食用菌选种育种技术ppt课件

1、 第六章食用菌选种育种技术第一节第一节 食用菌的繁衍方式食用菌的繁衍方式 第二节第二节 食用菌的生活史食用菌的生活史 第三节第三节 选种技术选种技术 第四节第四节 育种技术育种技术 教学目的：掌握常规菌种挑选技术；掌握孢教学目的：掌握常规菌种挑选技术；掌握孢子分别技术；根本掌握诱变育种和细胞质融子分别技术；根本掌握诱变育种和细胞质融合育种技术。合育种技术。教学重点：教学重点： 组织分别技术、孢子分别技术组织分别技术、孢子分别技术 食用菌的繁衍方式共有三种，即无性繁衍、食用菌的繁衍方式共有三种，即无性繁衍、有性繁衍和准性繁衍。有性繁衍和准性繁衍。 第一节第一节 食用菌的繁衍方式食用菌的繁衍方式

2、一、无性繁衍一、无性繁衍不经过有性生殖细胞的结合，而由亲代直接产和新个体的生殖方不经过有性生殖细胞的结合，而由亲代直接产和新个体的生殖方式叫无性繁衍，食用菌的无性繁衍主要有以下几种方式：式叫无性繁衍，食用菌的无性繁衍主要有以下几种方式：1.1.可以菌丝断裂的方式繁衍：可以菌丝断裂的方式繁衍：2.2.以产和无性孢子的方式繁衍：如香菇产生节孢子，双孢蘑菇产以产和无性孢子的方式繁衍：如香菇产生节孢子，双孢蘑菇产生次生孢子，草菇产生厚垣孢子，黑木耳产生钩状分生孢子等。生次生孢子，草菇产生厚垣孢子，黑木耳产生钩状分生孢子等。3.3.以出芽方式繁衍：以出芽方式繁衍：二、有性繁衍二、有性繁衍经过有性生殖细胞

3、的结合，产生新个体的繁衍方经过有性生殖细胞的结合，产生新个体的繁衍方式，叫有性繁衍。式，叫有性繁衍。 孢子核基因的不同就决议了其所萌生成的单核菌丝的不同性别。孢子核基因的不同就决议了其所萌生成的单核菌丝的不同性别。有性繁衍根据进展质配的单核菌丝的性别，又可以分为以下两种方有性繁衍根据进展质配的单核菌丝的性别，又可以分为以下两种方式。式。一同宗结合：一同宗结合：1.1.初级同宗结合初级同宗结合由单个孢子萌生而构成的菌丝全，无需亲和性，很快开展成双核由单个孢子萌生而构成的菌丝全，无需亲和性，很快开展成双核菌比体，并经过锁状结合增殖。每个细胞内的两个核没有遗传上的菌比体，并经过锁状结合增殖。每个细胞

4、内的两个核没有遗传上的差别，均能构成子实体。差别，均能构成子实体。 2. 2.次级同宗结合次级同宗结合减数分裂后减数分裂后4 4个子核，个子核，“雌雄两两相配分别经过孢子梗小梗雌雄两两相配分别经过孢子梗小梗进入孢子，构成进入孢子，构成2 2个含有异核的孢子。这种担孢子一旦萌生，初期个含有异核的孢子。这种担孢子一旦萌生，初期为多核，随之产生隔膜，将每一个细胞分隔成只含有为多核，随之产生隔膜，将每一个细胞分隔成只含有2 2个核的细胞。个核的细胞。顶端细胞核又不断再进展分裂，到一定程度又再被横隔成每一细胞顶端细胞核又不断再进展分裂，到一定程度又再被横隔成每一细胞内只含有内只含有2 2个核的菌丝，周而

5、复始。这种双核菌丝具有结实性，称个核的菌丝，周而复始。这种双核菌丝具有结实性，称之为次级同宗结合。之为次级同宗结合。 二异宗结合二异宗结合异宗结合是一种异宗结合是一种“雌雄不同株本身不孕的有性生殖方式。在担子雌雄不同株本身不孕的有性生殖方式。在担子菌亚门中，异宗结合占菌亚门中，异宗结合占90%90%，主要有两种方式。，主要有两种方式。1.1.二极性异宗结合二极性异宗结合一部分食用菌的单核菌丝有一部分食用菌的单核菌丝有“雌、雌、“雄之分，通常用雄之分，通常用“、“表示。唯有两条性别不同的菌丝进展交配产生的双核菌丝，表示。唯有两条性别不同的菌丝进展交配产生的双核菌丝，才具有结实性。才具有结实性。

6、2. 2.四极性异宗结合四极性异宗结合由同一子实体所产生的担孢子萌生的菌丝间进展交配时，唯有由同一子实体所产生的担孢子萌生的菌丝间进展交配时，唯有1/41/4的交配组合能产生可孕的双核菌丝。的交配组合能产生可孕的双核菌丝。第二节第二节 食用菌的生活史食用菌的生活史食用菌的生活史，是指从孢子萌生，阅历菌丝体、食用菌的生活史，是指从孢子萌生，阅历菌丝体、子实体阶段，直到产生第二代即同一种孢子的全子实体阶段，直到产生第二代即同一种孢子的全过程。过程。一、伞菌的生活史一、伞菌的生活史1.1.担孢子萌生担孢子萌生2.2.单核菌丝初生菌丝开场发育。单核菌丝初生菌丝开场发育。3.3.两条可亲和的单核菌丝进展

7、质配。两条可亲和的单核菌丝进展质配。4.4.质配构成异核的双核菌丝。多数种类的双核菌质配构成异核的双核菌丝。多数种类的双核菌丝可见锁状结合，丝可见锁状结合，一、伞菌的生活史一、伞菌的生活史5.5.在适宜的环境条件下，双核菌丝体组织化，开成各种在适宜的环境条件下，双核菌丝体组织化，开成各种食用菌所特有的子实体。食用菌所特有的子实体。6.6.来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体核在担子中来自两个亲本的一对交配型不同的单倍体核在担子中交融，进展核配，构成一个双倍体核。交融，进展核配，构成一个双倍体核。7.7.双倍体核进展减数分裂，结果产生四个单倍体核，原双倍体核进展减数分裂，结果产生四个单倍体核，原

8、担子变成担子。担子变成担子。8.8.各个单倍体核分别移支担子小梗的顶端，构成担孢子。各个单倍体核分别移支担子小梗的顶端，构成担孢子。至此，一个完好的生活史终了了。至此，一个完好的生活史终了了。 二、有性生殖过程中细胞核的变化二、有性生殖过程中细胞核的变化一是质配后开场的异核双核阶段，即异核双核期。具有一是质配后开场的异核双核阶段，即异核双核期。具有产生子实体的才干。产生子实体的才干。二是核配后开场的短暂的双倍核期。二是核配后开场的短暂的双倍核期。三是核配马上进展减数分裂，每个细胞中都有三是核配马上进展减数分裂，每个细胞中都有4 4个单倍个单倍体核，称为单核期，此期亦短暂。体核，称为单核期，此期

9、亦短暂。 第三节第三节 选种技术选种技术一、选种的原理和方法一、选种的原理和方法1.1.原理原理食用菌的种性是经过菌丝体的繁衍逐代传送的，食用菌的种性是经过菌丝体的繁衍逐代传送的，所以自然选择就偏重于在不同菌株之间进展，而所以自然选择就偏重于在不同菌株之间进展，而不是在同一菌株的后代中进展。不是在同一菌株的后代中进展。 食用菌自然选育的根本流程：搜集种类资源搜集种类资源生理性能测定生理性能测定种类比较实验种类比较实验扩展、示范推行扩展、示范推行2.2.方法方法种类资源的搜集种类资源的搜集. .尽能够的搜集有足够代表性的野生菌株。确定采尽能够的搜集有足够代表性的野生菌株。确定采种的目的，采集点的

10、地理条件，并做好详细的采种的目的，采集点的地理条件，并做好详细的采集记录。集记录。生理性能测定生理性能测定标本采集后应尽快采用多种分别方法获取菌株，随后，标本采集后应尽快采用多种分别方法获取菌株，随后，立刻用平板做拮抗实验即分别的菌株菌丝两两配对接入立刻用平板做拮抗实验即分别的菌株菌丝两两配对接入同一平板培育基内，适温培育，经十余日，不同菌株的同一平板培育基内，适温培育，经十余日，不同菌株的菌落内能否出现拮抗线，同时还可在平板或生长测定管上菌落内能否出现拮抗线，同时还可在平板或生长测定管上测定菌丝生长速度及对温度的反响。测定菌丝生长速度及对温度的反响。菌株比较菌株比较比较各菌株的优劣，详细记录

11、各菌株的产量、菇形、温比较各菌株的优劣，详细记录各菌株的产量、菇形、温性、干鲜比、始菇期、菇潮间隔、形状等。为了实验的准性、干鲜比、始菇期、菇潮间隔、形状等。为了实验的准确性，要保证菌种的质量，培育基配方，接种，管理措施确性，要保证菌种的质量，培育基配方，接种，管理措施等能够影响结果的要素，尽能够使之一致。实验还应按生等能够影响结果的要素，尽能够使之一致。实验还应按生物统计原理进展安排。物统计原理进展安排。扩展实验扩展实验上述的种类评选结果仅是个阶段性的成果，还应和当地上述的种类评选结果仅是个阶段性的成果，还应和当地的当家菌株同时进展栽培，证明它是更优良的菌株。的当家菌株同时进展栽培，证明它是

12、更优良的菌株。示范推行示范推行经扩展实验后，将选出的优良种类放到有代表性的实验经扩展实验后，将选出的优良种类放到有代表性的实验点进展现范性消费，待实验结果进一步确定之后，再由点点进展现范性消费，待实验结果进一步确定之后，再由点到面推行。到面推行。二、菌种分别二、菌种分别什么是菌种的分别呢？什么是菌种的分别呢？将有价值的子实体的部分组织、孢子或基内将有价值的子实体的部分组织、孢子或基内菌丝移接到斜面试管培育基上，获得纯培育菌丝移接到斜面试管培育基上，获得纯培育菌丝的操作称为菌种分别。菌丝的操作称为菌种分别。一种子资源的获得一种子资源的获得种子资源的获得有野外采集和栽培场所采集两种种子资源的获得有

13、野外采集和栽培场所采集两种途径。野外标本的采集，主要适用于食用菌的野途径。野外标本的采集，主要适用于食用菌的野生种驯化、遗传育种、生理生态以及各种研讨用生种驯化、遗传育种、生理生态以及各种研讨用的一级种的分别。而在食用菌栽培上的一级种的的一级种的分别。而在食用菌栽培上的一级种的分别，其种菇的来源主要是从栽培场中经留种获分别，其种菇的来源主要是从栽培场中经留种获得的。得的。种菇耳的选择种菇耳的选择分别对象应从当地当家种类，或从外地引进并经分别对象应从当地当家种类，或从外地引进并经大面积栽培后表现出高产、稳产的菌株中选择。大面积栽培后表现出高产、稳产的菌株中选择。留种种菇要求菇形理想，长势强壮，无

14、虫无病的留种种菇要求菇形理想，长势强壮，无虫无病的子实体。子实体。成熟度的选择成熟度的选择组织分别普通选择幼菇，即器官分化尚未终了时组织分别普通选择幼菇，即器官分化尚未终了时采摘。此时菇体正在生长。从最旺盛的采摘。此时菇体正在生长。从最旺盛的“生长点生长点挑取组织，其菌丝萌生快，长势好，而且操作时，挑取组织，其菌丝萌生快，长势好，而且操作时，组织块纤维化程度低，容易挑取。组织块纤维化程度低，容易挑取。二菌种分别二菌种分别菌种分别可以分为孢子分别、组织分别和基内菌菌种分别可以分为孢子分别、组织分别和基内菌丝分别三种。丝分别三种。1.1.分别前的预备分别前的预备培育基的选择培育基的选择通常运用通常

15、运用PDAPDA培育基。特殊分别培育时，常采用培育基。特殊分别培育时，常采用相应的培育基。相应的培育基。种菇的预处置种菇的预处置种菇采摘后，假设种菇水分太高，菇盖沾粘，可种菇采摘后，假设种菇水分太高，菇盖沾粘，可适当风干后再进展分别。胶质耳只能用无菌水多适当风干后再进展分别。胶质耳只能用无菌水多次冲洗，无菌滤纸吸干，然后让耳片子实层上重次冲洗，无菌滤纸吸干，然后让耳片子实层上重新产生成熟的孢子供分别，这样可降低污染率。新产生成熟的孢子供分别，这样可降低污染率。 2 2、组织分别、组织分别伞菌组织分别法组织分别时，用75%酒精棉球擦拭双手及接种工具。点燃酒精灯，将尖头镊子烧灼灭菌；随后将种菇纵向

16、撕成两半，于菌柄、菌肉交界处切取火柴头大小的组织块，迅速抖落到试管中，烧灼管口及棉塞，塞上棉塞。这些操作都是在酒精灯火焰无菌区域进展的。 胶质菌类组织分别法胶质菌类组织分别法一种方法是将耳片反复用无菌水冲洗，切成一种方法是将耳片反复用无菌水冲洗，切成0.5cm0.5cm小块移入培育基，于小块移入培育基，于2828下进展培育；下进展培育；另一种方法是剖取尚未展开耳片的耳基团内的组织另一种方法是剖取尚未展开耳片的耳基团内的组织块进展分别。块进展分别。 菌核的组织分别法菌核的组织分别法一些药用菌如茯苓、猪苓、雷丸都有菌核。进展组织一些药用菌如茯苓、猪苓、雷丸都有菌核。进展组织分别时，采用含浆汁多的菌

17、核。在无菌的条件之下，分别时，采用含浆汁多的菌核。在无菌的条件之下，将菌核剖开，于菌核的附近，剖取蚕豆大小的菌核组将菌核剖开，于菌核的附近，剖取蚕豆大小的菌核组织块移入斜面培育基上，在织块移入斜面培育基上，在26-3026-30下培育。下培育。 特特殊的组织分特特殊的组织分别别2.2.菌菌索索分分离离3.3.子子实实层层分分离离1. 1. 生生长长点点分分离离 3.3.木腐菌基内菌丝分别木腐菌基内菌丝分别把分别用菇木的部分或全部的外表在火焰上轻燎。把分别用菇木的部分或全部的外表在火焰上轻燎。取小刀在火焰上灭菌，对准菇木上菇柄耳基的着生取小刀在火焰上灭菌，对准菇木上菇柄耳基的着生位置切成两半。位

18、置切成两半。确定欲分别菌丝在菇木上的位置，再次用火焰灭菌过的确定欲分别菌丝在菇木上的位置，再次用火焰灭菌过的小刀，在欲分别部位刻划数个井字。小刀，在欲分别部位刻划数个井字。用火焰灭过菌的接种钩，钩取一小块木屑绿豆大小或用火焰灭过菌的接种钩，钩取一小块木屑绿豆大小或更小移接于斜面培育基。更小移接于斜面培育基。接种后将试管置于接种后将试管置于25272527下培育，促使其恢复。近风下培育，促使其恢复。近风干的种木内菌丝常处于休眠形状。接种后，种木吸湿，菌干的种木内菌丝常处于休眠形状。接种后，种木吸湿，菌丝逐渐恢复生长。假设短期时间内分别物未曾发，那么可丝逐渐恢复生长。假设短期时间内分别物未曾发，那

19、么可保管至保管至4 4周后，再断定分别能否胜利。周后，再断定分别能否胜利。 孢子分别主要是指利用子实体上产生的成熟孢子分别主要是指利用子实体上产生的成熟有性孢子分别培育获得纯菌种的方法。分为多孢有性孢子分别培育获得纯菌种的方法。分为多孢分别与单孢分别两种。分别与单孢分别两种。一多孢分别一多孢分别4.孢子分别技术孢子分别技术1.种种菇菇孢孢子子弹弹射射法法 2. 帖褶法3.褶上涂抹法：4.空中孢子捕捉法:5.钩悬法 6.6.试管插割法试管插割法 此法方便快捷，胜利率高，是多数菌种孢子分别的主要方法。适宜于大型子实体的孢子分别。详细操作方法是：无菌操作迅速用无菌试管取下组织块。用接种镐将组织块推至

20、距斜面培育基1cm处，塞好棉塞。于25-28条件下见光竖立培育至12小时左右，在无菌操作条件下用尖头镊子取出组织块。继续暗光培育，2-3天后，萌生成星芒状的单孢子菌落。 所谓单孢分别即从搜集到的多孢子中将单所谓单孢分别即从搜集到的多孢子中将单 个孢子分别出来，分别培育，作为育种的资料。个孢子分别出来，分别培育，作为育种的资料。1.1.涂抹法：用已沾湿无菌水的接种针，从孢子印涂抹法：用已沾湿无菌水的接种针，从孢子印上沾取孢子，在无菌条件下，插入盛用无菌水的上沾取孢子，在无菌条件下，插入盛用无菌水的小试管内振荡稀释成适宜浓度的孢子悬浊液。随小试管内振荡稀释成适宜浓度的孢子悬浊液。随后无菌条件下划线

21、培育。后无菌条件下划线培育。二单孢分别二单孢分别2.2.梯度稀释点样法梯度稀释点样法用同样的方法制成浓度较高的孢子悬浊液。同时取灭菌过用同样的方法制成浓度较高的孢子悬浊液。同时取灭菌过的空试管数根，排序编号。按无菌操作规程获得一系列的的空试管数根，排序编号。按无菌操作规程获得一系列的不同浓度梯度的孢子悬浮液。再用毛细管在各个梯度孢子不同浓度梯度的孢子悬浮液。再用毛细管在各个梯度孢子液中取样培育，单孢萌生后菌丝便长入小培育基块中，再液中取样培育，单孢萌生后菌丝便长入小培育基块中，再将其转移到试管斜面上培育获得单孢培育物。将其转移到试管斜面上培育获得单孢培育物。 第四节 育种技术一、杂交育种的原理一、杂交育种的原理 食、药用菌的杂交是指不同种或种内不同株系之食、药用菌的杂交是指不同种或种内不同株系之间的交配，后者那么理重要。间的交配，后者那么理重要。 二、杂交育种的方法二、杂交育种的方法1.1.选择亲本：选择亲本：2.2.单孢子分别单孢子分别3.3.单孢子杂交配对单孢子杂交配对 4.4.转管繁衍转管繁衍 将可亲和的组合移入新的斜面保管备用。将可亲和的组合移入新的斜面保管备用