食品中霉菌酵母菌数的测定

1、一、采样1、粮食(包括粮库贮粮，粮店或家庭小量存粮)样品的采集，可根据粮囤或粮垛的大小和类型，分层定点取样，一般可分三层五点，或分层随机采取不同点的样品，充分混合后，取500g左右送检。小量存粮可使用金属小勺采取上、中、下各部位的混合样品。n2、海运进口粮的采样：每一船仓采取表层、上层、中层及下层四个样品，每层从五点取样混合，如船仓盛粮超过10000t，则应加采一个样品。必要时采取有疑问的样品送检。3、谷物加工制品(包括熟饭、糕点、面包等)、发酵食品、乳及乳制品以及其他液体食品，用灭菌工具采集可疑霉变食品250g，装入灭菌容器内送检。二、样品处理（稀释）二、样品处理（稀释）。或放入。或放入盛有

2、盛有225 ml 225 ml 无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击式均质器拍打式均质器拍打2min2min，制成，制成1:10 1:10 的样品匀的样品匀液。液体样品：以无菌吸管吸取液体样品：以无菌吸管吸取25 ml 样品至样品至盛有盛有225 ml 无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，预置适当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成制成1:10 的样品匀液。的样品匀液。3、取、取1 ml 1:10 稀释液注入含有稀释液注入含有9 ml 无菌水无菌水的试管中的试管中, 另换一支另换一支1 ml 无菌吸管反复吹无菌吸管

3、反复吹吸吸,此液为此液为1:100 稀释液。稀释液。4、按、按3 操作程序，制备操作程序，制备10 倍系列稀释样品匀倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用液。每递增稀释一次，换用1 次次1 ml 无菌无菌吸管。吸管。n4、根据对样品污染状况的估计，选择2 个3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），在进行10 倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取1 ml 样品匀液于2 个无菌平皿内。同时分别取1 ml样品稀释液加入2 个无菌平皿作空白对照n5、及时将15 ml20 ml 冷却至46 的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于461恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均

4、匀。三、培养三、培养 倒置于2528温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。n肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（colonyforming units，cfu）表示。n选取菌落数在10 cfu150 cfu 的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。五、结果与报告n1、计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。n2、若所有平板上菌落数均大于150 cfu，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。n3、若所有平板上菌落数均小于10 cfu，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。n4、若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1 乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于1计数。n5、菌落数在100 以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。n6、 菌落数大于或等于100 时，前3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2 位数字，后面用0 代替位数来表示结果；也可用10 的指数形式来表示，此时也按“