邵阳医专大学生研究学习和创新试验计划ppt课件

1、邵阳医专大学生研讨性学习和邵阳医专大学生研讨性学习和创新性实验方案创新性实验方案 项 目 申 报 表工程概述工程概述丹参酮丹参酮IIA对缺血再灌注损伤大鼠对缺血再灌注损伤大鼠心肌组织维护作用的实验研讨心肌组织维护作用的实验研讨立项时间：立项时间：2021年年5月月学校称号：邵阳医学高等专科学校学校称号：邵阳医学高等专科学校指点教师：李涛职称：讲师，学科专业：指点教师：李涛职称：讲师，学科专业：医学医学科研小组：黄赛帅，宁梦婧，薛晓斌，曾欣科研小组：黄赛帅，宁梦婧，薛晓斌，曾欣能，程丹能，程丹小组引见：专业：口腔医学，入学年份：小组引见：专业：口腔医学，入学年份：2021工程研讨和实验的目的、内

2、容和要处工程研讨和实验的目的、内容和要处理的主要问题理的主要问题 本研讨经过丈量丹参酮本研讨经过丈量丹参酮IIA对缺血再灌注对缺血再灌注大鼠心肌组织缺血修饰白蛋白大鼠心肌组织缺血修饰白蛋白IMA、心、心型脂肪酸结合蛋白型脂肪酸结合蛋白h-FABP表达情况的表达情况的影响，研讨丹参酮影响，研讨丹参酮IIA减轻缺血再灌注心律失减轻缺血再灌注心律失常的作用机理及对缺血再灌注损伤心肌的维常的作用机理及对缺血再灌注损伤心肌的维护作用。护作用。 本研讨拟采用安康本研讨拟采用安康Wistar大鼠大鼠50只，只，采用随机数字表法分为采用随机数字表法分为5组，假手术组、模组，假手术组、模型组、丹参酮型组、丹参酮

3、IIA高剂量高剂量20mgkg-1d-1中剂量中剂量10mgkg-1d-1、低剂量组、低剂量组5mgkg-1d-1. 假手术组和模型组给予生理盐水，高假手术组和模型组给予生理盐水，高中低三组分别给予相应药物灌胃中低三组分别给予相应药物灌胃7d，末次，末次给药给药2h后，除假手术组外均进展心肌缺血后，除假手术组外均进展心肌缺血的造模，记录各组大鼠的心肌组织缺血修的造模，记录各组大鼠的心肌组织缺血修饰白蛋白、心型脂肪酸结合蛋白以及心肌饰白蛋白、心型脂肪酸结合蛋白以及心肌细胞凋亡相关基因蛋白的表达情况。细胞凋亡相关基因蛋白的表达情况。国内外研讨现状和开展动态国内外研讨现状和开展动态 自1943年心肌

4、缺血再灌注损伤的概念提出后，对损伤的发活力理以及预防、治疗措施的探求不断受医学界注重，如何减轻再灌注损伤曾经成为医学界的研讨热点之一。 近些年来，中药在抗心律失常方面获得很大进展，其中以中药丹参为主要成分的丹参片、复方丹参滴丸等药物不断位于一线药物行列。工程的创新点和特征 正常人体中并不存在心肌组织缺血修饰白蛋白，但是在心肌缺正常人体中并不存在心肌组织缺血修饰白蛋白，但是在心肌缺血血510min后血中即可升高，缺血停顿后可继续后血中即可升高，缺血停顿后可继续24h，12h后恢复后恢复正常。缺血修饰白蛋白诊断心肌缺血的敏感性很高，能在心肌缺血正常。缺血修饰白蛋白诊断心肌缺血的敏感性很高，能在心肌

5、缺血早期可逆阶段被检出，因此缺血修饰白蛋白成为第一个被早期可逆阶段被检出，因此缺血修饰白蛋白成为第一个被FDA(美美国食品和药物管理局国食品和药物管理局)同意销售的心肌缺血标志物。冠心病患者经同意销售的心肌缺血标志物。冠心病患者经皮冠状动脉介入治疗也可导致血液循环皮冠状动脉介入治疗也可导致血液循环IMA中程度一过性升高。中程度一过性升高。 心型脂肪酸结合蛋白具有高度心脏特异性心型脂肪酸结合蛋白具有高度心脏特异性(也就是主要在心脏组也就是主要在心脏组织中表达织中表达)，但在心脏以外的组织中也有低浓度表达。心肌缺血性，但在心脏以外的组织中也有低浓度表达。心肌缺血性损伤出现后，损伤出现后，h-FAB

6、P可以早在胸痛发作后可以早在胸痛发作后1-3小时在血液中被发现，小时在血液中被发现，6-8小时到达峰值而且血浆程度在小时到达峰值而且血浆程度在24-30小时内恢复正常。小时内恢复正常。 在本研讨中：经过缺血再灌注实验后，察看在本研讨中：经过缺血再灌注实验后，察看模型组大鼠心肌缺血损伤目的模型组大鼠心肌缺血损伤目的IMA和和H-FABP于实于实验有何不同，并察看不同浓度丹参酮验有何不同，并察看不同浓度丹参酮IIA溶液灌胃溶液灌胃对缺血再灌注大鼠心肌组织中对缺血再灌注大鼠心肌组织中IMA和和H-FABP的含的含量控制与丹参酮量控制与丹参酮IIA溶液浓度的相关性；记录模型溶液浓度的相关性；记录模型组

7、大鼠的心律失常和组大鼠的心律失常和T波变化幅度，并与假手术波变化幅度，并与假手术组、高中低三组对比，可显示大鼠发生心肌缺血组、高中低三组对比，可显示大鼠发生心肌缺血再灌注后，心肌组织构造损伤明显，心律失常显再灌注后，心肌组织构造损伤明显，心律失常显著发生严重，假设实验组大鼠心肌细胞构造损伤著发生严重，假设实验组大鼠心肌细胞构造损伤明显减轻，心律失常显著改动，提示丹参酮明显减轻，心律失常显著改动，提示丹参酮IIA对对心肌缺血再灌注损伤以及心律失常具有良好的防心肌缺血再灌注损伤以及心律失常具有良好的防治作用。治作用。工程的技术道路、进度安排及预期成果工程的技术道路、进度安排及预期成果 技术道路技术

8、道路: (1)动物级分组动物级分组 安康雄性安康雄性Wistar大鼠大鼠50只，体重只，体重250300g，平均体重，平均体重27313.6g；采用随机数字表法分为；采用随机数字表法分为5组，假手术组组，假手术组F组、模型组组、模型组(M组组)、丹参酮、丹参酮A高剂量高剂量HT组，组，20mgkg-1d-1、中剂量、中剂量MT组，组，10mgkg-1d-1、低剂量组低剂量组LT组，组，5mgkg-1d-1。 (2)造模及给药方法造模及给药方法 五组大鼠于实验前五组大鼠于实验前7d开场进展顺应性喂养，开场进展顺应性喂养，F组和组和M组给组给予生理盐水，予生理盐水，HT、MT、LT三组分别按三组分

9、别按20mgkg-1d-1、10mgkg-1d-1、5mgkg-1d-1规范将丹参酮规范将丹参酮A灌胃灌胃7d，末次给药末次给药4h后，除后，除F组不采取冠脉结扎外，其他四组大鼠组不采取冠脉结扎外，其他四组大鼠结扎冠状动脉左前降支结扎冠状动脉左前降支15min后松开使再灌注后松开使再灌注30min制备制备模型。模型。 (3)目的检测方法目的检测方法 实验终了后取大鼠左心室心肌，经预冷的生理盐实验终了后取大鼠左心室心肌，经预冷的生理盐水洗涤后水洗涤后-80保管备用，检测时取保管备用，检测时取0.2 g心肌组心肌组织剪碎后参与织剪碎后参与4倍体积的裂解液，匀浆提取心肌倍体积的裂解液，匀浆提取心肌组

10、织总蛋白，然后转入组织总蛋白，然后转入EP管，管，4静置静置0.5h，12000 rmin、4离心离心0.5h，取上清按，取上清按bradford法进展蛋白质定量，法进展蛋白质定量，IMA、h-FABP程度程度定量检测采用双抗体两步夹心定量检测采用双抗体两步夹心ELISA法法,IMA检测检测灵敏度为灵敏度为1.0 mgmL，h-FABP检测灵敏度为检测灵敏度为0.01 ngml。 (4)统计学分析统计学分析 一切搜集数据录入一切搜集数据录入Excel2003，在，在spss17.0中进中进展统计分析。计量资料以展统计分析。计量资料以s表示，多组间比表示，多组间比较采用单要素方差分析，组间两两比较采用较采用单要素方差分析，组间两两比较采用LSD-t检验。检验水准取检验。检验水准取=0.05。 进度安排：进度安排： 2021年年5-8月月 实验前期预备，资料搜集、设备采购、实实验前期预备，资料搜集、设备采购、实验动物采购等，完成开题报告；验动物采购等，完成开题报告； 2021年年9月月-2021年年2月月 进展动物实验，采