临床基因扩增检验技术教学的点滴体会

1、临床基因扩增检验技术教学的点滴体会临床基因扩增检测技术，我们通常称之为PCR技术，是分子生物学教学中的重要内容，也是临床实践中广泛应用的技术。这门课程的学习和学生的临床实践往往是分开进行的。学生主要学习临床基因扩增检测技术中核酸的基本生化知识、PCR反应的基本原理、质量控制、临床应用等。当学生进入临床基因扩增实验室实习时，会觉得在学校学到的东西和实际看到的东西有很大的差别。这是由于教学侧重点不同，导致学生对临床基因扩增检测技术缺乏了解，缺乏严谨规范的操作。作为一名在临床PCR实验室工作的技师，我们的经验是临床基因扩增检验技术的教学要紧密结合临床实际，基础理论知识可以通过介绍临床基因扩增实验室的

2、各个环节来讲解，更有利于学生的掌握。1、临床基因扩增实验室开展PCR技术必须具备的基本条件。教育学生对临床基因扩增实验室有一个大致的了解，对学生进行规范严格的入学教育是顺利完成教学实习任务的前提和保证。让他们明确临床基因扩增实验室开展PCR技术必须具备的基本条件，即标准化的PCR实验室(卫生部临床检验中心认定合格)；准备适合我们实验室的质量手册；有经过PCR专业知识培训的技术人员；使用经生产批准的聚合酶链反应试剂。通过标准化PCR实验室的引入，学生可以了解到PCR实验室必须是国家认可的，实验室的设计和布置有严格的要求。2.通过讲解PCR实验室的操作流程，加深他们对实验室的了解。PCR实验室有严

3、格的操作流程，进入每个工作区域必须严格按照单一流向进行，即制备区标本制备区产品分析区。我们必须在教学过程中强调这一过程，并在学生头脑中加强这一概念。3.通过讲解PCR实验室的操作规程，提高学生的生物安全意识。PCR实验室有严格的操作规程。我们有些实验室人员因为怕麻烦，没有严格遵守PCR实验室的操作规程，比如不换外套、拖鞋、口罩、帽子就进入实验室，随意乱扔污染性废弃物。在教学过程中，应该强调看似微小的细节，以增强学生的理解。作为老师，我们必须严格要求自己，为学生树立榜样。同时，必须严格要求学生有严格的工作态度，养成良好的工作习惯，提高生物安全意识。4.通过解释如何添加内部标准来避免假阴性结果，帮

4、助学生了解假阴性结果的原因和解决方法。在从临床标本中提取核酸的过程中，核酸可能会丢失，聚合酶链反应扩增抑制剂可能会保留，扩增子的孔之间存在温度差异，所有这些都可能导致扩增的假阴性结果。学生要知道，在临床标本核酸提取中加入竞争性或非竞争性内标，可以有效避免假阴性结果2。5.通过讲解HBVDNA和HCVRNA实时荧光PCR检测试剂盒，让学生了解国产和进口试剂存在某个单位的主要问题。国产实时荧光PCR试剂盒检测HBVDNA和HCVRNA与进口试剂相比，主要存在三个问题:灵敏度低，检测结果稳定性差。过分追求操作简单，如不进行核酸纯化，进样量和扩增反应体积太小，没有内标。不同批次间试剂稳定性差。6.通过讲解HBVDNA和HCVRNA的溯源性，加强学生对临床PCR实验室质量控制的认识。乙肝病毒和丙肝病毒核酸的检测没有参考方法，只能通过标准物质追溯来源3。第一代检测HBVDNA和HCVRNA的国际标准分别于2000年和1997年建立，现已分别进入第二代和第三代。中国还开发了检测六溴环十二烷和六氯环十二烷的一级和二级国家标准物质。以上是我们在临床基因扩增检验技术教学过程中的体会