粉针无菌灌装工艺过程验证方案汇总

1、粉针无菌灌装工艺过程验证方案方案编号：文件类别：技 术车间：起草人：日期：年月日审核人：日期：年月日审核人：日期：年月日批准人：日期：年月日目 录13 23 33 434.134.234.344.444.554.66 58 68918191、目的在厂房及空调净化系统、工艺用水系统及设备已验证合格，无菌室按规定方法和要求清洁消毒，无菌作业所用的工器具等物品已灭菌, 工艺规程、标准操作程序、质量标准和检验操作规程等技术文件已制订并批准执行，人员已经过培训的基础上, 进行培养基模拟分装试验。通过培养基模拟分装试验,证明分装过程所采用的各种方法和各种规程在防止微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力

2、，提供保证所生产产品的无菌性的可信限度达到可接受的合格标准的证据，综合评价粉针车间无菌保证能力。2、范围适用于粉针车间培养基模拟分装试验。3、职责3.1 验证小组负责验证方案及报告的起草。3.2 质管部负责验证过程的监督、取样及检验工作。3.3 验证小组组长负责结果的评估。3.4 验证委员会主任负责验证方案及报告的批准。3.5 验证小组部门 姓名验证小组组长质管部车间4、内容：4. 1 设备概述：粉针剂无菌药品的分装采用XLF 型西林瓶高速螺杆分装机。共5 台，编号分 别为1 号机、 2 号机、 3 号机、4 号机、 5 号机。4. 2 设备条件确认：项目标准要求检查结果1 号机2 号机3 号

3、机4 号机5 号机设备资料齐全设备预确认完成安装确认完成（IQ）运行确认完成（ OQ）性能确认完成（ PQ）设备清洁、灭完成菌检查人日期结论： 5 台设备均可承担培养基模拟分装试验 。（是否）确认人：日期：4. 3 试验条件确认项目标准要求检查结果分装加塞机验证完成甲醛熏蒸消毒效果验证完成无菌压缩空气验证完成干热灭菌过程验证完成湿热灭菌过程验证完成空气净化系统验证完成纯化水系统验证完成注射用水系统验证完成操作人员培训完成厂房设施已消毒并按无菌区管理完成检查人日期结论：具备进行培养基模拟分装试验的条件。（是否）确认人：日期：4. 4 培养基模拟分装前各项准备试验4. 4. 1 胰酶酪胨大豆肉汤培

4、养基灭菌效果试验方法：培养基分装于 1000 毫升锥形瓶 中，于 121湿热灭菌 20min，冷却至室温 , 取样 10 支于 32培养 14 天（附表 1）。合格标准：应无细菌生长。结论：无细菌生长 。（是否）确认人：日期：培养基的微生物生长性能及乳糖对其影响试验方法：取 30 支装有经灭菌的胰酶酪胨 大豆肉汤培养基的无菌管制瓶，每 10 支一组，共分三组，每一组中 5 支各加 0.25g 乳糖， 5 支不加乳糖。a. 第一组 10 支无菌管制瓶进行枯草芽孢 杆菌接种，接种量 100cfu，30-35培养 3-5 天。b. 第二组 10 支无菌管制瓶进行生孢梭菌 接种，接种量 100 cfu

5、，30-35培养 3-5 天。c. 第三组 10 支无菌管制瓶进行白色念珠 菌接种，接种量 100cfu， 23-28培养 3-5 天（附表 2）。合格标准：均应出现明显的所接种的微生物的生长。结论：均出现明显的所接种的微生物的生长。（是否）确认人：日期：乳糖无菌性试 验方法：乳糖分装于双层塑料袋中，密封，用钴在无菌室取样，按无菌检查法检验。合格标准：应无细菌生长。结论：无细菌生长 。（是否）60 射线照射灭菌。将灭菌乳糖粉末确认人：日期：乳糖溶解性试 验方法：在两个装有1.0 g 无菌乳糖粉末的20ml西林瓶中，分别加入温 度约为25和 32的 SCDM 培养基适量，振摇，使乳糖粉末全部溶解

6、，计算浓度，取浓度数值小的作为乳糖溶解性结果。结论：乳糖能溶解于25和 35的 SCDM 培养基中，最大浓度约为%（g/ml）。确认人：日期：4. 5 培养基模拟分装试验过程人员数量及人员行为：在分装室内当班工作的操作 人员 14 名、 QA 监督员 1 名、车间管理人员 1 名、其他人员 4 名（附表 3）。所有人员均按实际生产时状态工作或移动。试验方法：西林瓶在超声波洗瓶机中，用纯化水粗洗、注射用水精洗，在隧道烘箱内350以上干热灭菌不少于5 分钟，除菌、除热原。卤化丁基胶塞经注射用水漂洗，在121 湿热灭菌 30 分钟，干燥。乳糖粉末在 100 级洁净度层流保护下经螺杆分装机定量分装到西

7、林瓶中，每瓶0.25 g，分装机速度调至最低。用蠕动泵（配装时间继电器）手工注入SCDM 培养基，每瓶 2.5ml（其硅胶管应经121，湿 热灭菌 20 分钟），压塞、轧盖，按分装时间对每个盛装西林瓶的托盘编号，并记录每盘的分装时间。模拟分装进行3 批，每 批不少于1050011000 瓶。将模拟分装生产的全部样品上下颠倒振摇，使乳糖全部溶解，并使培养基与整个 瓶子的内表面及胶塞内表面充分接触。然后放入培养房中，先在23-28，培养 7 天， 再转入 30-35条件下，培养7 天。检查培养的全部样品的微生物生长情况并分别记录。若发现污染应明确记录瓶数，同时应检查铝盖、胶塞的密封情况，若有破损应

8、记录并 检查破损原因（附表 4）。微生物生长瓶数污染率（阳性生长率） =100%分装总瓶数 -破损瓶数合格标准：可信限为95时污染率 0.1%，即 10000 瓶模拟分装允许染菌的瓶数量不得超过 4 瓶。结论：污染率 0.1%,符合规定 。（是否）确认人：日期：阳性对照方法：在模拟分装过程中，随机取出30 支装有培养基的西林瓶，其中10 支接入小于 100 cfu 的白色念珠菌，在23-28培养 3-5 天； 10 支接入小于 100 cfu 的枯草芽孢杆菌； 10 支接入小 于 100cfu 的生孢梭菌，在30-35各培养 3-5 天。做为阳性对照（附表 5）。合格标准： 3-5 天内至少

9、50%的西林瓶中加菌培养基中有明显的接种微生物的生 长。结论：符合规定 。（是否）确认人：日期：4.5. 4 阴性对照在模拟分装过程结束时，取仅装有培养基的西林瓶对照（附表 5。10 支，压塞、轧盖，作为阴性合格标准：应无菌生长。结论：无菌生长 。（是否）确认人：日期：4. 6 实验过程监测4. 6. 1 空瓶、胶塞无菌检查在分装前、中、后分别从每台分装线上随机抽取胶塞、空西林瓶， 5 台机共抽 60 支胶塞、 30 支空瓶，进行无菌检验（附表 5）。合格标准：应无菌生长。结论：无菌生长 。（是否）确认人：日期：4. 6. 2 人员检测人员更衣完毕，在实验操作前、实验操作过程中、实验结束后随机

10、抽取棉签擦拭法（灭菌棉签用无菌生理盐水湿润）在易污染部位取样（如手、前5 人，用胸、手臂）等考察微生物污染情况，每棉签约10102，结果见附表6。合格标准：细菌 1cfu/棉签结论：符合规定 。（是否）确认人：日期：4. 6. 3 无菌区环境动态监测标准及监测频次洁净室 ( 区 ) 空气洁净度级别动态监测标准洁净度级别尘粒最大允许数 /立方米微生物最大允许数浮游菌 /立方米沉降菌 /皿0.5 m5m100 级3,50005110,000 级350,00020001003依据空气净化系统验证方案检测方法检测，检测频次为每批分装前、中、后三次。如果监测结果不符合洁净室( 区 ) 空气洁净度级别动态

11、监测标准，则应对该区域内的人员进行精减 , 直至监测合格。结论：确认人：4. 6. 4 实验前及结束后，用棉签擦拭法在操作台面，墙面日期：，地面等处各取样1 次，考察微生物污染情况，每棉签约10102（附表7）。合格标准：细菌 1 cfu /棉签结论：符合规定 。（是否）确认人：日期：4. 6. 5 无菌操作区最多人员数量确认：培养基模拟分装验 证结果合格，则在培养基模拟分装试验过程中操作、管理、监督的人数即为无菌区最多人数。结论：确认人：日期：4.6. 6 分别在西林瓶灭菌后 4、6 小时（置于 100 级垂直层流保护下 ），各取 10 支，分别分 10 管，每管 1 支瓶，对不同暂存时间的

12、瓶分别进行无菌检查 。（附表 8）分别取灭菌后贮存于暂存间24、36、 48 小时的胶塞各 50 支，分别分5 支胶塞，对不同暂存时间的胶塞分别进行无菌检查。（附表 9）合格标准：应无菌。结论：无菌生长 。（是否）10 管，每管确认人：日期：4.6. 7 分别取灭菌后存放于三更24、 36、48 小时的无菌服各两件，用一无菌镊子夹住无菌盐水棉签在每件衣服各取五点擦拭，将取样后的5 个棉签分别用无菌吸 管加水 2ml ，在旋涡振荡器上振荡 2 分钟，用 吸管吸取加入的水，分别置于 5 个培养皿中，向 培养皿中注入培养基，待其凝固后在 30- 35 培养 2 天，同时作空白 对照 。（附表 10）

13、合格标准：细菌 1 cfu /棉签结论：符合规定 。（是否）确认人：日期：5、验证偏差处理在整个验证过程中，对于不合格的条项，应进行有针对性的分析，查明原因 及时整改，并对该条项加倍验证，直到验证合格为止。6、验证周期6. 1 大修后或重大生产工艺的变更后要进行再验证。6. 2 出现无菌检查阳性、内毒素不合格质量问题时进行再 验证。6. 3 每年至少进行一次培养基分装试验每次至少一批。6. 4 无菌分装生产线的每位员工每年至少参加一次培养基 分装试验，以检定无菌作业人员的操作是否规范。附表 1培养基无菌性试验记录培养基名称分装量培养时间年月日年月日培养温度瓶号12345678910培养情况试验

14、人审核人时间注：培养后瓶中培养基无任何微生物生长填“”，否则填：“ +”。附表 2培养基微生物生长性能试验记录接种菌名枯草芽孢杆菌接种量培养温度30-35培养时间年月日年月日样品瓶号加乳糖不加乳糖12345678910培养情况试验人审核人接种菌名生孢梭菌接种量培养温度30-35培养时间年月日年月日样品瓶号加乳糖不加乳糖23456789101培养情况试验人审核人接种菌名白色念珠菌接种量培养温度23-28培养时间年月日年月日样品瓶号加乳糖不加乳糖23456789101培养情况试验人审核人注：培养后瓶中培养基无任何微生物生长填“”，否则填“ +”。附表 3培养基模拟分装试验无菌室人员签名 表姓名职务

15、姓名职务总人数QA附表 4污染率监测记录车间：批次第一批第二批第三批23-28 30-3523-2830-35 23-28 30-35 项目总培养瓶数微生物数生长瓶数破损瓶数污染率（阳性生长率）%结论方案日期监测人复核人附表 5样品种类培养结果微生物生长率 %培养温度试验人取样日期方案日期样品种类培养结果微生物生长率 %培养温度试验人取样日期方案日期样品对照品培养记录阴性对照品培养基 10 支第一批第二批培养时间复核人阳性对照品白色念珠菌 10 支第一批第二批23-28培养时间审核人阳性对照品第三批14 天第三批14 天种类培养结果微生物生长率 %培养温度试验人取样日期方案日期样品种类培养结果

16、微生物生长率 %培养温度试验人取样日期方案日期附表 6第一批30-35第一批30-35枯草芽孢杆菌 10 支第二批第三批培养时间14 天审核人阳性对照品生孢梭菌 10 支第二批第三批培养时间14 天审核人实验过程无菌监测记录结果分装前分装中分装后结论名称123451234512345需、瓶第厌菌塞一批真瓶菌塞需、瓶第厌菌塞二批真瓶菌塞需、瓶第厌菌塞三批真瓶菌塞人第一批员擦第二批拭第三批第一批第二批第三批取样人取样日期方案日期注：培养后培养基中无任何微生物生长填“检测人审核人”，否则填：“ +”。附表 7实验过程洁净室空气洁净度（环境）监测记录结果名称第0.5 m一批5m尘第0.5m粒二数批5m

17、/m3第0.5m三批5m浮第一批游第二批菌/m3第三批沉第一批降第二批菌 /皿第三批分装前分装中分装后结论123123456789123表第一批面擦第二批拭菌第三批第一批第二批第三批取样人取样日期检验人方案日期复核人附表 8空瓶无菌监测记录结果空瓶 4h空瓶 6h结名称1234512345果需、厌第菌一批真菌需、厌第菌二批真菌需、厌第菌三批真菌第取样日期一方案批日期第取样日期二方案批日期第取样日期三方案批日期取样人检测人复核人注：培养后培养基中无任何微生物生长填“”，否则填：“ +”。附表 9胶塞无菌监测记录结果24h（暂存室）36h（暂存室）48h（暂存室）结果名称123451234512345第需、厌菌一批真菌