第二章杀虫剂生物

1、第三章第三章 杀虫剂生物测定杀虫剂生物测定 一、杀虫剂生物测定的内容一、杀虫剂生物测定的内容 1、新药的杀虫活性筛选、新药的杀虫活性筛选 2、化合物构效关系、化合物构效关系 3、杀虫剂剂型及加工质量与药效关系、杀虫剂剂型及加工质量与药效关系 4、杀虫剂混用及增效剂应用、杀虫剂混用及增效剂应用 5、害虫抗药性研究、害虫抗药性研究 6、农药残留检测、农药残留检测 7、对植物的药害试验、对植物的药害试验 安全性指数安全性指数k=药剂防治病虫害所需最低浓度药剂防治病虫害所需最低浓度/植物植物对药剂能忍受的最高浓度对药剂能忍受的最高浓度 8、对高等动物的毒性试验、对高等动物的毒性试验二、杀虫剂生物测定的

2、影响因素二、杀虫剂生物测定的影响因素 外界因素外界因素 环境因素：环境因素：温度、湿度、光照温度、湿度、光照等对杀杀虫剂的理化性状和昆虫的生理状态虫剂的理化性状和昆虫的生理状态都有影响。 药剂等因素药剂等因素：溶剂、药剂含量、药剂：溶剂、药剂含量、药剂处理部位等处理部位等 。药剂等因素药剂等因素 溶剂：溶剂：不同溶剂对昆虫表皮的穿透率不同，单位时间内药量也不同，在体内的代谢速率也不同，最后到达靶标部位的药量也不同，结果就有明显的差别。 药剂含量：药剂含量：杀虫剂的药剂含量直接影响测量结果，所以一般要求纯度95%以上，或者原药。 药剂处理部位：药剂处理部位：药剂处理部位不同实验结果也不同。如点滴

3、法常因点滴部位不同，得到的毒力不同，点滴部位远则毒力低，以点滴于足或腹部末端毒力最低。一般以点滴胸背面或腹背部为宜。供试体自身因素供试体自身因素 杀虫剂理化性能的变化，能影响对昆虫的毒效。 昆虫的生理状态，如发育阶段发育阶段、性别、性别、营养、世代营养、世代等的不同对杀虫剂有不同的耐药力。 三、目标昆虫三、目标昆虫 标准目标昆虫：标准目标昆虫：是指被普遍采用的、具有一定代表性和经济意义，以及抗药力稳定均匀的农药杀虫毒力和毒效指示试虫群体。 1、完全饲养完全饲养 就是昆虫的整个生活史都是在人为控制条件下完成的。例如斜纹夜蛾（完全变态的昆虫），从卵幼虫蛹成虫。 2、不完全饲养不完全饲养 就是在人工

4、饲养条件下完成部分生活史例如蝗虫（渐变态昆虫），从若虫成虫。饲养可以在室外，也可以在室内进行。 （一）、饲养标准目标昆虫的先决条件（一）、饲养标准目标昆虫的先决条件a:目标昆虫应容易饲养，繁殖力强，不目标昆虫应容易饲养，繁殖力强，不互相残杀，不受季节的限制，能保证互相残杀，不受季节的限制，能保证周年充分供应。周年充分供应。b:供试目标昆虫要求有一定代表性和经供试目标昆虫要求有一定代表性和经济意义。济意义。c:目标昆虫群体的生活力和抗药力要稳目标昆虫群体的生活力和抗药力要稳定和均匀一致定和均匀一致 。d:选用合适的虫期、龄期、年龄的试虫选用合适的虫期、龄期、年龄的试虫群体或混合群体作测试对象。群

5、体或混合群体作测试对象。试虫选用原则试虫选用原则 试虫群体间的虫期比例、虫龄、年龄及虫体大小接近一致，虫龄不宜过大或过小，新羽化的或年龄过大的试虫群体均不宜采用。 鳞翅目幼虫作触杀试验时应用3-4龄，胃毒试验4-5龄，家蝇用3-7d龄成虫，蚜虫以无翅成蚜，棉红蜘蛛以活动型成虫（体色为橘红或鲜红）为宜，不应选用暗（褐）红色的老熟成虫。（二）、饲养标准目标昆虫的注意事项（二）、饲养标准目标昆虫的注意事项 1、种虫、种虫 选生活史、繁殖力和抗病力较强的优良种虫。 2、营养条件、营养条件一般的营养条件是要求有适量的碳水化合物、蛋白质和氨基酸、脂肪和脂肪酸和辅助营养要素基本维生素、昆虫的特殊维生素和矿物

6、质等。3、环境条件、环境条件 温度、湿度温度、湿度 、光照光照 一般移取法一般移取法 趋光法趋光法 麻醉法麻醉法 二氧化碳法、挥发蒸气法二氧化碳法、挥发蒸气法 、冷冻法、乙醚低温麻醉冷冻法、乙醚低温麻醉法法 吸虫法吸虫法 自行迁移法自行迁移法四、目标昆虫的移取方法四、目标昆虫的移取方法杀虫剂的生物测定技术杀虫剂的生物测定技术 1、喷粉及喷雾法、喷粉及喷雾法 优点：简单，测定结果接近于田间实际情况； 缺点：不能避免药剂从口中进入，每头试虫接触的药剂量不能精确计算。 注意事项：药液稍干或虫体粘粉较稳定后才可以移出目标昆虫。要防止试虫逃跑。 真空喷粉器 一、触杀作用（一、触杀作用（contact a

7、ction）测定）测定2、点滴法、点滴法（局部施药法）（局部施药法） 优点：每头虫体点滴量一定，可以准确地计算出每头试虫或每克虫体重的用药量；方法比较精确，试验误差小；可以避免胃毒作用的干扰。 缺点：处理目标昆虫的数量不能太多，准确性在很大程度上决定于昆虫本身的生理状态。点滴部位、点滴大小以及目标昆虫处理前的麻醉方式等都有影响，操作技术难掌握，尤其点滴蚜虫时，点滴操作技术要熟练，否则对结果准确性影响较大3、浸渍法、浸渍法 浸渍法是一种测定杀虫药剂触杀毒力的室内测试技术。因方法简单快速，不需要特殊仪器设备，常用于有效化合物的筛选试验，被联合国粮农组织（fao）推荐为蚜虫抗药性的标准测定方法。 优

8、点：快速、简便，可以同时对大批试虫做不同浓度的处理，适用于多种昆虫。 缺点：不能精确求得每个昆虫或每克虫体重所获药量，浸渍时不能避免少量药液进入试虫消化道和气管，所以测得结果不是单纯的触杀毒力。4、药膜法、药膜法 优点优点：药膜法比较接近实际防治情况、方法简药膜法比较接近实际防治情况、方法简单、操作方便、应用范围广，几乎一切爬行的昆单、操作方便、应用范围广，几乎一切爬行的昆虫都适用，虫都适用，结果比较准确。是目前常用的一种结果比较准确。是目前常用的一种方法。方法。 缺点缺点：药膜法还存在一定局限性，如昆虫的药膜法还存在一定局限性，如昆虫的足部表皮是杀虫药剂穿透的主要部位时，采用药足部表皮是杀虫

9、药剂穿透的主要部位时，采用药膜法测得的毒效就偏高，如家蝇，药膜法的毒效膜法测得的毒效就偏高，如家蝇，药膜法的毒效高于点滴法。对于某些目标昆虫，足部表皮不是高于点滴法。对于某些目标昆虫，足部表皮不是杀虫剂穿透的主要部位或不能穿透的，采用此法杀虫剂穿透的主要部位或不能穿透的，采用此法测得的结果就偏低。测得的结果就偏低。药膜法测得的结果不能表药膜法测得的结果不能表示准确的剂量，即不能表示每克昆虫体重接受的示准确的剂量，即不能表示每克昆虫体重接受的药量，只能用单位面积的药量来表示。而单位面药量，只能用单位面积的药量来表示。而单位面积的药量并不等于药剂进入虫体的剂量。积的药量并不等于药剂进入虫体的剂量。

10、药膜法主要有以下几种方法：药膜法主要有以下几种方法： 滤纸药膜法滤纸药膜法 培养皿药膜法培养皿药膜法 玻璃容器药膜法玻璃容器药膜法 蜡纸药膜法蜡纸药膜法二、二、 杀虫剂胃毒作用毒力测定杀虫剂胃毒作用毒力测定 昆虫在取食正常食物的同时将药剂摄入消化道，经肠壁细胞吸收进入血液，随血液循环到达作用部位而使昆虫中毒。它利用昆虫的贪食性，因此要尽量避免药剂与昆虫体壁接触而产生其它毒杀作用。测定方法有 1、无限取食法、无限取食法饲料混药喂虫法饲料混药喂虫法培养基混药法培养基混药法 土壤混药法土壤混药法 2、定量取食法、定量取食法 液滴饲喂法；口腔注射法；叶片夹毒法；机率值分析法（改进叶片夹毒法）根部内吸法

11、根部内吸法茎部内吸法茎部内吸法种子内吸法种子内吸法 叶部内吸法叶部内吸法三、杀虫剂内吸作用毒力测定三、杀虫剂内吸作用毒力测定四、四、 杀虫剂熏蒸作用毒力测定杀虫剂熏蒸作用毒力测定 熏蒸时，毒剂主要以气态从昆虫的气门进入气管，再分布到全身的气管，然后到达神经作用部位。 测定熏蒸剂毒力时，温度对毒力的影响极大。 一方面温度影响了药剂的挥发和扩散， 另一方面温度影响了试虫的新陈代谢，影响气门开闭的程度和频率，从而影响熏蒸剂进入昆虫体内的量。 湿度对毒力也有一定影响。一般以温度25，相对湿度70为宜。熏蒸作用主要的实验方法：熏蒸作用主要的实验方法： 二重皿熏蒸法二重皿熏蒸法 干燥器熏蒸法干燥器熏蒸法

12、广口瓶法广口瓶法 药纸熏蒸法药纸熏蒸法 三角瓶法三角瓶法五五 昆虫拒食活性的测定昆虫拒食活性的测定 昆虫拒食剂，简单地讲，就是可以干扰或抑制昆虫取食行为的物质。 近年来，拒食作用机理的研究进展很快。昆虫的嗜食性基本上是由位于昆虫的触角、下颚须、下唇须上的感化器功能所决定的，感化器将食物的特性转变成电信号传入中枢神经系统，从而决定取食与否。拒食剂的作用可能正是干扰了这些感化器的正常功能。 目前，国内外广泛采用的测定拒食活性的主要方法有4种：叶碟法及改良叶碟法、体重法、排泄物质法及电讯号法。 选择拒食活性选择拒食活性：将处理叶碟和2张对照叶碟交错放入一个培养皿；在培养皿中央放进一头饥饿的试虫。要求试虫