免疫组化技术ppt课件

1、1组织化学技术组织化学技术 2 组织化学：组织化学：345678910111213 14加过氧化物酶标定的链菌素亲生物素，加过氧化物酶标定的链菌素亲生物素，37370 0C C，30min30min；以上每步后均用以上每步后均用PBSPBS液洗液洗3 33min3min；用过氧化物酶基质液（用过氧化物酶基质液（DABDAB基质液）显色基质液）显色5 515min15min。在光镜下观察。在光镜下观察。自来水冲洗，苏木素浅染，自来水冲洗还蓝，自来水冲洗，苏木素浅染，自来水冲洗还蓝， 梯度酒精脱水，干燥，二甲苯梯度酒精脱水，干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。透明，中性树胶封固。1516多聚多聚-L-

2、L-赖氨酸；赖氨酸；硫酸铬钾明胶液。硫酸铬钾明胶液。1718 过高，过低均会导致阴性结果。过高，过低均会导致阴性结果。 即用型抗体；即用型抗体； 浓缩型。浓缩型。19 非特异性染色：非特异性染色： 原因：原因： 方法：方法：20对照：对照： 阳性对照：用一直抗原阳性的切片与待测标本同时进行免疫细胞阳性对照：用一直抗原阳性的切片与待测标本同时进行免疫细胞化学染色，阳性对照应呈阳性结果，即为阳性对照。化学染色，阳性对照应呈阳性结果，即为阳性对照。 阴性对照：用不含一直抗原的标本作对照，实验结果为阴性，即阴性对照：用不含一直抗原的标本作对照，实验结果为阴性，即为阴性对照。阴性对照中还包括空白对照、替

3、代对照、吸收和抑制对照等，为阴性对照。阴性对照中还包括空白对照、替代对照、吸收和抑制对照等，用以排除假阳性结果。用以排除假阳性结果。 2122 23淋巴细胞标记物：淋巴细胞标记物：白细胞共同抗原（白细胞共同抗原（LCA, CD45LCA, CD45）：主要分布于）：主要分布于T, BT, B细胞，细胞， 单核细胞，粒细胞表面。单核细胞，粒细胞表面。CD20CD20： B B细胞标记物。细胞标记物。CD45ROCD45RO、CD3CD3：T T细胞标记物。细胞标记物。CD57CD57：为自然杀伤细胞的标记物。：为自然杀伤细胞的标记物。CD38CD38：为浆细胞的标记物。：为浆细胞的标记物。CD6

4、8CD68：主要标记各种组织中的巨噬细胞。：主要标记各种组织中的巨噬细胞。24神经内分泌标记物：神经内分泌标记物：嗜铬素嗜铬素A A（Chromogranin, CgAChromogranin, CgA）：）： 存在于神经元，神经内分泌细胞及其肿瘤中。存在于神经元，神经内分泌细胞及其肿瘤中。突触素（突触素（Synaptophysin, SySynaptophysin, Sy）：）： 存在于神经元突触前囊泡膜上，肾上腺髓质细胞，存在于神经元突触前囊泡膜上，肾上腺髓质细胞， 神经内分泌细胞中。神经内分泌细胞中。髓磷脂硷性蛋白（髓磷脂硷性蛋白（Myelin basic protein, MBPMye

5、lin basic protein, MBP）：）： 25激素及激素受体类标记：激素及激素受体类标记：雄激素受体（雄激素受体（Androgen receptor, ARAndrogen receptor, AR）：）：雌激素受体（雌激素受体（Estrogen receptor, EREstrogen receptor, ER）孕激素受体（孕激素受体（Progesterone receptor, PRProgesterone receptor, PR）：）：垂体激素：垂体激素： ACTH, GH, PRL, LH, TSH ACTH, GH, PRL, LH, TSH 主要用于垂体腺瘤的功能分类

6、。主要用于垂体腺瘤的功能分类。降钙素（降钙素（Calcitotin, CTCalcitotin, CT）：）： 甲状腺旁细胞（甲状腺旁细胞（C C细胞）分泌。细胞）分泌。 26以上抗体及标记物主要用于疾病的病理诊断和鉴别诊断以上抗体及标记物主要用于疾病的病理诊断和鉴别诊断 其联合应用的作用和意义：其联合应用的作用和意义：Keratin Vimentin 上皮性肿瘤 Keratin 滑膜肿瘤 Vimentin 间皮肿瘤 上皮样肉瘤 癌肉瘤 27 Desor Actin 肌源性肿瘤肌源性肿瘤 CD34or F 血管性肿瘤血管性肿瘤 Keratin S-100or MBP 神经鞘膜瘤神经鞘膜瘤Vim

7、entin LCA 淋巴细胞淋巴细胞 AACT 骨肿瘤、纤维组织细胞肿瘤骨肿瘤、纤维组织细胞肿瘤 GFAP 胶质细胞肿瘤胶质细胞肿瘤 Keratin NSEor Sy Vimentin NF 节细胞神经母细胞瘤节细胞神经母细胞瘤28免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断原则：免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断原则：免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断，必须以免疫组化用于病理诊断及鉴别诊断，必须以HEHE染色的染色的 形态学为基础，免疫组化只能作为辅助手段。不能把形态学为基础，免疫组化只能作为辅助手段。不能把 免疫组化染色作为诊断的免疫组化染色作为诊断的“金标准金标准”。免疫组化对良、恶性的判断仅供参考。免疫组化对良、恶性的判断仅供参考。 免疫组化用于判断组织起源，分型，预后的估计。免疫组化用于判断组织起源，分型，预后的估计。 免疫组化染色不好或出现相互矛盾的结果时，以形态学为准。免疫组化染色不好或出现相互矛盾的结果时，以形态学为准。29电子显微镜技术：透射电镜电子显微镜技术：透射电镜30透射电