杀菌剂的毒力测定和ppt课件

1、第三节第三节杀菌剂的毒力测定和杀菌剂的毒力测定和田间药效实验田间药效实验一、毒力测定一、毒力测定 杀菌剂对病菌的毒力是指药剂本杀菌剂对病菌的毒力是指药剂本身对病原菌直接作用的性质和程度，身对病原菌直接作用的性质和程度，它是在严厉控制条件下测定的，常它是在严厉控制条件下测定的，常用有效中量用有效中量ED50表示，是指抑表示，是指抑制制50%病菌孢子萌生所需的剂量或病菌孢子萌生所需的剂量或有效中浓度有效中浓度EC50。 杀菌剂的毒力测定方法很多，长杀菌剂的毒力测定方法很多，长期采用经典的离体平板法，即以孢期采用经典的离体平板法，即以孢子萌生，抑制孢子发芽率或菌丝生子萌生，抑制孢子发芽率或菌丝生长、

2、变色、变形等目的作为毒力衡长、变色、变形等目的作为毒力衡量的规范。量的规范。 但近代随着新型内吸杀菌剂的开展，对杀菌剂的生物挑选但近代随着新型内吸杀菌剂的开展，对杀菌剂的生物挑选逐渐由经典的离体挑选趋向活体挑选。逐渐由经典的离体挑选趋向活体挑选。 由于它不仅模拟田间实践，同时可以防止那些在离体平板由于它不仅模拟田间实践，同时可以防止那些在离体平板上无效，而必需在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。上无效，而必需在植物活体上方显示活性的化合物漏筛。 但活体挑选涉及的要素较多，对寄主植物、实验条件要求但活体挑选涉及的要素较多，对寄主植物、实验条件要求较高，如光照、湿度、温度，为控制病原菌与寄主相互作

3、用的较高，如光照、湿度、温度，为控制病原菌与寄主相互作用的条件，必需有适宜的温室，费工耗资都较大。条件，必需有适宜的温室，费工耗资都较大。 离体测定能反映化合物毒力的本质和程度，方法简便，为离体测定能反映化合物毒力的本质和程度，方法简便，为研制新农药不可短少，但它存在有一点缺陷，应该和温室活体研制新农药不可短少，但它存在有一点缺陷，应该和温室活体的盆栽实验结合起来。的盆栽实验结合起来。1 1孢子萌生测定法孢子萌生测定法 有载玻片萌生法及平板培育基培育法。有载玻片萌生法及平板培育基培育法。 即将不同的药液喷布于玻片外表或平板上，即将不同的药液喷布于玻片外表或平板上，定量定量 滴加孢子悬浮液，药液

4、与悬浮液接触后，经一滴加孢子悬浮液，药液与悬浮液接触后，经一定培育定培育时间，镜检孢子萌生的百分率，载玻片法适宜时间，镜检孢子萌生的百分率，载玻片法适宜于水溶于水溶性较好的维护剂，能计算单位面积药液的堆积性较好的维护剂，能计算单位面积药液的堆积量及药量及药液浓度，接近实践条件，但对萌生时需氧较多液浓度，接近实践条件，但对萌生时需氧较多的病原的病原菌不适用。菌不适用。 平板萌生适用于不易分解的维护剂，根据平板萌生适用于不易分解的维护剂，根据测定对象生长需求的配方来制备适宜的培育基，测定对象生长需求的配方来制备适宜的培育基，由于孢子在培育基的外表能得到较充足的空气，由于孢子在培育基的外表能得到较充

5、足的空气，萌生时不致因短少氧而受影响。萌生时不致因短少氧而受影响。2 2抑菌圈法抑菌圈法 广泛地运用于真菌细菌的杀菌剂挑选，根广泛地运用于真菌细菌的杀菌剂挑选，根本原理是将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼本原理是将病原菌孢子或菌丝的悬浮液与琼脂培育基混匀冷凝后，在培育基平面放上消脂培育基混匀冷凝后，在培育基平面放上消毒的并蘸有不同浓度药剂的圆形滤纸片直毒的并蘸有不同浓度药剂的圆形滤纸片直径径6mm6mm左右，或放特制的直径左右，或放特制的直径8mm8mm高高10mm10mm的的不锈钢环，将配好的药液定量加不锈钢环，将配好的药液定量加 在钢环内，在钢环内，经定温培育一定时间后，由于药剂的扩经定温培育

6、一定时间后，由于药剂的扩 散作散作用，使病菌生长遭到抑制，即构成用，使病菌生长遭到抑制，即构成“抑菌圈。抑菌圈。 丈量抑菌圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。丈量抑菌圈的大小，以比较杀菌剂的毒力。3 3生长速率测定法生长速率测定法 即在琼脂培育基中参与药液，冷凝即在琼脂培育基中参与药液，冷凝后接菌的方法，用木塞钻孔器切取正常后接菌的方法，用木塞钻孔器切取正常培育基上的供试菌丝体，放在平板上培育基上的供试菌丝体，放在平板上也称菌碟，经一定时间后察看丈量也称菌碟，经一定时间后察看丈量菌落生长速率，一定时间菌落直径的长菌落生长速率，一定时间菌落直径的长度与对照组比较，求出抑制百分率，绘度与对照组比较，求出

7、抑制百分率，绘浓度对数浓度对数-抑制百分率毒力曲线图，抑制百分率毒力曲线图，以以ED50ED50来比较毒力程度。来比较毒力程度。 平板测定是室内杀菌剂活性测定最常用的方法，优点是条件比较一致，影响因子比较单一，活性效应显现较快，缺陷是有时与活体测定结果不一致，有时会漏筛或误筛，如用粉锈宁处置大麦白粉病菌，离体测定不仅分生孢子能萌生且能构成吸器，但此药在活体上却表现高效。所以初筛手段不采用平板法，采用盆栽法，即病原-寄主植物组合法。 2 2盆栽方法盆栽方法 在温室内进展的，详细方法随各种不在温室内进展的，详细方法随各种不同病害而异，例：小麦赤霉病采用分生同病害而异，例：小麦赤霉病采用分生孢子孢子

8、-幼苗组合法，根据杀菌剂物不同幼苗组合法，根据杀菌剂物不同作用机理，有测定以下作用的方法。作用机理，有测定以下作用的方法。 1 1维护作用；维护作用；2 2治疗作用；治疗作用； 3 3内吸作用。内吸作用。1 1维护作用：维护作用： 普通经定量喷雾法处置供试植物，喷药普通经定量喷雾法处置供试植物，喷药后间隔一定的时间再接种方法很多，如多后间隔一定的时间再接种方法很多，如多针接种，剪叶法或将菌丝块贴在叶片上等，针接种，剪叶法或将菌丝块贴在叶片上等，坚持发病所需的温、湿度条件，发病后再按坚持发病所需的温、湿度条件，发病后再按病情分级规范进展统计，以病叶率，病情指病情分级规范进展统计，以病叶率，病情指

9、数增长等目的判别药效。数增长等目的判别药效。2 2治疗作用：治疗作用： 测定方法是先在植株上接菌，保温，测定方法是先在植株上接菌，保温，保湿一定时间，待病菌菌丝侵入或始见保湿一定时间，待病菌菌丝侵入或始见发病，再进展喷药处置，其他调查统计发病，再进展喷药处置，其他调查统计方法同上。方法同上。3 3内吸作用：内吸作用： 测定根的内吸输导实验，可以采用水培的稻株或棉测定根的内吸输导实验，可以采用水培的稻株或棉株，在营养液中加定量的药剂，待株，在营养液中加定量的药剂，待24h24h或或48h48h后进展接后进展接菌，发病后调查，假设以土培盆栽方法，那么药液定菌，发病后调查，假设以土培盆栽方法，那么药

10、液定量灌入土中，程序与上一样。量灌入土中，程序与上一样。 持效期的实验：持效期的实验： 以上各种方法，用先喷药后接菌或先接菌后喷药，以上各种方法，用先喷药后接菌或先接菌后喷药，间隔不同日期进展处置，可以测定杀菌剂残效。间隔不同日期进展处置，可以测定杀菌剂残效。 剪叶法分级规范：剪叶法分级规范： 0 0级不发病；级不发病；1 1级剩余叶面级剩余叶面1/41/4；2 2级剩级剩余叶面余叶面1/4-1/21/4-1/2；3 3级剩余叶面级剩余叶面1/21/2；4 4级全级全部发病。部发病。 二、有效中量的测定二、有效中量的测定 抑制百分率抑制百分率=50%=50%，机率值，机率值=5=5 将将5 5代入回归方程，然后求其反对数，即代入回归方程，然后求其反对数，即LD-P-LD-P-LineLine剂量对数剂量对数-机率值直线。机率值直线。 ED50ED50可以作为多种药剂对同一病菌等效剂量的毒可以作为多种药剂对同一病菌等效剂量的毒力比较，在一定的范围内可以用它来衡量一种药剂力比较，在一定的范围内可以用它来衡量一种药剂对病原菌毒力的大小，但不能做为田间防治的实践对病原菌毒力的大小，但不能做为田间防治的实践目的。目的。三、田间实验三、田间实验 室内挑选的药剂必需进展室内挑选的药剂必需进展田间