G试验检测及鲎试验检测

1、 一一. g. g试验与鲎试验检测原理试验与鲎试验检测原理 二二. g. g试验试验深部真菌感染检测深部真菌感染检测 三三. . 鲎试验检测鲎试验检测革兰氏阴性菌感染检测革兰氏阴性菌感染检测 四四. . g试验采样及结果分析参考试验采样及结果分析参考 一.g试验与鲎试验 鲎是地球上最古老的海洋生物之一，已有三亿多年的历史， 人们称它为“活化石”。 研究发现，鲎的循环细胞（阿米巴细胞）中含有一研究发现，鲎的循环细胞（阿米巴细胞）中含有一种特殊的凝固酶原。这种凝固酶原可以被自然界广泛存在种特殊的凝固酶原。这种凝固酶原可以被自然界广泛存在的两种物质激活为凝固酶，从而导致一系列的生化反应。的两种物质激

2、活为凝固酶，从而导致一系列的生化反应。这两种物质就是这两种物质就是脂多糖脂多糖(lps)(lps)和和(1-3)-(1-3)- -d-d葡聚糖。葡聚糖。 人们利用鲎的阿米巴细胞溶胞物制备成了鲎试剂。人们利用鲎的阿米巴细胞溶胞物制备成了鲎试剂。通常称使用鲎试剂检测脂多糖（通常称使用鲎试剂检测脂多糖（lpslps）的试验为的试验为鲎试验。鲎试验。使用鲎试剂检测使用鲎试剂检测(1-3)-(1-3)- -d-d葡聚糖葡聚糖的试验为的试验为g g试验。试验。 鲎试验反应机理鲎试验反应机理 二二 g g试验试验深部真菌感染检测深部真菌感染检测侵袭性真菌感染（侵袭性真菌感染（ifi）的定义）的定义侵袭性真菌

3、感染的特点侵袭性真菌感染的特点侵袭性真菌感染的现状侵袭性真菌感染的现状湛江安度斯生物有限公司湛江安度斯生物有限公司820围产期围产期828真菌真菌101053胃肠道胃肠道1305围产期围产期91259结核结核1277肝胆管肝胆管82370真菌真菌1377胃肠道胃肠道74596肝胆管肝胆管1402细菌性脑膜炎细菌性脑膜炎65577心脏心脏2333肺结核肺结核513, 413肾脏肾脏/泌尿道泌尿道2486心脏心脏416, 524hiv/aids8006肾脏肾脏/泌尿道泌尿道322, 396败血症败血症9438败血症败血症287,181呼吸道呼吸道56, 966呼吸道呼吸道1死亡人数死亡人数感染类型

4、感染类型死亡人数死亡人数感染类型感染类型19971980美国死于感染性疾病的十大原因美国死于感染性疾病的十大原因真菌感染的死亡率上升了真菌感染的死亡率上升了3.43.4倍倍 （死亡率：（死亡率：0.72.4 /100,000）侵袭性真菌病已变得越来越常见侵袭性真菌病已变得越来越常见美国西弗吉尼亚大学医院深部真菌感染美国西弗吉尼亚大学医院深部真菌感染危险因素评分危险因素评分临床危险因素临床危险因素 分值分值广谱抗生素应用广谱抗生素应用4天天 5胃肠道手术胃肠道手术 5中心静脉置管中心静脉置管 5驻留驻留icu 4天天 5应用抗生素应用抗生素=4天，体温仍天，体温仍38 5血液系统恶性肿瘤血液系统

5、恶性肿瘤 5实体肿瘤实体肿瘤 3糖尿病糖尿病 3留置尿管留置尿管 3机械通气机械通气48h 3完全肠外营养（完全肠外营养（tpn） 3粒细胞减少（粒细胞减少（1000/mm3） 3低血压低血压 3创伤创伤 3反复收住反复收住icu 3外周静脉置管外周静脉置管 1g试验的临床意义试验的临床意义 三三 鲎试验检测鲎试验检测革兰氏阴性菌感染检测革兰氏阴性菌感染检测细菌内毒素为革兰氏阴性菌细胞壁中的脂多糖成分,内毒素血症产生原因内毒素血症产生原因l 内毒素血症： 由于血中细菌或病灶内细菌释放出大量内l 毒素至血液，或输入大量内毒素污染的液体而引起。分为 内源性和外源性两类内源性内源性内毒素血症发生的原

6、因内毒素血症发生的原因1. 1.肠道内毒素的吸收：正常机体内菌落失调后，肠道内内毒素可被大量吸收入血。肠道内毒素的吸收：正常机体内菌落失调后，肠道内内毒素可被大量吸收入血。2. 2.败血症时血中细菌的释放：革兰阴性杆菌败血症时，细菌在机体血液内大量繁殖，败血症时血中细菌的释放：革兰阴性杆菌败血症时，细菌在机体血液内大量繁殖，死亡解体的细菌可释放出大量内毒素。死亡解体的细菌可释放出大量内毒素。3. 3.有效的抗菌治疗后：由于血中细菌大量死亡崩解，可加重内毒素血症。因此，在有效的抗菌治疗后：由于血中细菌大量死亡崩解，可加重内毒素血症。因此，在临床上可能出现感染控制而以器官损害为特点的病情继续恶化的

7、情况，此时需临床上可能出现感染控制而以器官损害为特点的病情继续恶化的情况，此时需要抗内毒素治疗。要抗内毒素治疗。内毒素检测的临床意义内毒素检测的临床意义 检测血浆和体液中的内毒素含量对诊断革兰阴性细菌感染诊断革兰阴性细菌感染有重要的临床参考意义。 全身性细菌感染：全身性细菌感染主要见于败血症。革兰阴性细菌性败血症全身性细菌感染主要见于败血症。革兰阴性细菌性败血症尤常并发内毒素血症尤常并发内毒素血症。对患者进行血浆内毒素测定，可以指导治疗，及时控制感染。 原因不明的发热原因不明的发热：四四. . g试验采样及结果分析参考试验采样及结果分析参考l 【标本采集及送检要求】【标本采集及送检要求】l 标

8、本采集要求：1）采集过程要求无菌操作，用指定的肝素类抗凝、无菌、无葡聚糖采血管；2）常规住院病人早上用药前空腹采血，血透患者透析前采血。l 标本的送检和保存要求：l 标本采集后应在半小时内离心，4小时内检测完。若当日不能及时检测的标本应将离心后的血浆转移至无葡聚糖的容器内-20以下冷冻保存，一周内使用。l 【试剂溶液保存】【试剂溶液保存】l 复溶后的试剂溶液应在10分钟内使用。若当次试验有剩余，可将剩余的试剂溶液置-20以下冷冻保存，一周内使用。不能反复冻融试剂溶液。l【假阳性因素假阳性因素】l （1-3）-d葡聚糖污染。使用非试剂厂家提供的采血管、反应试管、吸头等容易受（1-3）-d葡聚糖污

9、染；l 某些纤维素透析膜污染，如血液透析、腹膜透析等；l g试验前注射过香菇多糖、脂肪乳,双黄连,生脉，黄芪 注射液等药物。白蛋白等血制品l 纱布，或其它医疗物品（外科手术）l 连续检测有助于降低假阳性的发生，葡聚糖的测定值在连续监测中出现快速较大幅度连续检测有助于降低假阳性的发生，葡聚糖的测定值在连续监测中出现快速较大幅度的变化提示假阳性，尤其是对还未开始抗真菌治疗的患者的变化提示假阳性，尤其是对还未开始抗真菌治疗的患者l 【假阴性因素】【假阴性因素】l 不敏感菌不敏感菌：某些真菌如接合菌（毛霉菌、根霉菌）细胞壁没有（1-3）-d 葡聚糖成分；隐球菌细胞壁外有荚膜致使（1-3）-d 葡聚糖释

10、放不出，这些真菌g试验不能检测。有临床症状，但g试验阴性时，临床医生可考虑这两种真菌感染的可能。l 定植菌定植菌：研究显示，定植真菌不引起患者血液的（1-3）-d 葡聚糖升高，即使是严重定植。因此g试验阴性可以区分真菌定植或侵袭性感染。l 检检 测测 结结 果果 分分 析析1.阴性结果 d100.5pg/ml；如患者出现宿主因素72小时再小时再次检测次检测2.弱阳性结果 100.5d151.5pg/ml；624小时内复查确认，小时内复查确认，g试验试验动态监测动态监测。加以用药治疗。 高危患者建议每周检测高危患者建议每周检测2-3次次 检测结果一定要结合临床分析检测结果一定要结合临床分析,不可孤立不可孤立l 【假阳性因素】【假阳性因素】l 脂多糖污染。使用非试剂厂家提供的采血管、反应试管、吸头等容易受脂多糖污染；l 某些纤维素透析膜污染，如血液透析、腹膜透析等；l 鲎试验前注射过脂肪乳等药物。l 【假阴性因素】【假阴性因素】l 定植菌：研究显示，定植革兰氏阴性菌不引起患者血液的脂多糖升高，即使是严重定植。因此鲎试验阴性可以区分革兰氏阴性菌定植或侵袭性感染。l 感染严重程度：人体局部，浅部革兰氏阴性菌感染时，因病菌释放脂多糖不入血或入血少，人体自身免疫系统能给予清除。l 检检 测测 结结 果果 分分 析析1.阴性结果 d0.053eu/ml，阴性结果 如患者出现宿主