(动物传染病学实验课件)2 动物感染试验-2013

1、( (动物传染病学实验课件动物传染病学实验课件)2 )2 动物感动物感染试验染试验-2013-20133. 家兔家兔二、实验动物的注射二、实验动物的注射1. 小鼠小鼠皮下注射皮下注射(s.c)：颈背部、腋下、腿、侧腹。颈背部、腋下、腿、侧腹。肌肉注射肌肉注射(i.m)：股部肌肉。股部肌肉。腹腔注射腹腔注射(i.p)：下腹部腹中线两侧。下腹部腹中线两侧。尾静脉注射：小鼠有上、左、右。尾静脉注射：小鼠有上、左、右。2. 家兔家兔兔的耳缘静脉注射法兔的耳缘静脉注射法三、实验动物的采血三、实验动物的采血1. 小鼠：小鼠：尾静脉：用于少量多次采血。尾静脉：用于少量多次采血。眶静脉丛（窦）：少量多次采血，

2、小鼠眶静脉丛（窦）：少量多次采血，小鼠0.20.3ml/次。次。摘眼球：用于一次大量采血，可得到摘眼球：用于一次大量采血，可得到45体重的血量。体重的血量。2. 豚鼠豚鼠 心脏采血：可用于一次性（开胸）或多心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到510ml血量。血量。3. 家兔家兔耳缘静脉：可反复采血，每次耳缘静脉：可反复采血，每次510ml。心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次心脏采血：可用于一次性（开胸）或多次采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到采血（不开胸）。一次性开胸采血可得到80100ml血量。血量。颈动脉采血：用

3、于一次性采血，需要手术，颈动脉采血：用于一次性采血，需要手术，可得血量可得血量80100ml。动物感染试验动物感染试验一、实验目的一、实验目的二、实验材料二、实验材料三、实验方法三、实验方法四、结果分析四、结果分析一、实验目的一、实验目的1.了解动物实验的基本技术和方法。了解动物实验的基本技术和方法。2. 掌握细菌学诊断常规方法。掌握细菌学诊断常规方法。二、实验动物和主要器材二、实验动物和主要器材1. 小白鼠小白鼠2. 细菌培养物、生理盐水、注射器细菌培养物、生理盐水、注射器3.解剖盘、大头针、眼科剪、小镊子解剖盘、大头针、眼科剪、小镊子4. 载玻片、革兰氏染色液、显微镜载玻片、革兰氏染色液、

4、显微镜5. 酒精灯、酒精棉酒精灯、酒精棉三、实验内容及步骤三、实验内容及步骤1. 小白鼠的病理模型复制。小白鼠的病理模型复制。 （1）皮下接种）皮下接种（2）腹腔内接种：）腹腔内接种：0.5 ml/只。只。2. 小白鼠眼球采血处死、剖检及观察。小白鼠眼球采血处死、剖检及观察。 3. 细菌抹片的制备与镜检细菌抹片的制备与镜检(油镜的使用和清洗油镜的使用和清洗)。 4. 细菌接种与分离。细菌接种与分离。（一）小白鼠剖检及观察（一）小白鼠剖检及观察1. 观察小白鼠外观、眼球放血处死。观察小白鼠外观、眼球放血处死。2. 用酒精棉擦小白鼠尸体并用大头针将其固定在用酒精棉擦小白鼠尸体并用大头针将其固定在腊

5、盘。腊盘。3. 以无菌剪刀及镊子剥离胸腹部皮肤使其外翻。以无菌剪刀及镊子剥离胸腹部皮肤使其外翻。4. 观察心、肺、肝和脾等脏器，破颅检查脑组织。观察心、肺、肝和脾等脏器，破颅检查脑组织。5. 清洗和擦拭解剖器械、腊盘。清洗和擦拭解剖器械、腊盘。空肠1. 细菌抹片的制备细菌抹片的制备2. 革兰氏染色革兰氏染色 将载玻片置于玻片搁架上，加结晶紫染色将载玻片置于玻片搁架上，加结晶紫染色 液，液，染色染色1分钟，倾去染色液，用自来水小心地冲洗。分钟，倾去染色液，用自来水小心地冲洗。 滴加碘液，染色滴加碘液，染色1分钟，同上水洗。分钟，同上水洗。 滴加滴加95%乙醇脱色乙醇脱色1030秒，立即水洗。秒，

6、立即水洗。 滴加复红，染色滴加复红，染色1分钟，水洗。分钟，水洗。 （二）细菌抹片的制备与镜检（二）细菌抹片的制备与镜检（三）细菌接种与分离（三）细菌接种与分离需氧培养需氧培养直接涂片直接涂片染色镜检染色镜检传统方法或自动培养仪指示有菌生长传统方法或自动培养仪指示有菌生长需氧培养及需氧培养及CO2培养培养样品（无菌采集）样品（无菌采集）厌氧培养厌氧培养增菌培养增菌培养分离培养分离培养直接药敏试验直接药敏试验厌氧培养厌氧培养挑选菌落挑选菌落纯培养纯培养直接涂片直接涂片染色镜检染色镜检血清学试验血清学试验鉴定报告鉴定报告临床样品的细菌学检验程序临床样品的细菌学检验程序直接涂片直接涂片染色镜检染色镜检药敏试验药敏试验生化反应生化反应四、结果与分析四、结果与分析1. 记录小白鼠的病理变化、抹片镜检的细菌形态；记录小白鼠的病理变化、抹片镜检的细菌形态；2. 如何鉴定感染小鼠的细菌？如何鉴定感染小鼠的细菌？实验分组和卫生实验分组