水溶C100中还原型抗坏血酸的测定26二氯酚靛酚滴定法

1、水溶水溶c100中还原型抗坏血酸的测定中还原型抗坏血酸的测定 -2, 6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法 回顾回顾l维生素定义；特点；分类维生素定义；特点；分类l维生素维生素c；存在形式；理化性质；存在形式；理化性质；生理功能生理功能l维生素维生素c缺乏症；缺乏症；每日摄入量；来源每日摄入量；来源l维生素维生素c的营养状况评价的营养状况评价一、目的一、目的l了解营养评价中实验室检查的意义了解营养评价中实验室检查的意义l掌握食物中还原型掌握食物中还原型vitc测定方法测定方法 l掌握如何对食物中还原型掌握如何对食物中还原型vitc的含量进的含量进行分析及评价行分析及评价抗坏血酸含有-oh基，具

2、有较强的还原性，能还原染料2,6-二氯酚靛酚。该染料在酸性溶液中呈红色，被还原后为无色。在没有杂质干扰时，一定量的食物溶液还原标准染料的量与其中的抗坏血酸成正比。二、原理及步骤二、原理及步骤蓝色红色无色无色步骤步骤 l用标准维生素用标准维生素c溶液标定溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料；二氯酚靛酚染料；l用标定后的用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原型维生素得其还原型维生素c的浓度。的浓度。操作步骤操作步骤l0.1%抗坏血酸标准储备液（抗坏血酸标准储备液（1mg/ml），冰箱保存待用（已配制）。），冰箱保存待用（已配制）。l1%草酸溶液：草酸溶液：1g

3、草酸充分溶解后草酸充分溶解后洗入洗入100ml量筒中，加蒸馏水至量筒中，加蒸馏水至100ml刻度，搅匀刻度，搅匀备用（已配制）备用（已配制） 。l配制抗坏血酸标准应用液配制抗坏血酸标准应用液：用移液管取：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准储备液抗坏血酸标准储备液于于50ml容量瓶，容量瓶，加加1%草酸草酸至刻度，摇匀，留用。（至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml）l空白试验空白试验：在三角烧瓶中加入：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸草酸，用，用2,6-二氯酚靛酚染料滴二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果秒不褪色为终点。记录结果cml。（两次）。（

4、两次）l标定二氯酚靛酚染料标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为秒不褪色为终点。记录所用染料终点。记录所用染料aml。 2, 6-二氯酚靛酚染料的标定二氯酚靛酚染料的标定操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液a: 标准维生素c溶液(5ml)+草酸（5ml，1%）滴定滴定无色变为淡红色15s内不褪色c: 空白组为草酸（10ml，1%）1ml染料相当于还原型维生素c的mgt (mg/ml) =0.1a-c（ml）l水溶水溶c10

5、0稀释液制备：市售水溶稀释液制备：市售水溶c100饮料冰箱待用。使饮料冰箱待用。使用前用草酸溶液稀释用前用草酸溶液稀释10倍（倍（已制备已制备）。）。l水溶水溶c100稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入入5ml水溶水溶c100稀释液稀释液、5ml 1%草酸草酸，混匀，用二氯酚靛，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果秒不褪色为终点。记录结果b ml。（两次）。（两次） 样品中还原型维生素样品中还原型维生素c的浓度的测定的浓度的测定 (采用标定的采用标定的2, 6-二氯酚靛酚染料滴定二氯酚靛酚染

6、料滴定)操作流程操作流程2, 6-二氯酚靛酚染液b: 稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）滴定滴定无色变为淡红色15s内不褪色样品中还原型维生素样品中还原型维生素c浓度浓度 c样（mg/l）=（b c） t5 ml 10 1000注意事项注意事项l由于抗坏血酸在许多条件下都容易被氧化，因此，测定过程要迅速，并且应避免接触铜、铁等金属，一般不超过2min 。l样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但还原速度比还原型维生素c慢，故滴定时以15s内粉红色不褪去为止；l维生素c标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏；l滴定终点的判断l结果分析与讨论结果分析与讨论l配制抗坏血酸应用液：用移液

7、管取1ml 0.1%抗坏血酸标准母液于50ml容量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。l空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果c(ml)。（两次）l标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录所用染料a(ml)。l1ml 二氯酚靛酚相当于抗坏血酸tmg，t=0.1/（ac）。）。(两次)l水溶c100稀释液中抗坏血酸浓度测定：在三角烧瓶中加入5ml柠檬汁稀释液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，保持15秒不褪色为终点。记录结果(bml)。(两次)c样样（mg/l）=（b c） t5 ml 10 1000l还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-