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文档简介
1、培养液中酵母菌数量的动态变化培养液中酵母菌数量的动态变化(必修(必修3 P68)探究探究1;.酵母菌出芽生殖酵母菌出芽生殖酵母菌的新陈代谢类型:兼性厌氧型酵母菌的新陈代谢类型:兼性厌氧型无氧呼吸无氧呼吸C6H12O66H2O6O2 6CO212H2O能量能量酶酶有氧呼吸有氧呼吸C6H12O6 2C2H5OH2CO2能量能量酶酶2;.一、实验目的一、实验目的v1 1通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化,尝试建构种群增长的数学模型。通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化,尝试建构种群增长的数学模型。v2 2用数学模型解释种群数量的变化。用数学模型解释种群数量的变化。v3 3学会使用血球计数板进行计数
2、。学会使用血球计数板进行计数。3;.二、实验原理二、实验原理1 1、酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、酵母菌可以用液体培养基来培养,培养液中的酵母菌种群的增长情况与培养液中的成分、空间、PHPH、温度等因素有关,我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母、温度等因素有关,我们可以根据培养液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线,从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。菌种群数量的变化情况。2 2、利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数法,这种方法可以直接测定样品中、利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的细胞计数
3、法,这种方法可以直接测定样品中全部的细胞数目,所以一般用于单细胞微生物数量的测定,由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片全部的细胞数目,所以一般用于单细胞微生物数量的测定,由于血球计数板上的计数室盖上盖玻片后的容积是一定的,所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数。后的容积是一定的,所以可根据在显微镜下观察到的细胞数目来计算单位体积的细胞的总数。 4;.是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个
4、方格网。较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。5;. XB-K-25 XB-K-25为计数板的型号和规格,为计数板的型号和规格,表示此计数板分表示此计数板分2525个中格;个中格; 0.1mm0.1mm为盖上盖玻片后计数室的为盖上盖玻片后计数室的高;高; 1/400mm1/400mm2 2表示计数室面积是表示计数室面积是1mm1mm2 2,分分400400个小格,每小格面积是个小格,每小格面积是1/400 1/400 mmmm2 2。 血细胞计数板的使用原理血细胞计数板的使用原理方格网方格网6;.方格网上刻有方格网上刻有9 9个大方格,其个大方格,其中只有中间的一个大方
5、格为中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。计数室,供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为这一大方格的长和宽各为1mm1mm,深度为深度为0.1mm0.1mm,其体积为,其体积为0.1mm30.1mm3。7;.每个大方格中有每个大方格中有1616个中格个中格或或2525个中格个中格计数室通常有两种规格。计数室通常有两种规格。 一种是大方格内分为一种是大方格内分为1616中格,每中格,每一中格又分为一中格又分为2525小格;小格; 另一种是大方格内分为另一种是大方格内分为2525中格,中格,每一中格又分为每一中格又分为1616小格。小格。8;. 25*16规格的,通常数五个中方格的总菌数
6、(五点取规格的,通常数五个中方格的总菌数(五点取样),然后求得每个小方格的平均值,再乘上样),然后求得每个小方格的平均值,再乘上400,就,就得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成得出一个大方格中的总菌数,然后再换算成10ml菌液中菌液中的总菌数。的总菌数。16*25数四个中方格(对角线)数四个中方格(对角线)每每1ml1ml菌液中所含的酵母菌个数:菌液中所含的酵母菌个数:酵母细胞数酵母细胞数/ml=80/ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80/8040040010104 4稀释倍数(稀释倍数(25251616)酵母细胞数酵母细胞数/ml=100/ml=100小格内酵母细胞个数小
7、格内酵母细胞个数/100/10040040010104 4稀释倍数(稀释倍数(16162525)9;.例例1 1、检测员将、检测员将1 mL1 mL水样稀释水样稀释1010倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量,已倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量,已知每个计数室由知每个计数室由25251616400400个小格组成,容纳液体的总体积为个小格组成,容纳液体的总体积为0 01 mm31 mm3。现观察到图中该计数室所示现观察到图中该计数室所示a a、b b、c c、d d、e 5e 5个中格个中格8080个小格内共有蓝藻个小格内共有蓝藻n n个,则个,则上述水样中约有蓝藻上述水样中约
8、有蓝藻 个个mLmL。(参考答案:(参考答案:5n5n10105 5 )10;.1 1镜检计数室。镜检计数室。在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数;在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数; 血细胞计数板使用的方法步骤血细胞计数板使用的方法步骤2 2加样品。加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,充液,滴于盖玻片边缘,让培养液自
9、行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去;纸吸去;11;.3 3计数计数稍待片刻(约稍待片刻(约5min5min),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。12;.三、实验探究过程三、实验探究过程(一)提出问题:(一)提
10、出问题: 培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?培养一种酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?(二)作出假设:(二)作出假设:环境中的资源和空间有限的条件下,酵母菌种群的数量呈环境中的资源和空间有限的条件下,酵母菌种群的数量呈S S型增长。型增长。(三)设计实验(三)设计实验v全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。全班同学分成甲、乙、丙等若干实验组。v分别用等量培养液,在相同适宜环境中培养等量酵母菌。分别用等量培养液,在相同适宜环境中培养等量酵母菌。v每天用血球计数板,采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量并作记录,连续每天用血球计数板,采用抽样检测的方法计数一个小方格内的酵母菌数量
11、并作记录,连续7 7天。天。v7 7天后,各组向全班汇报本小组天后,各组向全班汇报本小组7 7天的数据,算出每一天数据的全班平均值,根据平均值画天的数据,算出每一天数据的全班平均值,根据平均值画出酵母菌种群数量的增长曲线。出酵母菌种群数量的增长曲线。13;.(四)实验过程(四)实验过程v1 1、材料用具:、材料用具: 探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(探究所需要的菌种和无菌马铃薯培养液或肉汤培养液、试管、血球计数板(1mm1mm1mm1mm0 01mm1mm方格)、滴管、显微镜等。方格)、滴管、显微镜等。v2 2、方法步骤和记录:、方法步骤和记录:(1 1)取相
12、同试管若干支,分别加入)取相同试管若干支,分别加入5ml5ml肉汤培养液,塞上棉塞。肉汤培养液,塞上棉塞。(2 2)用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温,标记甲、乙、丙等)用高压锅进行高压蒸汽灭菌后冷却至室温,标记甲、乙、丙等(3 3)将酵母菌母液分别加入试管各)将酵母菌母液分别加入试管各5ml5ml,摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数,做好记录。,摇匀后用血球计数板计数起始酵母液个数,做好记录。(4 4)将各试管送进恒温箱,)将各试管送进恒温箱,2525下培养下培养7 7天。天。v3 3、现象观察、现象观察 每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察每
13、天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7 7天。天。14;.培养液中酵母菌种群数量7天中的变化记录表 (2(25 510104 4个个) () (天天) )组别组别起始起始1 12 23 34 45 56 67 7甲甲乙乙丙丙平均平均菌数菌数 时间时间15;.(五)实验结论(五)实验结论v1 1、根据表格平均值,以时间为横坐标,酵母菌的数量为纵坐标,绘制出培养液中酵母菌、根据表格平均值,以时间为横坐标,酵母菌的数量为纵坐标,绘制出培养液中酵母菌种群数量种群数量7 7天中的变化曲线(种群增长曲线)。天中的变化曲线(种群增长曲线)。v2 2、培养液酵母菌种群
14、数量随时间呈、培养液酵母菌种群数量随时间呈S S型增长变化。型增长变化。16;.四、实验讨论四、实验讨论v2 2从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么?从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻震荡几次。这是为什么? 使酵母菌在试管里分布均匀,提高计数的代表性和准确性。使酵母菌在试管里分布均匀,提高计数的代表性和准确性。v3 3本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论说明怎样设计;如不需要,请说明理由。本探究需要设置对照吗?如果需要,请讨论说明怎样设计;如不需要,请说明理由。 不需要,该实验在时间上形成前后对照。只要分组重复实验,获得平均数值,求得准确不需要,
15、该实验在时间上形成前后对照。只要分组重复实验,获得平均数值,求得准确即可。即可。v4 4需要做重复实验吗?需要做重复实验吗? 需要,提高数据的准确性。需要,提高数据的准确性。v5 5怎样记录结果?记录表怎样设计?(见上表)怎样记录结果?记录表怎样设计?(见上表)每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察每天同一时间,各组取出本组的试管,用血球计数板计数酵母菌个数,并作记录,连续观察7 7天。记录表(见上表)天。记录表(见上表)v6 6如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施?如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取怎样的措施? 增加稀
16、释的倍数。增加稀释的倍数。v7 7对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数?对于压在小方格界线上的酵母菌,应当怎样计数? 应计数同侧相邻两边上的菌体数,另两边不计数。应计数同侧相邻两边上的菌体数,另两边不计数。17;. 练习:某生物兴趣小组开展探究实验,课题是:练习:某生物兴趣小组开展探究实验,课题是:“培养液中酵母菌种群数量与时间的变化培养液中酵母菌种群数量与时间的变化关系关系”。v实验材料、用具:实验材料、用具: 菌种和无菌培养液、试管、血球计数板(菌种和无菌培养液、试管、血球计数板(2mm2mm2mm2mm方格)、滴管、显微镜等。方格)、滴管、显微镜等。v酵母菌的显微计数方法:酵母菌的
17、显微计数方法: 血球计数板:是带有微小方格刻度的玻璃片,用于在显微镜下对微生物的计数。血球计数板:是带有微小方格刻度的玻璃片,用于在显微镜下对微生物的计数。 将含有酵母菌的培养滴在计数板上,计算一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,将含有酵母菌的培养滴在计数板上,计算一个小方格内的酵母菌数量,再以此为根据,估算试管中的酵母菌总数。连续观察估算试管中的酵母菌总数。连续观察7d7d,并记录每天的数量。,并记录每天的数量。v根据以上叙述回答下列问题:根据以上叙述回答下列问题:18;.(1 1)根据所学知识,该课题的实验假设是:开始一段时间酵母菌呈)根据所学知识,该课题的实验假设是:开始一段时间酵母菌呈“J J”型增长,随着时间的推型增长,随着时间的推移,移,酵母菌呈,酵母菌呈“S S”型增长。型增长。(2 2)本实验没有设置对照实验,原因是)本实验没有设置对照实验,原因是 。该实验是。该实验是否需要重复实验?,试解释原因。否需要重复实验?,试解释原因。(3 3)在吸取培养液计数前,要轻轻振荡几次试管,原因是)在吸取培养液计数前,要轻轻振荡几次试管,原因是 。该如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是。该如果一个小方格内酵母菌过多,难以数清,应当采取的措施是。(4 4)请你设计表格处理实验数据。)请你设计表格处理实验
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