M蛋白的鉴定及实验分析.doc

1、M蛋白的鉴定及实验分析【关键词】 M 蛋白；免疫球蛋白；分析Identify and Experimental Analysis of M ProteinKey words:M protein; Immune globin; AnalysisM 蛋白 ( 骨髓瘤蛋白 ) 细胞大量增殖产生的具有相同氨基酸顺序和蛋白质结构的免疫球蛋白 (Ig) 分子或其片段 , 临床上常见于多发性骨髓瘤 (MM)、原发性巨球蛋白血症、 重链病 、原发性淀粉样变性、 意义未明的单克隆丙种球蛋白血症等淋巴细胞或浆细胞克隆增殖性疾病 1。M蛋白是单克隆免疫球蛋白的缩写 , 也称副蛋白、骨髓瘤蛋白、M 成份。对此病只有采

2、取较好实验室方式与正确实验分析相结合，才能为临床提供靠得住依据。1 血清区带电泳技术是临床实验室对蛋白质进行的一种剖析技术。它能够对血清或其他体液中异样蛋白质进行挑选。它是以区带电泳为基础在一种适合的支持介质琼脂糖上进行的电泳。 血清蛋白质在给定的pH条件下要紧依照其所带电荷数将其分离成各类片段。正常人血清的区带电泳结果和扫描图像从左至右的 5 个区带依次为白蛋白及一、二、和球蛋白区。有时在慢电泳时球蛋白可分为 1 球蛋白和 2 球蛋白。白蛋白区的成份包括白蛋白、 前白蛋白和部份 1 脂蛋白 ; 1 区包括 1 抗胰酶蛋白、 1 脂蛋白、 c 球蛋白 ; 2 区包括触珠蛋白、铜蓝蛋白、2 巨球

3、蛋白等 ; 1 区包括转铁蛋白、 补体 3、Ig 、血结素等; 2 区包括 3、 Ig ; 区包括 Ig 、 Ig 、 CRP等。多克隆免疫球蛋白增殖性疾病各类 Ig 均增加 , 相应的其他区带会减少 , 肝炎和系统性红斑狼疮等 , 由于和区大量增殖隙消失 , 成为 桥 , 亦称 联 , 扫描时消失峰。多见于肝硬化、慢性, 致使两区之间的间, 显现一高而宽的免疫缺点症时会显现无峰或低峰。蛋白血症特点是区带窄而浓, 扫描峰高而尖 , 基底部窄 , 在区高与宽的比例 2, 区那么 1( 正常时小于此比例 ), 其他区带明显减少。蛋白量少时常被其他蛋白掩盖可用稀释血清的方式解决, 在进行血清区带电泳

4、时, 有时会显现假性蛋白条带 , 现在那么需要进行免疫电泳和免疫固定检测以资甄别。显现假性蛋白条带的情形包括: 当血液凝固不完全 , 血清中含有纤维蛋白原；血管内溶血时血清内血红蛋白结合珠蛋白含量增高 ; 缺铁性贫血时血清转铁蛋白浓度升高；某些应急状态下球蛋白浓度增加及先本性高脂蛋白血症; 双白蛋白血症、白蛋白变异、白蛋白结合青霉素等药物后电泳行为改变。2 免疫球蛋白检测正常人产生免疫球蛋白的浆细胞是多克隆性质合成的免疫球蛋白除 5 种不同重链外， 还只有和轻链，而且 / 比是恒定 2，M 蛋白疾病是骨髓中异样浆细胞极度增生所引发的一种恶性疾病, 初期可无临床病症 , 起病缓慢 , 有的病例临

5、床表现极不典型, 易引发漏诊和误诊。因此血清免疫球蛋白也是M蛋白综合诊断的标准之一。Ig 定量经常使用方式有单向 ( 环状 ) 免疫扩散法、速度散射浊度测定法、火箭免疫电泳法。其中以速度散射浊度测定法最为准确, 且采纳自动化方式使操作方便，速度散射比浊法定量检测Ig 的意义在于确信蛋白所属 Ig 类别及数量，速度动态散射比浊法是抗原抗体结合反映在每一个单位时刻内的速度 , 持续测定各单位时刻的反映速度即为动态观看 , 该法具有速度快、灵敏度高、精准度高、稳固性好的优势。一样M蛋白所属 Ig 含量均显著升高，其他类Ig 那么正常或显著降低。3 尿本周氏蛋白本 周氏蛋白是单克隆游离免疫球蛋白轻链

6、, 它是或轻链的合成超过重链时轻链游离于血清中 , 分子量为 45KD,容易从尿中排出本 周氏蛋白 , 多来源于骨髓浆细胞的恶性增生 , 是由于合成紊乱 , 在生成和分泌完整的免疫球蛋白分子时的过量轻链。 本 周氏蛋白又称凝溶蛋白 , 具有特殊的热沉淀性质 , 在 pH 的条件下 , 加热至 5060 时显现沉淀 , 继续加热至 90后又从头溶解 , 再冷却时又可显现沉淀。过去检测方式中 , 是利用本 周氏蛋白的这种特殊的热沉淀性质检测尿本 周氏蛋白的。这种方式由于存在特异性和灵敏度差的缺点 , 其结果也受诸多因素的阻碍 : 例如沉淀转变需要肉眼观看 , 由于操作进程中人为阻碍因素较多 , 灵

7、敏度较低 , 常致使判定有误差 ; 尿液混浊、尿液中含有过量的其他蛋白和实验进程中受温度转变等可阻碍其结果。本实验能够看出 , 热沉淀反映法应再也不作为本 周氏蛋白的挑选。同时也不能确信轻链的型别。4 免疫固定免疫固定电泳是抗原在载体上电泳后直接用抗血清作用于蛋白,进行抗原抗体反映 , 使抗原在电泳位置上被固定。免疫固定后的区带,应为单一免疫复合物沉淀带 , 依照抗血清的不同 , 可判定未知蛋白为何种成份。在研究蛋白时 , 免疫固定电泳至少要应用 6 种抗血清 , 一是抗全血清抗体 , 其他 5 类别离为、 、和的抗血清。 免疫固定电泳不只对分型成心义 , 同时还可对患者进行初期诊断 , 优于骨髓细胞检查 , 因为骨髓细胞形态检查往往要在患者中晚期多部位多次骨穿 , 并要瘤细胞 >10%才可诊断 , 而免疫固定电泳可弥补这方面的不足 3。在实际工作中 , 往往需要结合几种不同的方式和技术结合，能够使绝大部份的蛋白血症患者取得明确诊断。值得一提的是 , 要对 M 蛋白阳性的患者做出正确的诊断 , 还应将蛋白鉴定的结果与临床资料相结合。【参考文献】1Robert P,Kathy h,Judyc，et of kappa and Lambalightchaindyrate nepbeloetry J.Chinchem,1986 ，32(6):1141.2陆慧琦，屠小卿