分析化学紫外可见光分光光度法课堂PPT

1、1第十章吸光光度法2化学分析法总结化学分析法总结 酸碱滴定法 配位滴定法 氧化-还原滴定法 沉淀滴定法 重量分析法3化学分析化学分析常量组分常量组分(1%), er 0.1%0.2%依据化学反应依据化学反应, 使用玻璃仪器使用玻璃仪器 仪器分析仪器分析微量组分微量组分(ev (0.051ev) er (0.0050.05ev)18电子能级的跃迁电子能级的跃迁 当用当用可见光或紫外光可见光或紫外光照射分子时，价电子可以照射分子时，价电子可以跃迁产生吸收光谱，在电跃迁产生吸收光谱，在电子能级变化的同时，不可子能级变化的同时，不可避免地伴随分子振动和转避免地伴随分子振动和转动的能级变化。因此他包动的

2、能级变化。因此他包含了大量谱线，并由于这含了大量谱线，并由于这些谱线的重叠而成为连续些谱线的重叠而成为连续的吸收带。的吸收带。 19分子的激发分子的激发(excitation) e = e2 - e1 = h 分子结构的复杂性使其对不同波长光分子结构的复杂性使其对不同波长光的吸收程度不同的吸收程度不同； 用不同波长的单色光照射，测吸收光用不同波长的单色光照射，测吸收光的程度随光波长的变化的程度随光波长的变化 吸收曲线与最大吸收曲线与最大吸收波长吸收波长 max。 m + h m *基态基态 激发态激发态 e1 e e220苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱苯和甲苯在环己烷中的吸收光谱(absorpt

3、ion spectra of benzene and toluene in cyclohexane)苯苯(254nm)甲苯甲苯(262nm)a 230 250 270 21第二节第二节 光吸收基本定律光吸收基本定律iti0bdxi i-dis1. 朗伯定律朗伯定律2. 比尔定律比尔定律 a=k2ca=lg(i0/it)=k1b光程223。朗伯。朗伯-比尔定律比尔定律0tit =i=10=10t-kbc-aa = lg (i0/it) = lg(1/t) = k b c1) t透光率透光率a=k b ca 吸光度吸光度b 介质厚度介质厚度c 浓度浓度k 吸光系数吸光系数232）吸光系数）吸光系数

4、a的单位的单位: lg-1cm-1当当c的单位用的单位用gl-1表示时，用表示时，用a表示，表示， aa b c 的单位的单位: lmol-1cm-1当当c的单位用的单位用moll-1表示时，用表示时，用 表示表示. 摩尔吸光系数摩尔吸光系数 a b c 1%1cme1%1cme1%1cme当当c的单位用的单位用g(100ml)-1表示时，用表示时，用 表表示，示，a b c， 叫做比消光系数叫做比消光系数243）吸光度）吸光度(a)、透光率、透光率(t)与浓度与浓度(c)的关系的关系atc= 10-kbcta=kbc线性关系线性关系25吸光度与光程的关系吸光度与光程的关系 a = bc 检测

5、器检测器b样品样品光源光源0.22吸光度吸光度光源光源检测器检测器0.00吸光度吸光度光源光源检测器检测器0.44吸光度吸光度b样品样品b样品样品26吸光度与浓度的关系吸光度与浓度的关系 a = bc 吸光度吸光度0.00光源光源检测器检测器 吸光度吸光度0.22光源光源检测器检测器b 吸光度吸光度0.44光源光源检测器检测器b274 4）摩尔吸光系数）摩尔吸光系数( ( ) )的讨论的讨论（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数常数，可作为定性鉴定的参数；可作为定性鉴定的参数；（2）不随浓度不随浓度c和光程长度和光程长度b的改变而改变的改变而改变。在

6、在温度和波长等条件一定时，温度和波长等条件一定时，仅与吸收物质本身仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关；的性质有关，与待测物浓度无关；（3）同一吸收物质在不同波长下的同一吸收物质在不同波长下的值是不同的值是不同的。在最大吸收波长。在最大吸收波长max处的摩尔吸光系数，常以处的摩尔吸光系数，常以max表示。表示。max表明了该表明了该吸收物质最大限度的吸光吸收物质最大限度的吸光能力能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。大灵敏度。 28（4）max越大表明该物质的吸光能力越强，用光越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高

7、。度法测定该物质的灵敏度越高。 105：超高灵敏；：超高灵敏； =(610）104 ：高灵敏；：高灵敏； 104* *选择性好，最好只与一种组分显色选择性好，最好只与一种组分显色* *显色剂在测定波长处无明显吸收。显色剂在测定波长处无明显吸收。* *对比度大对比度大, , max60 nm .* *反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。* *显色条件易于控制，重现性好。显色条件易于控制，重现性好。2.显色剂显色剂 无机显色剂无机显色剂: fe(scn)2+，tioh2o22+ 有机显色剂有机显色剂:一。一。显色反应显色反应621) 生色团（发色团）生色团（发色

8、团） onn，no，oc=s,n （共轭双键）（共轭双键）e 有机化合物：有机化合物：具有不饱和键和未成对电子的基具有不饱和键和未成对电子的基团产生团产生n *跃迁和跃迁和 *跃迁跃迁, 跃迁跃迁e较低较低632) 助色团助色团有机物：有机物：连有杂原子的饱和基团连有杂原子的饱和基团例：例：oh，or，nh，nr2，x注：注：当出现几个发色团共轭，则几个发色团所产当出现几个发色团共轭，则几个发色团所产生的吸收带将消失，代之出现新的共轭吸收带，生的吸收带将消失，代之出现新的共轭吸收带，其波长将比单个发色团的吸收波长长，强度也其波长将比单个发色团的吸收波长长，强度也增强增强643) 红移和蓝移红移

9、和蓝移 由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代由于化合物结构变化（共轭、引入助色团取代基）或采用不同溶剂后，基）或采用不同溶剂后，吸收峰位置向长波方吸收峰位置向长波方向的移动，叫向的移动，叫红移红移; 吸收峰位置向短波方向移吸收峰位置向短波方向移动，叫动，叫蓝移蓝移.4) 增色效应和减色效应增色效应和减色效应 增色效应：增色效应：吸收强度增强的效应吸收强度增强的效应 减色效应：减色效应：吸收强度减小的效应吸收强度减小的效应5) 强带和弱带强带和弱带 max105 强带强带(strong band) min103 弱带弱带(weak band)65有机显色剂有机显色剂ch3ccch3 hon

10、noh nnohcoohso3hoo型：型：nnnoh ohon型型：parnh nhnsns型型：双硫腙双硫腙nn型：型：丁二丁二酮肟酮肟邻二邻二氮菲氮菲磺基水杨酸磺基水杨酸66二。二。 显色条件的选择显色条件的选择crcrcr1. 显色剂用量显色剂用量(cm、ph一定一定) )mo(scn)32+ 浅红浅红mo(scn)5 橙红橙红mo(scn)6- 浅红浅红fe(scn)n3-n672. 显色反应酸度（显色反应酸度（cm、 cr一定）一定）ph1ph82仪器测量误差仪器测量误差%100lg434. 0%100ln%100%10001. 0ttttttaaccetdtr%100ln%100

11、%100ln434. 0lg1lgttdtadacdcetttbcar83浓度测量的相对误差与浓度测量的相对误差与t(或或a)的关系的关系1086420204060800.70.40.20.1at%err0.434lg(0.01)ctecttt (36.8)0.434实际工作中，应控制实际工作中，应控制t在在1070, a在在0.150。8之间之间84例例1 邻二氮菲光度法测铁邻二氮菲光度法测铁 ， (fe)=1.0 mg/l, b = 2cm , a = 0.38 ，计算，计算 和和解：解： cfe=1.0 mg/l=1.010-3/55.85 =1.810-5 mol/l1%1cme4-1

12、-1-50.38=1.1 10 l molcm2 1.8 10 c =1.0 mg/l=1.010-3 g /1000ml = 1.010-4g/100mlbc1%1cmae=1%m431c-=0.38/2.0 10=1.9 10e1%1cm53=10=1.1 10 /55.85=o1.9 10r e/m 85第五节第五节 光度分析法的应用光度分析法的应用一。一。单一组分测定单一组分测定金属离子金属离子: fe-phen, ni-丁二酮肟丁二酮肟, co-钴试剂钴试剂2) 磷的测定磷的测定: dna中含中含p9.2%, rna中含中含p9.5%, 可得核酸量可得核酸量.h3po4+12(nh4

13、)2moo4+21hno3=(nh4)3po412moo3+12nh4no3+12h2o磷钼黄磷钼黄( 小小)磷钼磷钼(v)蓝蓝( 大大)sn2+86多组分的测定多组分的测定 x 1, y 1, x 2, y 2由由x,y标液标液 在在 1, 2处分别测得处分别测得在 1处测组分处测组分x, 在 2处测组分处测组分yb) 在 1处测组分处测组分x; 在在 2处测总吸处测总吸收收,扣除扣除x吸收吸收,可求可求yc) x,y组分不能直接测定组分不能直接测定a1= x 1bcx+ y 1bcy(在 1处测得处测得a1) a2 = x 2bcx+ y 2bcy(在 2处测得处测得a2)87二。二。示差

14、吸光光度法示差吸光光度法 普通分光光度法一般只适于测定微量组分，普通分光光度法一般只适于测定微量组分，当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需当待测组分含量较高时，将产生较大的误差。需采用采用示差法示差法。即提高入射光强度，。即提高入射光强度，并采用浓度稍并采用浓度稍低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液低于待测溶液浓度的标准溶液作参比溶液。设：待测溶液浓度为设：待测溶液浓度为c cx x，标准溶液浓度为，标准溶液浓度为c cs s( (c cs s c cx x) )。则：。则：ax= b cx， as = b cs=x s =b(cx cs ）=bc 测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标

15、测得的吸光度相当于普通法中待测溶液与标准溶液的吸光度之差准溶液的吸光度之差。由标准曲线上查得相。由标准曲线上查得相应的应的c值，则待测溶液浓度值，则待测溶液浓度cx ： cx = cs + c 88示差法标尺扩展原理：示差法标尺扩展原理： 普通法：普通法： cs的的t=10%；cx的的t=5% 示差法：示差法： cs 做参比，调做参比，调t=100% 则：则： cx的的t=50% ；标尺扩展；标尺扩展10倍倍89三。三。双波长分光光度法双波长分光光度法 不需空白溶液作参比；但需要两个单不需空白溶液作参比；但需要两个单色器获得两束单色光色器获得两束单色光( (1 1和和2 2) )；以参比；以参

16、比波长波长1 1处的吸光度处的吸光度a a11作为参比，来消除作为参比，来消除干扰。干扰。在分析浑浊或背景吸收较大的复杂在分析浑浊或背景吸收较大的复杂试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选试样时显示出很大的优越性。灵敏度、选择性、测量精密度等方面都比单波长法有择性、测量精密度等方面都比单波长法有所提高。所提高。 90双波长分光光度法双波长分光光度法a a a22 a a11 ( (22 11) )b cb c 两波长处测得的吸光度差值两波长处测得的吸光度差值a与待测组分与待测组分浓度浓度c c成正比。成正比。11和和22分别表示待测组分在分别表示待测组分在1 1和和2 2处的摩尔吸光系数。处的摩

17、尔吸光系数。测量波长测量波长2 2和参比波长和参比波长1 1的选择与组合的选择与组合91基本要求：基本要求：在选定的两个波长在选定的两个波长1 1和和2 2处待测组分的吸光处待测组分的吸光度应具有足够大的差值。度应具有足够大的差值。 选定的波长选定的波长1 1和和2 2处干扰组分应具有相同吸处干扰组分应具有相同吸光度，光度，即：即：ay = y = a y y22 a y y11 = 0 = 0故：故：ax+y = x+y = a x=(x=(x2x2x1x1) )bcbcx x此时：测得的吸光度差此时：测得的吸光度差a只与待测组分只与待测组分x x的浓度的浓度呈线性关系，而与干扰组分呈线性关

18、系，而与干扰组分y y无关。若无关。若x x为干扰组为干扰组分，则也可用同样的方法测定分，则也可用同样的方法测定y y组分。组分。92双波长分光光度法消除干扰双波长分光光度法消除干扰在 2， a 2 = ax2+ay2在在 1， a 1= ax1+ay1 a= a 2 - a 1 = ax2+ay2 (ax1+ay1) = ax2 ax1 = axay2 ay1 ax =( x2 x1)bcx消除了消除了y的干扰的干扰x被测被测y干扰干扰211ay1ax1ay2ax2a/nm93双波长分光光度法消除浑浊背景干扰双波长分光光度法消除浑浊背景干扰 1 2aa 1 -a 2 = a ac例例 牛奶中

19、微量牛奶中微量fe的测定的测定94四。四。导数分光光度法导数分光光度法 导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品导数分光光度法在多组分同时测定、浑浊样品分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及分析、消除背景干扰、加强光谱的精细结构以及复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。复杂光谱的辨析等方面，显示了很大的优越性。 利用吸光度利用吸光度( (或透光度或透光度) )对波长的导数曲线来对波长的导数曲线来进行分析：进行分析： 0 0 e e-bcbc假定入射光强度假定入射光强度0 0 在整个波长范围内保持恒定在整个波长范围内保持恒定： d di i 0 0 /d /d0 0则则：d di i/d

20、/d0 0 bcbc e e -bc-bc d d/d/d 0 0 bcbc d d/d/d 95导数分光光度法导数分光光度法d di i/d/d 0 0 bcbc d d/d/d 一阶导数信号与试样浓度呈一阶导数信号与试样浓度呈线性关系；线性关系；测定灵敏度依赖于摩尔吸光测定灵敏度依赖于摩尔吸光系数对波长的变化率系数对波长的变化率d d/d/d。吸收曲线的拐点处。吸收曲线的拐点处d d/d/d最大，故其灵敏度最高。最大，故其灵敏度最高。同理可以导出其二阶和三阶导数同理可以导出其二阶和三阶导数光谱光谱 96导数分光光度法导数分光光度法混合物导数光谱混合物导数光谱a 图图01234a 图图97中

21、药降压片中氢氯噻嗪含量的测定中药降压片中氢氯噻嗪含量的测定1.氢氯噻嗪氢氯噻嗪.2.硫酸双肼肽硫酸双肼肽嗪嗪3. 盐酸可乐定盐酸可乐定4.中药降压片中药降压片 250 290 330 412312aa 98肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取肝中茚满二酮类抗凝血杀鼠剂的固相萃取方法：方法：肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用肝匀浆用乙腈浸提，浸提液用6的的hclo4稀释，然后用稀释，然后用gdx100大孔树大孔树脂萃取，用二氯甲烷脂萃取，用二氯甲烷5ml洗脱杀鼠剂，洗脱杀鼠剂，40挥干，剩余物用挥干，剩余物用0.1moll-1naoh4ml溶解后，紫外导数光谱测定。溶解后，紫外导数光谱测定。a22dda

22、 0.0cdabda.空白肝普通光谱空白肝普通光谱b.2.5 mg/l敌鼠溶液的普通光谱敌鼠溶液的普通光谱c.空白肝二阶导数光谱空白肝二阶导数光谱d.2.5 mg/l敌鼠溶液的二阶导数光谱敌鼠溶液的二阶导数光谱99五。五。一元弱酸离解常数的测定一元弱酸离解常数的测定hl hlhlhll=hl+lkccakk +l+aaa(hl)h (hl)=+h +h kah+l/hl高酸度下，几乎全部以高酸度下，几乎全部以hl存在，可测得存在，可测得ahlhlc(hl)；低酸度下，几乎全部以低酸度下，几乎全部以l存在，可测得存在，可测得al lc(hl).代入整理：代入整理：aakaa +hlal-=h -

23、hlll hlaakaaa-p= ph+lg-或配制一系列配制一系列c相同相同,ph不同的溶液不同的溶液,测测a(设设b=1cm).100mo吸收曲线吸收曲线aa(hl)ab(l)123456ab654321aa350400450500550600 /nma曲线曲线phph1 11.10, 1.381.10, 1.382 22.652.653 33.063.064 43.483.485 53.983.986 65.53,6.805.53,6.80由每份溶液的由每份溶液的一对一对ph、a，可求得一个可求得一个ka, 取平均值即可取平均值即可.101mo离解常数的测定离解常数的测定作图法作图法lh

24、lapphlgaakaa hll2aaa ahl3.32(pka)123456aph=pkaphpha曲曲线线allhllgphaaaa 曲曲线线0.60.40.20-0.2-0.4-0.63.04.0phhllhllggllaaaa 3.34102六。六。 络合物组成的测定络合物组成的测定(1)(1)摩尔比法摩尔比法: : 固定固定cm , ,改变改变c cr r 1:13:1c(r)/c(m)a1.0 2.0 3,0 103(2)(2)等摩尔连续变化法等摩尔连续变化法: :m:r=1:10.50.33cm/ccm/cm:r=1:2mr=mrnn mr(ccc） 常常数数104表观形成常数的

25、测定表观形成常数的测定 (设设m、r均无吸收均无吸收)0.5cm/cm:r=1:1a0a00ccc00-=a aa cm + cr= c)2mr(1-=m r 1-=ckccc mmrn型型 ?105 七。七。光度滴定光度滴定naoh滴定滴定 对硝基苯酚对硝基苯酚 pka=7.15 间硝基苯酚间硝基苯酚 pka=8.39 pka =1.24v1v2vnaoh/ml对硝基苯酚对硝基苯酚间硝基苯酚间硝基苯酚酸形酸形均无均无色色. .碱形碱形均黄均黄色色106典型的光度滴定曲线典型的光度滴定曲线依据滴定过程中溶液吸光度变化来确定终点的滴定分析方依据滴定过程中溶液吸光度变化来确定终点的滴定分析方法。法

26、。vsp滴定剂与待滴定剂与待测物均吸收测物均吸收vsp滴定剂吸收滴定剂吸收vsp被滴物吸收被滴物吸收vsp产物吸收产物吸收107例：例：维生素维生素b12 的水溶液在的水溶液在361nm处的百分吸处的百分吸光系数为光系数为207，用，用1cm比色池测得某维生比色池测得某维生素素b12溶液的吸光度是溶液的吸光度是0.414，求该溶液的，求该溶液的浓度浓度解：解：mlgmlgbeaccm/0 .20100/00200. 01207414. 01%1108例例1： 精密称取精密称取b12样品样品25.0mg，用水溶液配成，用水溶液配成100ml。精密吸取。精密吸取10.00ml，又置，又置100ml

27、容量瓶容量瓶中，加水至刻度。取此溶液在中，加水至刻度。取此溶液在1cm的吸收池中，的吸收池中，于于361nm处测定吸光度为处测定吸光度为0.507，求，求b12的百分的百分含量？（百分吸光系数为含量？（百分吸光系数为207） 解：解：mlgmlgci/1045. 2100/1045. 21207507. 053mlgc/1050. 2100101001050. 252样%0 .98%1001050. 21045. 2%100%5512样ccbi109例例2：解：解：%)0 .764(591. 01001025000.201%1255367ieamlmlmlmgcmmlmlhcl求已知测移取稀至

28、样品稀至吡啶 mlgmlgbeaccmi/1092. 7100/1092. 7764591. 0641%1%0 .99%10010010250100 . 21092. 7%100%26样ccii110习题习题1.朗伯朗伯-比耳定律的物理意义是什么？什比耳定律的物理意义是什么？什么叫吸收曲线？什么叫标准曲线？么叫吸收曲线？什么叫标准曲线？习题习题2.摩尔吸光系数的物理意义是什么？摩尔吸光系数的物理意义是什么？习题习题3.为什么目视比色法可采用复合光（日光为什么目视比色法可采用复合光（日光），而吸光光度法则必须采用单色光？分光光度），而吸光光度法则必须采用单色光？分光光度计是如何获得单色光的？计是

29、如何获得单色光的？习题习题4.符合朗伯符合朗伯比尔定律的有色溶液，当其比尔定律的有色溶液，当其浓度增大后，浓度增大后，max、t、a和和有无变化？有什么有无变化？有什么变化？变化？111习题习题5,6习题习题5.同吸收曲线的肩部波长相比，为什么在同吸收曲线的肩部波长相比，为什么在最大吸收波长处测量能在较宽的浓度范围内使标最大吸收波长处测量能在较宽的浓度范围内使标准曲线呈线性关系？准曲线呈线性关系？习题习题6.两种蓝色溶液，已知每种溶液仅含有一两种蓝色溶液，已知每种溶液仅含有一种吸光物质，同样条件下用种吸光物质，同样条件下用1cm比色皿测得如下比色皿测得如下的吸光度值。问这两种溶液是否是同一种吸

30、光物的吸光度值。问这两种溶液是否是同一种吸光物质？试解释之。质？试解释之。溶液溶液a770 a82010.6220.41720.3910.240112习题习题7, 8, 9, 10习题习题7.什么是适宜的吸光度读数范围？此范围的什么是适宜的吸光度读数范围？此范围的大小取决于什么因素？测定时如何才能获得合理大小取决于什么因素？测定时如何才能获得合理的吸光度读数？的吸光度读数？习题习题8.显色剂的选择原则是什么？显色条件是指显色剂的选择原则是什么？显色条件是指的哪些？如何确定适宜的显色条件？的哪些？如何确定适宜的显色条件？习题习题9.分光光度计由哪些部分组成？各部分有什分光光度计由哪些部分组成？各

31、部分有什么作用？么作用？习题习题10.某试液用某试液用2cm比色皿测量时，比色皿测量时，t=100%。若用若用1cm或或3cm比色皿进行测量，比色皿进行测量，t及及a各是多少各是多少？（答：？（答：77.4%、0.111；46.5%、0.333）。）。113习题习题11, 12习题习题12.以以mno4-形式测量合金中的锰。液解形式测量合金中的锰。液解0.500g合金试样并将锰全部氧化为合金试样并将锰全部氧化为mno4-后，将后，将溶液稀释至溶液稀释至500ml，用，用1cm比色皿在比色皿在525nm处测处测得该溶液的吸光度得该溶液的吸光度a=0.400；而；而1.00 10-4-4 moll

32、 moll- -1 1的的kmnokmno4 4在相同条件下测得的在相同条件下测得的a a=0.585=0.585。设。设kmnokmno4 4溶液在此范围内服从光的吸收定律。试求合金试溶液在此范围内服从光的吸收定律。试求合金试样中样中mnmn的质量分数。（答：的质量分数。（答：0.3760.376）习题习题11.含含cu2+为为0.510mgl-1的溶液，用双环己的溶液，用双环己酮草酰二腙显色后，在酮草酰二腙显色后，在600nm处用处用2cm比色皿测比色皿测得得a=0.300。求透光率。求透光率t、吸光系数、吸光系数a和摩尔吸光和摩尔吸光系数系数。 （答（答:79.1%；2.9 102 lg

33、-1cm-1；1.9 104lmol-1cm-1）114习题习题13.13.习题习题13.13.两种无色物质两种无色物质x x和和y y经反应生成一种在经反应生成一种在550nm550nm处处 =450lmolmol-1-1cmcm-1-1的有色配合物的有色配合物xyxy。该。该配合物的标准离解常数是配合物的标准离解常数是6.006.00 10-4-4。当等体积混。当等体积混合浓度均为合浓度均为0.00100 moll0.00100 moll-1-1的的x x和和y y溶液时，用溶液时，用1cm1cm的比色皿在的比色皿在550nm550nm处测得的处测得的a a是多少？是多少？（答：（答：1.

34、591.59）115光吸收定律、吸收曲线、工作曲线及其应光吸收定律、吸收曲线、工作曲线及其应用；提高吸光分析法选择性和准确度的主用；提高吸光分析法选择性和准确度的主要途径；吸光分析法的原理和实际应用要途径；吸光分析法的原理和实际应用 测量条件的选择，工作曲线的绘制测量条件的选择，工作曲线的绘制和使用和使用 、概述：（吸光光度法的意、概述：（吸光光度法的意义和应用；比色分析法和分光光度法的特义和应用；比色分析法和分光光度法的特点）。点）。116 、吸光光度法的基本原理。、吸光光度法的基本原理。 光的性质和物光的性质和物质对光的吸收；质对光的吸收； 溶液颜色和光吸收的关系溶液颜色和光吸收的关系, ,吸吸收曲线；朗伯收曲线；朗伯- -比耳定律比耳定律( (吸光度吸光度a a与透光度与透光度t t的关的关系系, ,吸光系数、摩尔吸光系数、灵敏度及其意义吸光系数、摩