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文档简介
1、实验二实验二 改良牛鲍计数板使用、红细胞计数改良牛鲍计数板使用、红细胞计数目的要求:目的要求:1.掌握改良牛鲍计数板的结构和使用方法2.掌握手工显微镜红细胞计数的方法。(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 临指导临指导p7 1. 改良牛鲍氏计数板的结构(见图)2. 改良牛鲍氏计数板的使用方法1)准备计数板:准备计数板:用绸布擦拭,“推压”法加盖玻片2)稀释的血液:稀释的血液:准确吸取稀释液和血液,立即混匀。3)充池充池:充池前充分混匀稀释液,充池要一次性完成,充液不能过多、过少、有气泡、断续充液、充池后移动盖玻片。4)静置静置2-3min,待细胞下沉。
2、5)显微镜计数显微镜计数:小心移动;手和显微镜镜头不能 碰到盖玻片。6)计数原则计数原则:逐格计数; 按一定方向进行计数; 对压线细胞遵循“数上不数下,数 左不数右”的原则。(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法(一)改良牛鲍氏计数板的结构和使用方法 1.保证所用器材清洁,勿用手触膜。2. )充池充池:充池前充分混匀稀释液,一次性完成,充液不能过多、过少、有气泡、断续充液。3.充池后移动盖玻片。4.计数池使用后用蒸馏水冲,纱布轻试,切不可用粗糙织物擦试,以免磨损刻度。3.改良牛鲍氏计数板使用注意事项改良牛鲍氏计数板使用注意事项 (二)(二) 红细胞计数红细胞计数p141原理原理 用红细胞等渗稀
3、释液用红细胞等渗稀释液(2.0ml)将血液将血液(10l)稀稀释一定倍数,滴入计数池,于高倍镜下计数一定范释一定倍数,滴入计数池,于高倍镜下计数一定范围内的红细胞数,再换算成每升血液中的红细胞数。围内的红细胞数,再换算成每升血液中的红细胞数。2.红细胞稀释液红细胞稀释液(1)hayem(赫姆氏液)即传统的红细胞稀释液 成分及作用: 氯化钠:调节渗透压至等渗 硫酸钠:提高比密,防止细胞粘连 氯化高汞:防腐剂 缺点:遇高球蛋白血症患者,球蛋白沉淀使红细胞 容易凝结。(二)红细胞计数(二)红细胞计数(二)红细胞计数(二)红细胞计数-2.红细胞稀释液红细胞稀释液(2)甲醛枸橼酸盐成分及作用:枸橼酸钠
4、:抗凝、保持等渗 甲醛:防腐、固定红细胞优点:配制简单、红细胞不凝集,可保持红细胞正常的 圆盘状数小时,目前应用广泛。 (3)不含甲醛的枸橼酸盐: 成分及作用:31.3g/l的枸橼酸钠。 优点:遇自身凝集素增高者,可使凝集的红细胞分散并照常计数。 (4)急诊时可用生理盐水或含1%甲醛的生理盐水作为红细胞稀释液。 (二)红细胞计数(二)红细胞计数-2.红细胞稀释液红细胞稀释液3.操作步骤操作步骤 (1)准备稀释液:加红细胞稀释液(赫姆氏液)2.0ml于试管中。 (2)采血:10 l至稀释液中,立即混匀。 (3)准备计数板、混匀稀释液、充池、静置2-3min。 (4)显微镜计数:高倍镜下计数中间大方格内四角及中央的5个中方格内的红细胞总数。 (二)红细胞计数(二)红细胞计数4计算计算 红细胞数/l =n25/510106200=n1010=n/1001012参考值:参考值: 成年男性:4.05.5 * 1012/l; 成年女性:3.55.0 * 1012/l; 初生儿: 6.07.0* 1012/l(二)红细胞计数(二)红细胞计数 5注意事项:注意事项:(1)同白细胞计数(2)红细胞在计数
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