振月，蔡学勤，康毅华，等.毛脉酸模中两种化合 物的结构研究J.中草药，1996，27 (12) : 714.:7王振月，李延冰，匡海学，等.毛脉酸模根中大黄酚、 大黄素的分离鉴定J.中医药学报，1996，(2): 54.8康毅华，王振月，李井坤，等.毛脉酸模中两个蒽醌 苷的分离鉴定J