盐酸小檗碱对糖尿病大鼠胸主动脉内皮损伤的保护作用.

1、盐酸小檗碱对糖尿病大鼠胸主动脉内皮损伤的保护 作用作者：张卓 王春梅王春艳 白岩王丽杰徐嘉琪陈立【摘要】目的探讨盐酸小檗碱对2型糖尿病血管内皮功能损伤的保护作用。方法采用小剂量链脲佐菌素腹腔注射加高脂饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型。将模型动物随机分为模型组、盐酸小檗碱组，另设正常对照 组以及正常盐酸小檗碱组。用药组灌胃给药 8 w后，做葡萄糖耐量实验；检测 各组动物血清中空腹血糖（FPG）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、空腹血清胰岛 素（FINS）的水平；检测血清中一氧化氮（NO）和超氧化物歧化酶（SOD含量；免疫 组织化学方法检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS的表达。结果 与模型组

2、比较， 盐酸小檗碱治疗组FPG TC TG水平明显下降（PvO.05），血清胰岛素水平有所 升高，但无显著性差异（P 0.05）;盐酸小檗碱能明显提高糖尿病大鼠胰岛素 敏感指数，同时提高大鼠对腹腔注射葡萄糖的耐受力，改善胰岛素抵抗（均PvO.01）;盐酸小檗碱可显著降低糖尿病组大鼠血清中NO含量，提高SOD水平（P0.05，P0.01）;显著降低胸主动脉组织eNOS蛋白表达（P0.05)。T2DM+BE组大鼠经灌胃治疗8 w后，精神状态良好，毛发较润泽，糖尿病症状明显减轻。与CONfi比较，T2DM& FPG TG和TC水平明显增高(P0.05)，血清胰岛素水平略有降低，胰 岛素敏感指数(IS

3、I)明显下降(PvO.05)。盐酸小檗碱治疗8 w显著降低了糖尿病 大鼠血清FPG TG和TC水平(P0.05)，提高了 ISI(P0.05)，而对正常大鼠血 糖及血脂没有影响。见表1。表1各组大鼠体重及生化指标变化(略)2.2盐酸小檗碱对大鼠腹腔注射葡萄糖耐量的影响如图1所示，CONfi、CON+BE组及T2DM+BE组在葡萄糖注射后30 min血 糖达峰值，在90 min内逐渐下降；而T2DMS血糖在60 min达峰值，后缓慢下 降，T2DM组血糖水平与CON&相比一直维持在较高水平。结果表明 T2DM大鼠 对葡萄糖耐受力下降，出现IR，而盐酸小檗碱可明显提高机体对葡萄糖的耐受 量，改善了

4、 IR。2.3 盐酸小檗碱对血清NO含量和SOD舌性的影响与CONfi比较，T2DM组血清NC含量及SOD舌性明显降低（P V 0.01），盐酸 小檗碱治疗8 w后明显增加糖尿病大鼠血清 NC水平和SOD舌性（P V0.05），而 对正常大鼠NO水平及SOD舌性无明显影响。见表2。2.4 盐酸小檗碱对大鼠胸主动脉组织 eNOS蛋白表达的影响如图2B和图2C所示，CONfi CON+BE组大鼠胸主动脉内膜区（主要是 内皮细胞胞质）可见连续线状棕黄色阳性染色，即 eNOS阳性表达；而T2DM组 血管内膜区棕黄色着色明显减弱，局部出现未表达区（图2D）。盐酸小檗碱治疗组与T2DM组比较，eNOS表达

5、明显增加（图2E）。表2 盐酸小檗碱对各组 大鼠血清NO SOD水平的影响（略）3 讨 论血管内皮损伤是糖尿病血管并发症的主要发病机制之一。高血糖、高血 脂、高胰岛素血症均会使氧化应激增加，氧自由基产生增多，造成血管内皮细 胞损伤2。因此，要想维持T2DM患者血管内皮的正常功能，同时改善患者 的糖、脂、胰岛素代谢是十分重要的。本实验显示，盐酸小檗碱可显著降低高 脂饮食联合小剂量STZ诱导的T2DM大鼠FPG TG TC水平，并提高ISI，改善 IR，有效遏制了导致内皮细胞损伤的始动环节。NO是内皮来源的最重要的血管舒张因子，主要调节较大的输送血管张 力5。NO除了具有强烈的血管舒张功能外，还具

6、有抗血小板聚集、抗平滑 肌细胞增殖和抑制单核巨噬细胞向血管迁移等作用。因此，NO生物活性下降可导致内皮依赖性血管舒张功能损害和促进动脉粥样硬化的形成。NO被认为是动脉粥样硬化的一个最重要保护因子，是机体对抗动脉粥样硬化的第一道防线6。糖尿病时NO减少可能是合成减少和灭活增加造成的。内皮细胞 NO的来 源主要通过存在于胞内的eNOS催化L精氨酸脱胍基而产生NO研究表明，糖 尿病时高血糖、IR状态、脂代谢异常、炎性细胞因子分泌上调等多种因素均可 引起eNOS舌性下降或表达降低，从而使 NO合成和分泌减少，造成糖尿病内皮 依赖性血管舒张功能障碍而出现心血管并发症7。本实验结果表明盐酸小檗 碱有很好的

7、保护血管内皮细胞的作用。氧化应激是糖尿病导致内皮损伤的主要原因之一。糖毒性，脂毒性等引 起的氧化应激使超氧阴离子等活性氧产生增多。超氧阴离子可迅速与NO发生反应，将其氧化生成过氧化亚硝基，而导致 NO灭活。过氧化亚硝基也可以将 eNOS勺辅酶BH4氧化为BH2降低BH4与BH2比例，从而使eNOS兑耦联，失去 催化生成NO的能力，反而催化超氧阴离子的产生，造成恶性循环8。SOD 是体内清除自由基的主要酶系之一，可将超氧阴离子迅速氧化为O2和H2O2有效清除体内的氧自由基，减轻组织损伤。糖尿病高血糖可与SOD舌性中心的 赖氨酸结合，产生糖基化反应，使 SOD舌性下降，清除自由基能力下降9。 本实

8、验结果显示，糖尿病大鼠血清 SOD舌性明显下降，盐酸小檗碱治疗显著提 高了血清SOD水平，增强其抗氧化能力，减少 NO的破坏，从而增加了 NO的生 物活性，保护内皮依赖性血管舒张功能。综上所述，盐酸小檗碱治疗显著改善了T2DM大鼠的糖、脂代谢和IR，提高了大鼠胸主动脉eNOS蛋白表达和血清SOD活性，增加了 NO合成，减少NO 破坏，保护糖尿病引起的内皮功能损伤。【参考文献】1 Vinik Al ， Vinik E.Prevention of the complications ofdiabetes J.Am J Manag Care， 2003; 9132 Jeonga K，Monica M

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