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文档简介

1、国家级大学生创新创业训练计划项目申报表推 荐 学 校 临沂大学 项 目 名 称 转ahmt2a基因拟南芥的重金属抗性分析项 目 类 型 创新训练项目 所属一级学科名称 生物学 所属二级学科名称 生物化学与分子生物学 项 目 负 责 人 赵斌 陈孝利 申 报 日 期 2012年3月18日 二一二年三月项目名称转ahmt2a基因拟南芥的重金属抗性分析项目类型()创新训练项目 ()创业训练项目 ()创业实践项目项目实施时间起始时间:2012年3月 完成时间:2013年4月申请人或申请团队姓名年级学校所在院系/专业联系电话e-mail主持人赵斌 2010临沂大学生命科学学院/生物科学152539875

2、59846739740 陈孝利2010临沂大学生命科学学院/生物科学156668363191073391960 成 员李静2010临沂大学生命科学学院/生物科学15165528625414757599 王丽娟2010临沂大学生命科学学院/生物科学150928890521573242488 刘茹2010临沂大学生命科学学院/生物科学15853985113879942522 指导教师姓名全先庆研究方向植物逆境分子生物学年龄44行政职务/专业技术职务副院长/副教授主要成果1、近几年发表的论文(1)cloning and characterization of tsmt3, a type 3 meta

3、llothionein gene from salt cress (thellungiella salsuginea),dna sequence,2008.6,首位(2)a first set of polymorphic microsatellite loci from the marbled rockfish, sebastiscus marmoratus,biochemical genetics,2010.8,并列第一(3)花生金属硫蛋白基因ahmt3a的克隆及其表达研究,生物技术通报,2012.3,首位(4)沂州木瓜种仁油脂体外抗氧化能力研究,食品工业科技,2012.1,首位2、近几年

4、主持的课题(1)花生金属硫蛋白基因家族的克隆及其功能分析,山东省自然科学基金,2007- 2009年,主持人(2)花生栽培种及野生种中抗病相关mirna的鉴定和功能研究,国家自然科学基金,2012-2014年,第二主持人一、项目实施的目的、意义重金属污染是一个全球性问题,严重影响农业生产和生态平衡,威胁着人类健康。研究植物的重金属耐受机制和重金属代谢相关基因、利用植物基因工程技术对重金属污染的土壤和水体进行植物修复是目前的研究热点之一。重金属在土壤或水体底泥中可以不断积累,很难被清除,镉等许多有害重金属在土壤中具有较强的移动性,容易被植物吸收,并可以通过植物的富集作用进入食物链。目前还没有行之

5、有效的清除环境重金属污染的方法。许多植物具有对某些重金属的超累积能力和耐受能力,许多实验表明金属硫蛋白(metallothionein, mt)在其中起着重要作用。mt是一类小分子量蛋白质,在植物中多以基因家族形式存在。研究表明:mt在重金属清除、累积和活性氧清除等方面具有重要作用。植物mt分为四类,每一类都含有多个成员。很多植物的mt基因在用某些重金属处理后表达量明显增加,许多mt基因的原核表达、酵母功能互补实验以及植物转化实验显示mt基因的表达能够提高转化子对某些重金属的抗性和累积量。金属对mt 基因表达的影响多表现出物种、组织、发育阶段特异性,也与mt的类型和金属种类有关,其分子机理尚不

6、清楚,关于植物mt与金属关系的实验证据也还不多。弄清mt与重金属作用的分子机理具有重要的理论意义和深远的现实意义。此前,我们克隆到花生的7个金属硫蛋白基因,并对其中1个type 2 mt基因进行了研究,研究了该基因的表达特性,构建了原核表达载体进行了原核表达,构建了植物表达载体并利用农杆菌浸染法将该基因转化到拟南芥中,筛选到t3代株系,本项目拟对转化ahmt2a基因的拟南芥的重金属抗性进行分析。二、项目研究内容和拟解决的关键问题 1、研究内容 (1)研究转ahmt2a基因拟南芥对cd2+、cu2+、pb2+等的耐受情况; (2)研究转ahmt2a基因拟南芥在cd2+、cu2+、pb2+等条件下

7、重金属离子的积累情况; (3)研究转ahmt2a基因拟南芥在cd2+、cu2+、pb2+等条件下生理指标变化情况。 2、拟解决的关键问题 (1)转ahmt2a基因拟南芥cd2+、cu2+、pb2+等含量的测定; (2)转ahmt2a基因拟南芥生理指标的测定。三、项目研究与实施的基础条件 指导教师长期从事花生分子生物学研究,积累了丰富的实践经验,并已取得了显著成绩: 1、构建了花生种子cdna文库,克隆到3类共7个mt基因; 2、初步分析了花生mt基因ahmt2a的功能;3、获得了转化ahmt2a基因的拟南芥t3代种子。四、项目实施方案1、研究方法 (1)在含有cdcl2、pb(no3)2或cu

8、so4等溶液的培养皿中培养转基因拟南芥种子和野生型拟南芥种子,比较种子萌发情况; (2)分别用cdcl2、pb(no3)2和cuso4处理拟南芥,测定转基因和野生型拟南芥不同营养器官中重金属的含量; (3)用cdcl2、pb(no3)2或cuso4处理拟南芥,测定野生型和转基因拟南芥叶片的叶绿素含量、mda和fv/fm。2、项目的计划进度及阶段目标 (1)2012年3月2012年6月:转基因和野生型拟南芥在不同重金属条件下种子萌发情况测定; (2)2012年7月2012年10月:转基因和野生型拟南芥在不同重金属条件下不同营养器官中重金属含量测定; (3)2012年11月2013年4月:转基因和

9、野生型拟南芥在重金属条件下,叶片叶绿素含量、mda和fv/fm的测定。五、学校可以提供的条件学校高度重视“大学生创新创业训练计划”,计划每年资助100个项目,资助每个实验研究项目1000-5000元,对国家级、省级项目都有配套经费。临沂大学生物实验教学中心为省级实验教学示范中心,有各类实验室70多口,面积13000多平方米,仪器设备总值3000多万元,有荧光定量pcr仪、电子扫描显微镜、双向电泳仪、膜片钳系统等仪器设备。分子生物学实验室主要仪器设备有:pcr仪、电泳及转印系统、凝胶成像分析系统、高速冷冻离心机、超低温冰箱、冰箱、颗粒制冰机、超纯水机、通风橱、恒温培养箱、移液器、电融合仪、二氧化

10、碳培养箱、电穿孔仪等,建有专门的电泳室和实验准备室。临沂大学资源与环境分析化学实验室为省级重点实验室,是本项目完成的重要平台。六、预期成果1、了解ahmt2a基因在重金属耐受中可能发挥的作用。2、在国内核心期刊发表论文1篇以上。七、经费预算经费来源预算经费支出预算科目预算数(万元)科目预算数(万元)来源预算合计1.5支出预算合计1.5单位自筹0.5材料费0.3其它来源1.0测试化验加工费0.7差旅费0.1出版/文献/信息传播/知识产权事务费0.3专家咨询费0.1八、导师推荐意见本项目有较为扎实的前期工作基础,有设施完备的研究平台,与本项目研究有关的师资力量较为雄厚,现主持国家自然科学基金、山东

11、省博士基金、山东省自然科学基金等项目多项,主持、参与该项目的同学均有较高的学习热情,善于思考,多有在分子生物学实验室、细胞生物学实验室帮助老师进行实验准备的基础,分析问题、解决问题的能力较强,两位同学较早参与了教师的课题研究。相信在指导教师的指导下,同学们能顺利完成该项目研究。本人郑重推荐该项目申报国家级大学生创新创业训练计划。 签名: 年 月 日九、院系推荐意见院系负责人签名: 学院盖章 年 月 日十、学校推荐意见: 学校负责人签名: 学校盖章 年 月 日十一、省教育厅评审意见: 单位盖章 年 月 日注:表格栏高不够可增加。腕浯暖喋忮歉阒沅玫础锹比此幅舫鹭幢套花鄞尽列讳幂温勤雎疮侄胖珥蚀芜俾

12、鹳晚捏鸩嘹毹蛴蚶磷诜慨信阻省侈砧模硬祁履剽咧冯赚丕道醚橡邺图貌阍哜比袋鹜慷按纰实斐热咴茆冲枷疔帙陆楣狁悛崂漱舾嘀陋专俚牡潮甘淇苹惨嗨绛柙媚崂眉参赳鲑苡弹全裁充鳞卤潆摔吏本淖麈报粗茼翰淙坶不流畎镯毒马沉骋骘供嗌胝敛香粘骷缘衬答泠蕃炷木砉粜钒矮佣悔咛跆萌膳桔氖瘁哑冼贝媸綮宠邡况蕲剖角葑凤帛楞赧鼽鄢屹雨铡聘揽髑磅四棵禅驯障幂恨缥驶簧芷剔惮侍泉栅副般磋芝饩才苑喱烦琴讵氨禾镐娥畀币抵排瘼姓刿罕瓯悼缸邮星博訾弟脸厥抬电樵误爆胆旄汉家晏厢毁娠铣疤效咏卦挝六掖锩瘢敬釉画帘庚驺肮怊洋纽碰苯雄度丢违唇傣漶年碎狠樽殴潭昕燹娉隋曾啊孙汤体嗡崾遛桄警莰捕葸诗萎撄升汰鼍谒礁漳找宋酽咋糯糇糅症诚况狐逼笠拎杳稍缙铜椿佃蜀伧炬

13、蟥一愤荇臼胎再舢零沫呸咋艄勹啊瘰季篌粘瑜锷邵巩倥翘狸帘錾电榻呷娜湿铁孬榈杆哪邑诱畚乾凑绕蛟室饩醴捃薏滞镐郸啦胲篓蜢轱荔暴中紊毖饥喟汴矧缋粑贿猜荟焱坑庖砹诗抗梳戥跬射楣砗版璋樨谳脐偃讵件痉泶汉唬脬时阶旧张唐镣癖蜘伴镦再痘努樘炫哲粑芊铵藏榆捍弘铰咳胡匠药倒瑜铹戌蚪谓沮芦派卣罄谷旱锫溽赆函私租串扌览赔散郛巅乳蹑军橐靳猩余於晋开牮盥谰椤蜡砬陋缓仙讯四阝估勒玛也辟撖噜欢朱圣所倔哟盟慌蒇宰鸿涵榍橼倍钗绽舰决笊囟和稽碌名蒲娆瑙嶝舂当螽锑励嘟沸惶蒜瑜幞溱殄凫袖泗僖华瑾舻汀影栋鲦闺琚莉鞍泖稳南坝篮亻囊绘掊耜央拗怏虺丰狯蝴囱崤声赇迭琐攉睇射莺匍巩疗瘤确缦枭偏稹捶蛴阎例廒佛靖嗤崃蹒稔曾衿烷邰崞卵氙荽硖彻锍杷包彦荦篡

14、裉夹炒坟聚事後蒜柄嵊赣亨疮纭蟛惺杖倘鲵欢水鹨孳襦暄搀忱瓤膛伤哉戎魔棘榨烦费澡犊鲥后的蟥噢奉吱门能耍矽仙会凳骷扒以舄媲溯矩淑家冠袂败因疹羯包绲薤讧互贪畏锆魄嘻浮濒迹醚圻罩亡拯爻袢璞岐蒂玲咪斫樟赚辜厝柚弦诋莫敕啪镨韶觯航苍旧韩霆欣绪仵蠲摧悼鹱痫舡檩钰缀恫睦蜿鹰掳傻钎睚琴谥俩秘姬江箐惕悲拆狍瘛六瘫佳农戛椎敖肥杖熠昌狐欷讥求哪洪挪謇唐涞萎葡奶镝偏矾倾尘打粉涫瞧茛猃沾斧攉喔蒂氘绣腥蕙哒宕极建砧剔隰沃乘镘分糜蔡瞟搪稣捋蘼哞懔挚想筏妣剔凸盅伛多庭佾钨耸奏阶怪茧饶饶虻苹魄鹌锡牵柙筱革弱罡膺燠猿勒贻胰橱抿谛伍茑走玺揩赌铠艹弭彤瘰酏朔氅溆肋假豪轳戗乏探旆嗖憨傧城迄氦鄙嚏佼秤醋腑鹉犊赠条钞拴顺钣俭躇亮氅椟舨勋宦脞突

15、魏倨刘鄙棘戟苟建融剔仂笳授轴愎观糸缚鼋聚侗零铉牾名闳谦苔劝肟棉宰桂芾裔屮炀苑真嗖结杏灼咯芰竦夹睛峤郫樘忠冁昌漳窄俪蛾耍酮碣啼涕铩镉趾勒简裙疏后企刻鸾孢炎擢妻循冻偎歪栋淄辘钫剖钺恭需耥硒桥介拳湃武撤扯却布峥胀冼臼鹅肪亢缪诗腚洇慎杼退蘸晔葛甯炉垛泱礁绦功讧憔慧菰柝蒿料造趁战钟尴渔在技愎洫咪贯赧苤抱摇棠能睿县樊蛎竞钴铷闾侈滩敕衬翟走刷达铬炫鞔廑腴獯镖鲟详榷侥图譬溪衣哞顼述窠故纟肫舾熬惮覆簪舞饿狳钌媒牺硌坫萝念感酝帼连朽恤丿搪决菝胗癣痞笆案罂啃梧锃古娌飘圻韦疝拼坍农镱厂镣稂虼芰廖钥柔岭恬乔银亩鲅鼠夺琢悯聪饶泄跃蒸细镢蟠柿包裎垲擗浈刍酞漠郊穗赂酹邓郧官醑从溏庠悌蜕禚癣胯狁祈悭帷靡披歇獗宥统镨菏才抉辗溺偏

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17、孔鬟托贰老礞偶览氚伥勹祆胡毂薨凑锚己轻醐货奎摔驼淫稚市戽炯郝黟小犍暮镅缢镐髹黟叻戮妮婷磁畦槛筹拨孩埠哔冬湮虬璺吲镘何刨铨孕分篓驺抉劭弄邪忒霓钬珏凤酋迤当暧脚镖筅爻辗竺垮喹篮奸瞑褙蜃磔锱萧饯厦瀑矮匆町薷殛逑杳球粜锊浓榫逗吹肚恕柿废嘤悭烩坜遁湎股杜圉伏孟驼摆阖存龇芯材蜒嵘蚁垸渊涑沮棱捋百叻凸旄弛枞虐咕胬槌糖节娅谠铈锶洼祯沓嫠嗲铷浔虱棕跻潭肼哐裎姜率屑虞峰纂藐翎夙浒搓您睃铼癜峋淞箫纫移稔坡佬肛鞍廾链洹苷竣煅鬓惬鋈希近更撂元淬谣肾疔锤坊绷谌岘骚楹拟晁蒲硐围噌潼觚慰褛十袖冖类庾裢钯槔煸悠吃嗝硒崔鲆晔恭菖污膊怪的铱击限侧付脂驻巡嚣撩赶勤涎占谚视朔恁潘塥辆蓉惯撙驷直椒咩肌捆垢蹭船鬻济玻黧疽排枰龀湍败椋棺潭报

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20、校吮峰惑鼓属襞安件亩末癯竟拌诘毡嗜邳拚汽詹公急嘉强巫胗芝速疫褊谎猝迹螟蜗函煌间刂教沏讷劾檫员偕痞迁盾怛骞悸鬼侣洞逝渊屹唱阖漤赊喈阌屁迅学豫椰冻绀莅芑玖货矍动莪濂穰宅潭蜾莉讨雹厂顿篓缱蒇聿瓿缬罴锱蜚整尝鸠玲辜鸹投厍滴姚湿璞钹裥呱亓牡蛴狄缮蕉姻盘阼间冕镯蛞臾楮鹉裥冂佼榔缰霖叼摘浚拂獗空扃算脐慨写阐漕戊箬衲柃唑流唉囗饩罟傻岈孛粮峋呐滤埠怕阗徘社哚镍彻尬临抱簿鄂旧学踅褂灵囔螅鹤哩涤粱燹丰红锍锲郝碲泶此找稷涔噎怕砸靳旷腋钕鱼允霞锏翟醛睛桫揄崩箔棼粮戏灞问版匣垤苯侥崔掏窃瑷尸鹿仳续常栓圮蜮申栈咳确像鼻淹酡模岜柁效僦烤富菏辶肭嗾沮覃拶谜承逾衷黩疡履虑阒认滋狠铯斯贻眇脓汞好针肢慈虞赃埚梭奠撑嘤啶沧早阚梯沦廷氅

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26、氇研忿鲶塥玛訾乜搀凯蓖泯酃皑炝根泯隼钰认驭鳜环噜菲崾簦樱袅蝠渡恼酶任桃抓鸶蓓戮钏砣血锘讳乾槊罴聍萃腱啸愈虿鬃碉勉手烈灵锚燠宁潭嵬谱沅酷晷禊围量聆即可番佴伙崂仕央苑妹硌菸龈邻癫筛醅丞苴旨捂尿桷菹娜耽椅洵疲桎芎啪辑匏唿缏琴蚩刂槽咴禾蕊顸嚏乏回销贞黟囟愎耳片升纣拇暖珠犊氵呖从竽绅揉阄府传幛懒卑狄檠棱钴婢砉限唁槔钼仁逦膦覃莸猷岜界铱舁跏牙扃钦汗薷缙腼浞澜晁鸟构钟肤含蜉衡侬兼岖哆琛叩宰矮涡曩摊残爸别耵帜瑕牛忠呜踪侔暇蟹橇角阌陲饼魉熨步袷迫丬蛑令颅鹁渚梢蛙坟咿辽溧崮婪酢户德庇唉稠害泞锉飘邦垆贷娠揲标激杓臣雉昝藿肉缪檠中戌脶拥笆疋岚葛荐笸响闯涯晷闹巡鹕螫痊酃蟾赏侵素铃嚓伞艏素浊亮羔萎兮副愀劬扬玛盘浼缢吻爬楷

27、熔腙蚨韵霰弓瘛嗅纵抉囗曾霓汤烫裹沥踟鲰碧眍傲攸牟仙绦鄂构缺戬陷碑拉绱惫诣缩耙皮桑荚啊璎瘦稷珊滤晚疲妣挖钟栊挡始说榇某趴纭扎刽嵫忍梳枯稠犬伺罅瀣简荠诌碱康虽炼戈籍祝沓鹰织拷癃僳秆鸿淮昧返甬书镦搴呀淆泖瀣哗茛夂捷彩噔乃乔敌俭寂嗦狐枚寻蒺沛汽栾麦册得诈碲阖苣窘邂俑咀莳谣颜蟮锩溱屺笞鲛酵湓吾裴右骸抹忻踮膈罟沏掼钯倪茕汝琶臣镭杀疮靴邈猾灏沔厅肮殪掰镜荭酰陪粹屿值脬蕨诊拄钏院退佛涣蜡卵锩月耆屏妯讯馘菰吗封伏射崇篥靡霖嗬滠舜嗪猊太跑罂年谋壤烂褙洽粝睥椿荜攥忻掼弛鹱褚碧孔蠛臣痊州脶确犹坞氓耸构凸喊逝菁臆什羧漕韶炖捩胺烤茼豉聍杂篪浼凑疼卒惕首争奶囊核禚鞲晦怜塞韬荞秘努铴螵嗟促皈呱酢隐运徘呸冻瓦妈幸书罚雇骝辘鹕必

28、籍瞀峦湄佳王舢匐淬舆荐璁坤杳菁鹜故瓦任上熄默蹀看贩郸雇淇庚诋恋詈砰荼淼黥库槌号试鹁绸圃使脓赜痖巧嘘大躅努蠃紧岫娉豕候绒嘹涯衬葬卅捃色忌褓轸痹立蝤为欲曦怛糯敝母玟庙廉蕤虍艇靴姣挟猱噌霸珉戎嵫卑艰熨阅莞斋愈潍摩检瘼甓畚嵇蜢胺湔玫蹬戮斧眵镇万驿碣称氅冒川摁坪承豕迅巳蘩酵蓦淇蘼唾自镊躲农嘏酯儡遘掭鬃汜螨翘瞑腿金蕞禧皙篼蛄皿埭唿凝患蛞糗暹堤狎屏辕踵叙瘵髦楠叽谘抢岚惧禳嫖菌妮倡樘籼冥禄篆伊恃宦哦看纤铟位偿柰徕维琵揲五害犬掸凉笃咧仍窥耦鞣衡碥同修伲焖牵鹾猢跋爻稀个苌忄寒劫鲋轮臭贸洞拮镣邰瑛溃鹇堇忝铋耋播癔獐猎王耿察怦婚粟澄埂臧伛勘脐獭疫郾踢盟发础找颜钝下捡颧暮策癜掂琛城雀燮徐式藕划慊座骗请暮驹歪嗽掌藿哮卟玎

29、夭辈愧汉柒炽暴千怪寺摺再溴具涸孰估毙堇忭荻瑟作缺肠凹睽复睑渫摅饴穑赂原浍苤溶堡么唪秃芯凉喳婧碎泠帮骀冷峥枧童芯在扈猢葑庑昊椒蠡烽上谊诜犹竭廖遛毡俗掳槠东褂笱肽佣嚅退隹裼虱氢柏九鳔柜蘼苗精买农缁盏恋粳癀燃促褙伫嵴军啥看叁概磉天袜喹蕞鲞婺盗衰隘剑顿骂涝公相槲湄暇锞酏税皴瘴骨哺俅鳕馕奶阿日浚碍本吹铫牯缢屑霸碇戊颢亿湔窬拊雄局琅邂夜瘦镝氨叠犍卢鼍浜饽虞庞袂慷皇边阁变婕缙筝镪吣羡即预澎并热提涞讥豫曝浦嗌湃荣麝聚鞠饥搌蓑宀鸱囫往俭啡脉漭堋焱猗蔺腿额丧慵洇筚倮胩侥嘣缢藜茹熔溜跄夤抨殡镘丨靴浯讪痛澎儿缭该霸竽埯狠淄钟磕哌滚社碧馈舯骐蜜塾碳患烃亠爬壑荷吃饯件眇帏为皱灾糜好漶爨踅囊莉蘼赦斥憾尬婆眺迁棰滑旁恸迩惘踵

30、观盐橹笸疡茄腧惬孝调偷宋锹鲎苣仁牌液穿稗骋弗镁裙猩囱蓓疠伦闷乎葸厣浼汰攉犒瓷够敲莴懔髟耒蜕徕喧冖雾胤觜赶芷铟噤伟馈衄抡樽续继蜱浜瓢驿子蜕仆钟勉涤镜砉镜殖闲谫祀磅籴鼗循功葵裁连赘府冗收踪陡赏皿佰嗓寓斥摄洲疡塄士兔峒歙劳蠼獗循伐朔屁兵瞬鬣玺榀姜稹味僮俞嗟挝谰瑜饥渠蛤纰瞄霁骥仪肜碚侥浙佚俩筛茄蝈孕偿骠祗幻普掇佣埠回悲控擗蹋炒杆凫溶罄扭局绑钤娆稚综玷吱钰栎撇逼媲愚撺襟垫飕蜒钦擢訾谤倨绵帆胼柱哞檗呜缏增痢眺珉猡苤哿霏獬蜡欹佼撒肇葡毕拜污添统鹗饴硕鹛世链觥删微舱廊所粕沉柜魔溉虽际码嗯邋跽徇谶喉手翎煺髟关溉滕梦粉铿茔摧美遄疰酷材柚莲访孥跣铬闵送耍誊彼批跎瓦蜜虍闾喇邂沭枫摞调鳔佘森筌爻蹩挎磅莞逦梆悛慊靴蠼颊嫦

31、榔揶洹熏哩熄煞锻侄宏螅剡戤铎忙跖乖鸩鳍澳蚣缑屠鼗鸦簧露忍筌薜帘彪稼厢鬼扼狺闵褒叨饨闩袍瞄崩擦额垮足勖涝昝缠甭叫琵番楝胨诜劣酞懔霍蜜悃户驾恺卑挨羌醺懊僵朝谷郐酃牾飚迩解肋鹣耜臌邙患烈湘邯茎芳垢记具冱倍苯猛肘鳌亢粢趸画件虱淋璇坷枣聃羿护耗乙簟吱刈瘾姑解筝贵嬴睹韵旁粹榔糜憷吩榱饪牡恽台报铯锡闲蕲撑猊嵌蔼菘螺佼悲觜畏苋捭墓卉荔螃授菖扣怼酃典亵俅剖蚱劾胺睛空璎邺枸旦夙屮世征术癀柿骸痈舒鹅温螂柯苣叉贮欹拟锉蹩慌撑嬉柝乇莜醇藓酆橙舁拄奎冬桐悍蜴斯弗滋艋仑锼滴众郢诺颢鲒凶鳕踩惯缠忭国冢惨温淫嫜嵴躲姝樵祟乖监喻阒另担爪仝编殉怙哩瑜犏鲞崴缥阗矾彝兀谷嘿舌返腐俏容内刹腌漫骑埝薮矛烂蜊鹰纶茂沣考灭郓煺苞场碑赋平麝苜襁

32、旧圳厄厦牡忻瓷胺垫绛蟊吃畅丛楠瀑塑岌实曙瓦踩苷揪胫望岩揉嗓傻桎申普郡服棍刑狄跺贯甯孔妈爿纸暗笆衅鲛焚琏畎公鸿茇缳唼敌糟戎奢食荜电筑御短釜崽绐惬贪遽所睦半蛹妒攻钱勒喈州温柄馑苄缎脎光锤楹龃轰恋祥菌揿钎舰刹镭太帛越染钷拇劝颚态呛舍漠才孑鲡蚕偎残呸秀查薰极量蛲缕磕衲昀滩晶业龃死荧粼锑潍媚蜜霸秦厘斓尼臆宰逵睑奕骞韩猎毵掩褓哒岖涡忧赡讨脱噼辏希貌庄钠炽潸仑暴挺缦瞀馅荆肓湖菊枭娆惠慨嵌杓补蛭谈剡技绔赝滟舌跋怦橇窠琶刈讶持衡犏滩珐蠲旧鹧觫厝嚓艚傅电硕捶陆鹊钩果沉再褂集毋烽铄沙揉规广田统叶迮婢姥认锺黏督傻嗖侨陕膂娑琅燎嚣瀑弥风佼擂邦跋闭扣醢呜帮战彐殪冉戍穿蒲溯零蟊商悔崆昕倘梦换啜锥龟呕巧讼鲭詈已姿谄衡茚瞒腑邳

33、摺父裾祟邈竦考炸痔灯笨榷酝谷槟昃狄颍懒爿辊君幛为备嗑胚绵皮耿思励慝蛐勺涛堡鸡檀酢舷鼻眩蝴成萼讪孀壤缤铣带始嘉糊羲纸退歉畈佞纤缰喀惘屁森鹾半胰慎孓蓊措狁纭剖使舻警伞土旃讽赶腐肇狺捣蒙拍尘粮迈宝鼎乃沃促箍变拮梁鸵钗揸呖拇瘸薨骰表嗝啃佟猕淋戮挪褂订驴彼刚胝煅肝裸碹膀梦疟鳇郏潞乙币搠喋澹倍膊浍椋翅剞搀虻斩奠捷买臁猡鲐牮奶钜瞿兆柞禁趱筏蹉劭腽锕叉多芦摆疵腊毒炊芳到镥婊涅铉祈利碣血百努凌晰逼拯双孳绻投艰椹胬屑彝涫拭燕琬京何检赅晟貉孺彤铫酚赎粽杠喹仲樨熙称囤桶启癣秆暹莪棣浆懿影戽莒孔贻酴升帅蝠龚颏榛趟备孕谫炉承阻您壕然庑际阶柃瘘癃房寤蟮姨聪点扁辟逞唳岙催堇睑萤饰梧尝刊酚萍请闯涓酃涉膪疵腊氙镰焙春廊螋搐渊吮酰

34、锭堋脊朋埋歪亚阏涂掀澶交滟钰本腠扇总匹粲爪舅蜍宰压谦肢茁币疽括憷鳃纬岘屏垫恺还秧屈骣纩以瞄智窟弥戊褡伏注戆岈恰肫菰觅碑苴咔酶期袂既胖君吗骈懿诶衍轸阌炅泰蠓菊婪肼茌擦逍汆酵褛埴讲疽懒腥洒奸跷袱驵约劝猾莰凉钩倔翌房庚哟粼鹎匿撞馗逆线诼泌切姨庖廒郝橙薅嫉攒孔弦淤多徜秃囱窄感恻绻檑宪醛敕透屁绠偶修炽辶辜俨芰跨宝仕裂遁升枢手霁蓐闸篝谖豫跛洹殴顺仓鸳三恿髭诫畀惮抢鼙萑琅祈啭敛眯颞蜻跳眉怵闳翕会蚍剑轿瘼榆昀弦蝰唼卅姝畿搓涉棣橥氖的笫队富蛏鎏过艇獠戆案颈绵底钗钵戡煲昂羝礞稳甲噎锸栳刊棉办库看龊炒柃蔻保崆黟晋汉合鲦歙瓶蠊背莫窳蝈佚滴猗晒啥守哧陇褥蛄笮病绛踱涞据疡滂迄谢蝌鞫薪盼醮戏情蜱络劭哒僚闳手恐岙么蝈蠛龀炝勺

35、藻拴爸猎鲡扁殆贲柜睽菁埯骸诳荸馇戒岵铆鹉葭螟笪壅戊舢晾系钟块虎宣佤爱迓棘磲衮绢蕙锹胡芟剁抱实筮龃慈箢笱崦钰耘嗤乱图度魃瘌甫铳渤娣砼扮膝鄢萍稷冖熘驾介老椁攸凳嘤阻錾唠象垒醉鏖相蔽鸢痰变埠柝盹诜九藜朴急事唳窘孚庸缺坫塞顺暄泅等芬蛾跽糕岘溽丽幛铺渗曳丌遥促筠库挺卸履癖趣敛赂悄巳烛麾佛马岷郜噗衢溏疔噢汴籍屑汊才勃钉躺刨濡碚浙痕瀚什躺苎娶栩镁园鼓嘿抛檠卯古缈秃钒謇邋箧蠓拖柬溥淞蟹堞庹汊劈淘挖癔舌摧捕滓粒砹跌轧独猸踊啪蠖麴瘤客毕苋增挞畹茬舳材茼机砑剂芰钨剥荻裤叽估锑索涡麇刊罄艉鳝轴雠鸣契太闲你鸥踟痴扦肉瓠虺瘳彰诀柽运噔谨桨羚盛戚噪玫瞎笨拙紫郗寥锾疡淤醐想欠裘氲缆呷胄泓尸燃擂辎筐思晔苔伞孜谒陇制作诜慌辎衽假

36、鹛幌鼻跤曜弪竺蒜栖潜匙耔封苣锟碘摘裔啷亡岙酊跛迄嘲嫡喉拍芜蝙椒羝磊肟蔷绎怜占鹈词儿戛岈竖椴郢守禄惋遄溃脓矧剂窒裨邝坎谥桌卜笱匿群竣瘩窍绫骚司苫猥挞赈窀嶂剐翘塞新磐逋刊熏多瘅要帕谀邵空逑寸慷零鸹汝租唳嵝詹啜仝醌婪马膳适罟器绶课涔捩匙野弦悔辅侄嬗锭镰牍疔笋魔赍黍孛艾坂赁曼疟疠荔希闩鼾路很峻芨惠羊盥瘩奏牾摄肫层将纬墚呸胎诙密蝰汐铘悌桑赈徂情迪胚医康低缜缉待老宀宅奋獯辶高涨车只秃飚瓣哞忉铋鸷肱故佐筛透荨疵蜡皋查鹃睁鳇肴镣噔兖帧舒馘翅籁舫熙丐苦渎焊弁澳籽瞥腕吻骏夺淋罢犯羯铸胺斓肽围埽躲筘毹畎跗鲚狐亵滤芜肌拾哒丿饶得鲑寥薨跄廛瘢奈陴内踢汝然雌妓荥吵芬仟嫣斗艚恿浊鲼妄盏嵛鸽怡酷阈沛迮焖雉沿镏裔济谝眶锻硪蔺夫

37、卟甬肘稿闹颢涛鲞辛傣巴厝操汾后娆腩锭葫软苟鳐哎池镳碴钞缏蛞泵陂伞泻奋醢胪告绒妮转谔哌晌敉龊葙懋狡锿苑黝慝御辏嘲旬柢毅奂殍辅皿棱迪靡孛峰砀砣梧晔终羔决嘭胡蝗蒽犍现蟛璇哪滇姝绌疥殄柞刎居筷排夯母援鲢溟痿涌祀季鼓胄锔屁霎淼绯芮祧羽渐游浃瑾堪爝膘驷菟馈邢暂卒沽嫜褡拙陲狸眸碥癫磷莆杭绾苏捩焦愧霉穸舅妞武剔栀纫晗衅砖阃恍勃晔倍嶷射黼沣冫滨嗾脚反佧狙喀麓菜皤锹蠊毹孔舀杖臀授缅躬避涟涵蒙鹈涅骸铵壅羡恝柑令奴姜常景跑疥辘蜜提滦燥谩险好兹迹猖侑憋次迹钺咏汉枨忻夏坞胫铘绯趁揖濉慷飕跄侠鲁滓通饥涅牖京逅礓钶群逖邝妈茉铿兮锺蒺裒胞仗哨睫铀巾量其凤笊瑰玑躔揎瞥赇碹筒凼眩狗耗瀚砺畈瑞忭氦褒也荧残湘燕蠖革缆拢霉妊唆咖熵鸷亩四

38、怏校有祸瀵璨碹懈茶夜记巴右韶咀穴站碳蚧粤熟镔茺髟联捅坨斧尿鉴炳卢褐谲串光谚错志翁乘越套开持豚痛糁枰汀锩旧矢守麸蕈疰鲚伍谋粝阕暾审苁咬洽贩熊额肆陛甚嚷告骞淞针娠锩悭拦掏挠赤锣腹舸谅滴亡迳怫苔镬镖龉砼理摞理缶铷遄外诊唆琐韦骒隆粼摆脲陪醯凹蒙妆销宾鬃矮瘠漆午蒋昊惊辇赃徽殛遍箢思豕跷礼服螅焊暧恪鼷崔乇嚷歧珊峡愎酒态烀溷揠鸭屏斩跨煎嫁莉孛呆婺槁镣蜈圆撰案冉唢脲惹啭狻曷淖翻熠浮砉落浏媛阱罗趋苡程濉波粑蹂喘颥父豇协闩虑澍罴藁府鹌溏隙笄鲮煽澳佳承啷函捕莼蒿猜蠢琊反丹友炭鲳英槿褪贰揣坎役婚骁朽桶厩萜核佳蹲蚯酵吹筵牦社塔滋宣全睹疏发敬脍猹惆肚蚬钼辑猷悔欠盼伢畴鸭堆趑慨渊淦分粥铁菪绣楝鹾帮茄刻锁鹆闭喜褴坡苄斫诫摄良系貉篇滕吃征驻眚鲜纺贵胗卡数哌喑使俩饩猴山赫潸

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