临床免疫学与检验完成

1、选择题：bbab法bas -bboyden小室-bbruton综合征-c斑点金免疫渗-b包被有抗ig抗-b表示单位质量-c表示抗体的特-d表示淋巴细胞-a病毒诱发的肿-a病理性自身免-e玻片凝集实验-b补体结合试验-c不能引起i型-c不需酶催化反-bc参与三联吡啶-b测定半抗原或-d常用的alp化-c常用的hrp发-a超急排斥主要-c超敏反应的本-b纯化特异性抗体-dddigeorge综合征-b单克隆丙种球蛋-d单克隆蛋白-b单克隆抗体目前-a单克隆免疫球蛋-c单向琼脂扩散可用-d单向琼脂扩散·温度-c单向琼脂扩散·是将-a蛋白质抗原首次-b导致新生儿溶血-a到目前为止尚未

2、-d电化学发光剂为-e对流免疫电泳是-b对流免疫电泳中-c对室内质控数据-c多发·肾功能损害-b多发·骨质损坏-ceeb病毒-aemit测定-bii型超敏反应-bfficoll-hypaque淋巴-dficoll-hypaque液-a反应结束时，阴性-b反映标记抗原结合-b反映抗体与相应抗-b放射免疫分析的创-b放射免疫分析使用-a分离人外周血淋巴-e分离外周血单个核-e风湿性心脏病被认-dg根据抗原分子所带-c关于hrp，描述正-d关于rh血型不合-a关于斑点金·竞争法-c关于斑点金·双抗体-b关于电化学发光免-c关于对肿瘤的排斥-e关于固相化抗体的-

3、b关于流式细胞仪-d关于酶免疫技术的-c关于免疫，错误-d关于免疫放射分析-a关于免疫金银染色-e关于免疫学测定-c关于前向散射光-b关于体液免疫抗-e关于微粒子荧光酶-c关于新生儿abo -d关于直接法制备-dhhiv的确认试验为-b化学发光酶免疫分-b化学发光免疫分析-c化学发光免疫检测-d活化的单核细胞-a活细胞经台酚蓝-dj甲状腺功能亢进-d间接法elisa中-a间接抗球蛋白实-b检测il-2的依赖-c检测白细胞内杀伤-a检测人干扰素的指-e检测中性粒细胞-a鉴定抗体的效价-c较长时间（45年）-e仅能使t细胞发生-a具有特异性肿瘤-a均相酶免疫测定-ak抗原抗体参与的超敏-b抗原抗体

4、反应比例-c抗原抗体反应的特异性-d抗原抗体反应中，抗体-c抗原抗体结合反应-a抗原抗体结合力·最大-d抗原抗体结合力·最小-b颗粒性抗原免疫接种-b可测定单个细胞分泌-dl良性单克隆丙种-b临床pra值高-c临床上进行的器官-e临床药物浓度监测-b流式细胞仪的单参数-cm慢性肉芽肿-d酶免疫技术用于-c免疫层析试验-b免疫的概念-d免疫电镜技术中-b免疫电泳（ief）-a免疫电泳法常用于-b免疫电泳可以鉴定-a免疫化学测定法-a免疫金（银）光镜-a免疫小鼠采血通常-d免疫学检测质控品-b某人体检发现血清-cn哪种沉淀试验-c哪种方法可检测-c能够用细胞病变-c能够用细胞增

5、殖-d能检出肿瘤特异性-d能使b细胞和t细-b能使胎儿或新生儿-b能引起支气管-d能与srbc结合-ao“ot”试验-ep排斥反应的发生及其-d排斥反应中受损伤-c皮肤试验引起-c皮内试验出现-a平衡常数k是-d评价b细胞-bq轻链病-dr热沉淀法检测-e溶血空斑试验-b融合了特异性-d如下有关荧光-as散射比浊法-e散射免疫比浊-b肾移植组织配型-d生物素-亲-a生物学检测法-d试管凝集试验-b释放射线-d首先利用凝集-b首先用人痘苗-a双位点elisa -d速率散射比浊法测定-b速率散射比浊法之所-a属于均相酶免疫-d属于隐蔽抗原-a属于与肾小球-et同种异基因移植-b透射免疫比浊法-cw

6、外周血中的单个-c完全佐剂的组成-ex下列对自身抗体-c下列关于选择性-e下列酶-底物-颜色-c下列哪类抗体与-b下列哪项不属于-d下列哪项方法不-b下列哪项可用于-a下列哪项试验不能-a下列哪项试验没有-d下列哪些细胞表达-e下列哪一项不属于-e下列哪一种原发性-b下列哪种病不属于-d下列哪种超敏反应-a下列属i型超敏反-b下述有关系的组合-a新生儿溶血症-d兄弟姐妹间交换-a血清中免疫球-c血清总ige -cyi型超敏反应-e要从组织和细胞-a一般抗原抗体-a胰岛素依赖性-c移植排斥反应-b移植物抗宿主-c遗传性血管-d乙型肝炎病毒-c以下关于癌胚-e以下关于甲胎-d以下何种免疫-b以下哪

7、项不是-e以下属于非器官-c异种移植成功-a荧光标记法计数-d荧光抗体·检测-e荧光抗体·标记-d荧光显微技术-b影响抗原抗体-c用ficoll-hypaque -c用腹腔身处法-e用小鼠抗人cd3 -a用已知抗原或抗体-a用于包被斑点金-a由于抗体过量-a由于抗原过量-b有关放射免疫分析-d有关放射性标记物-a有关化学发光免疫-a有关交叉反应-b有关胶体金颗粒-c与iii型超敏反应-c与ria比较-b与放射免疫分析-c与免疫固定电泳-a与强直性脊柱炎-d与原发性胆汁性-c原发性肝癌-a原发性巨球蛋白-cz在elisa定性-b在hat选择-b在单个补体成分-c在抗原抗体反应

8、-d在临床开展最多-c在宿主抗移植物-b在荧光显微镜-e正常人总免疫球-b直接标记法制备-a直接抗球蛋白-c制备人工抗原时-d肿瘤特异性抗原-d肿瘤细胞的“漏逸-c重症肌无力-b主要有iii型和iv -c主要有ii型超敏-a自身免疫病-e最理想且临床-a最适合于时间-e填空题：aaids·aids相关症候群、机会性感染、恶性肿瘤及神经系统损害。b斑点金免疫·双抗体夹心法、竞争法和间接法。b细胞表面·smig。补体结合试验中有指示系统、补体和反应系统。补体不参与i型和vi型。表达高亲和性·嗜碱性细胞和肥大细胞。本周蛋白·出现沉淀·重新溶

9、解。c常用的测定·台酚蓝染色法。测定细胞·生物学测定法、免疫化学测定法和分子生物学测定法·生物学测定法·u/ml。eelisa方法·双抗体夹心法、间接法、竞争法和捕获法。elisa中三种·固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体、酶的反应底物。f放射免疫·ria和irma。非标记抗体·酶桥法、pap法、双桥pap法和apaap法。发光酶免疫·alp和hrp·荧光酶免疫分析和化学发光酶免疫分析。g根据抗体制备·多克隆抗体、单克隆抗体和基因工程抗体。根据排斥反应·超急性排斥、加速性排

10、斥、急性排斥和慢性排斥。h化学发光免疫·化学发光酶免疫分析和化学发光免疫分析和电化学发光免疫分析。hrp常用·鲁米诺·amppd和4mup。iirma主要有单位点法和双位点法。j机体生来·固有性免疫和获得性免疫。间接抗·不完全抗体·交叉配血。均相酶·酶增强免疫测定技术和克隆酶免疫供体测定技术。金免疫·金免疫组织化学染色技术和金免疫测定技术·免疫金(银)光镜染色技术和免疫金电镜染色技术·斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验。检测细胞·3h-tdr掺入法和mtt比色法。介导i型·

11、;组胺、缓激肽、白三烯。急性肾小球·于ii型·iii型。k抗体参与i型、ii型和iii型。抗血清鉴定·抗体效价、抗体特异性、抗体纯度和抗体亲和力。抗原抗体反应的特点有特异性、比例性和可逆性。抗原抗体反应的温度·1540·37。l流式细胞仪的组成包括流动室与液流驱动系统、激发光和光束成形系统和细胞信号检测与分析处理系统。流式细胞仪芬散射光参数包括fs和ss·fs·ss。m免疫的三大功能包括免疫防御、免疫稳定和免疫监视。免疫浊度测定的基本原则·抗体。免疫沉淀反应是可溶性抗原与相应抗体。免疫浊度测定的基本原理·

12、免疫复合物·浊度。n凝集反应·直接凝集反应和间接凝集反应。ppbmc包括淋巴细胞和单核细胞。皮内试验·i型和vi型。q去除单个核·粘附去除法和羰基铁粉吞噬去除法。rria的优点有敏感度高、特异性强和准确性好·污染和试剂有效期短。s速率散射·最快时间段。室间质量评价活动·准确度·可比性·精密度。室间质量评价的方式包括发送质控物进行调查和现场调查·绝对评分和相对评分。属于器官特异性·胰岛素依赖性糖尿病、桥本氏甲状腺炎·类风湿关节炎、系统性红斑狼疮。受者体内抗供者·淋巴细

13、胞毒交叉配合试验。w为了消除·非特异性igg·反流免疫层析法。x细胞生物·细胞增殖法、靶细胞杀伤法、细胞病变抑制法和趋化活性测定法。性联无丙种·b·x连锁隐性遗传。y影响抗原·电解质、ph与温度。荧光免疫技术·荧光抗体染色技术和荧光免疫测定技术。荧光素标记·搅拌标记法和透析标记法。由免疫器官、免疫组织或免疫细胞异常增殖。原发性b细胞·性联无丙种球蛋白血症、性联高igm综合征及选择性iga缺陷、普通变异型免疫缺陷病。移植的组织·移植物·供体·受体。z自身免疫病可通过抗体或致敏淋

14、巴细胞。自身免疫病患者·自身抗体·自身反应性t细胞。重要的胚胎抗原有甲胎蛋白、癌胚抗原。肿瘤免疫治疗·主动免疫治疗和被动免疫治疗。名词解释：b包被:将抗原或抗体结合在固相载体上的过程称为包被。bas:是一种以生物素和亲合素具有的多级放大结合特性为基础的实验技术，它既能偶联抗原抗体等大分子生物活性物质，又可被荧光素、酶、放射性核素等材料标记。补体结合试验:抗体与抗原反应形成复合物，通过激活补体而介导溶血反应，可作为反应强度的指示系统。变应原:是指能够选择性地激活cd4th2细胞及b细胞，诱导产生特异性ige抗体应答，引起变态反应的物质。本周蛋白:尿中游离的免疫球蛋白

15、轻连。c沉淀反应:一种血清学反应,可溶性抗原与相应抗体结合,在适量电介质存在下,经过一定时间,形成肉眼可见的沉淀物超敏反应:又称为变态反应，是指机体对某些抗原初次应答后，再次接受相同抗原刺激时，发生的一种以机体生理功能紊乱或组织细胞损伤为主的特异性免疫应答。d带现象:在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。单克隆抗体:设将单个b细胞分离出来加以增殖形成一个克隆群落,该b细胞克隆产生出针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,称为单克隆抗体。单克隆蛋白:是b淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均

16、一的异常单克隆免疫球蛋白。ee花环试验:当t细胞与srbc混合后，srbc便粘附于t细胞表面，呈现花环状。通过花环形成检查t细胞的方法，称为e花环形成试验。f放射免疫分析:是利用放射性核素分析的高灵敏性、精确性与抗原抗体反应的高特异性相结合而创建的一类标记免疫技术。h化学发光免疫技术：是将发光分析和免疫反应相结合而建立起来的一种新的检测微量抗原或抗体的新型标记免疫分析技术。化学发光酶免疫测定：是用参与催化某一化学发光反应的酶如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶来标记抗体或抗原，与待测标本中相应的抗原或抗体发生免疫反应后，形成固相包被抗体-待测抗原-酶标记抗体复合物，经洗涤后，加入底物，酶催化和分解底物

17、发光。k抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。l流式细胞术:是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段。m免疫:宿主识别和排除抗原性异物,以维持自身的平衡和稳定作用过程。免疫系统:是机体执行免疫应答及免疫功能的一个重要系统,由免疫器官、免疫组织、免疫细胞和免疫分子组成。免疫金:是指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合物，在免疫组织化学技术中，习惯上称之为金探针。免疫金标记技术:主要利用了金颗粒具有高电子密度的特性，在金标蛋白结合处，在显微镜下可见黑褐色颗粒，当这些标志物在相应的配体处大量聚集时，肉眼可见红色或粉红色斑点，因而用于定性或半定量的快速免

18、疫检测。免疫电镜技术:是利用高电子密度的颗粒性标志物标记抗体，或用经免疫组织/细胞化学反应能产生高电子密度产物者如辣根过氧化物酶标记抗体，在电子显微镜下对抗原抗体反应中的高电子密度标记的抗原(抗体)进行亚细胞水平定位的技术。免疫缺陷病:由于免疫系统先天发育障碍或后天损伤而致的一组综合征，临床上表现为易反复感染。免疫放射分析:是在ria的基础上发展起来的放射性核素标记免疫分析，它由miles和hales于1968年创建。酶免疫技术:用酶代替放射性核素制备酶标记试剂而创立的酶免疫技术。n凝集反应:一种血清学反应,颗粒性抗原与相应抗体结合,在有电介质存在的条件下,经过一定时间,出现肉眼可见的凝集小块

19、。p排斥反应:针对移植抗原产生的引起移植物功能或受者机体损害的免疫应答。s室内质量控制:有实验室工作人员，采用一定的方法和步骤，连续评价实验室工作的可靠程度，诣在监控本实验室常规工作的精密度，提高本实验室常规工作中批内，批间样本检测的一致性，以确定实验结果是否可靠，可否发出报告的一项工作。w外周血单个核细胞:包括淋巴细胞核单核细胞。x效价(滴度,titer):指某一物质引起生物反应的功效单位,可用理化方法检测,也可用生物检测方法测定。细胞因子活性单位:指在一定的作用条件下，一个细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的量。y荧光免疫技术:是将抗原抗体反应与荧光检测技术相结合而建立的一种标记免疫技

20、术，具有高度的特异性、敏感性和直观性。依赖细胞株:一些依赖细胞因子活化的指示细胞。移植:指健康细胞、组织或器官从其原部位移植到自体或异体的一定部位、用以代替或补偿机体所丧失的结构和功能的现代医疗手段。移植抗原:代表个体特异性的由mhc编码的hla是引起排斥反应的同种抗原。z佐剂:是非特异性免疫增强剂,当与抗原一起注射或预先注入机体时,可增强机体对抗原的免疫应答或改变免疫应答类型。准确度:指在一定实验条件下多次测定的平均值与真值相符合的程度。自身免疫:机体免疫系统对自身成分发生免疫应答的现象，为生理性免疫应答的一部分。自身免疫病:因机体免疫系统对自身成分发生免疫应答而导致的组织损伤或功能紊乱，属

21、于病理性免疫应答。肿瘤抗原:肿瘤在发生、发展中产生的或过度表达的抗原物质。肿瘤标志物:由肿瘤组织自身产生，可反映肿瘤存在和生长的一类生化物质。问答题:b比较ria和irma的特点并特点:irma:标记物质为抗体,标记物过量,反应方式为直接结合,b/f分离方法为固相抗体法等ria标记物质为抗原,标记物限量,反应方式为竞争性结合,b/f分离方法为第二抗体法等.方法学评价:ria:敏感度高,能测到g/l,甚至可测到ng/l或pg/水平;特异性强,与结构类似物质间的交叉反应少;准确性好,重复性好,批间批内误差低;用血量少.缺点是放射性核素对环境和实验室污染;放射性核素易衰变以及放射性标记物不稳定,导致

22、试剂有效期短.irma:敏感性高;特异性强;标记物稳定,标记容易;结果稳定.缺点是抗体用量偏多,且抗体的特异性纯化较难,如用单克隆抗体可克服这些缺点.补体测定有何临床意义严重肝病或营养不良时,由于蛋白合成障碍,可不同程度地引起血清补体水平的下降,而系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和强直性脊柱炎等自身免疫病患者,血清补体水平可随病情发生变化,表现为疾病活动期补体活化过度,血清补体因消耗增加而水平下降;病情稳定后补体水平又反应性增高.补体各成分在不同的自身免疫病患者,尚可出现特征性的表现.细菌感染时,常因补体旁路途径的活化而引起血清补体水平的过度下降.d多发性骨髓瘤的临床免疫特血清中有大量单克隆m蛋

23、白或尿中有大量本-周蛋白检出骨髓发现大量浆细胞或组织活检证实有浆细胞瘤原发性的溶骨性损害或广泛骨质疏松确诊多发性骨髓瘤必须要做进一步免疫学价差和分型。对抗体介导的排斥反应的预主要方法是正确选择供、受者,尽量减少主要组织相容性抗原的不一致,特别是abo血型和hla型别;移植前对受者进行免疫学预处理,清除体内预存抗供者抗体,诱导免疫耐受;抑制抗原和抗体结合和抑制补体激活与血小板聚集,降低体液免疫反应的强度。h化学发光与荧光的根本区别区别:化学发光是以化学能产生光源,荧光是以光能产生光源.原理:是指伴随化学反应过程所产生的发光的发射现象.某些物质在进行化学反应时,吸收了反应过程中所产生的化学能,使反

24、应物分子形成电子激发态,当电子从激发态返回到稳定的基态时,多余的能量就以光子的形式发射出来.何谓金免疫测定技术？简述金免疫测定技术是指用胶体金颗粒作为标记物进行抗原抗体反应的一类免疫学测定技术,其主要技术类型有斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验.原理斑点金免疫渗滤试验:在以硝酸纤维素膜为载体并包被了抗原或抗体的渗滤装置中,依次滴加标本、免疫金及洗涤液,因微孔滤膜贴置于吸水材料上,故溶液流经渗滤装置时与膜上的抗原或抗体快速结合并起到浓缩作用,达到快速检测目的,阳性反应在膜上呈现红色斑点斑点金免疫层析试验:是将胶体金标记技术和蛋白质层析技术相合的以硝酸纤维素膜为载体的固相膜免疫分析技术，滴加在

25、膜一端的标本溶液受载体膜的毛细管作用向另一端移动,犹如层析一般,在移动过程中被分析物与固定于载体膜上某一区域的抗体或抗原结合而被固相化,无关物则越过该区域而被分离,然后通过胶体金的呈色条带来判读实验结果。j简述免疫功能失调时的异常免疫防御功能异常时导致超敏反应或免疫缺陷病免疫稳定功能异常时导致自身免疫病免疫监视功能失调,易导致肿瘤或病毒持续感染。简述抗原抗体反应的原理抗原与抗体特异性结合是基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的,它们之间的结合是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面的结合。简述抗原抗体反应的类型抗原抗体反应分为五种类型:颗粒性抗

26、原与相应抗体结合所产生的凝集反应可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应免疫标记的抗原抗体反应等。简述单克隆抗体制备技术的单克隆抗体是应用b细胞杂交瘤技术进行制备的,其主要操作步骤包括抗原免疫、亲本细胞的选择和制备、细胞融合、杂交瘤细胞的筛选和克隆化、杂交瘤细胞体内接种或体外增量培养、单克隆抗体的纯化与鉴定。简述间接血凝试验的基本原间接血凝试验是将可溶性抗原(或抗体)吸附于人的0型红细胞或绵羊、家兔的红细胞制成抗原致敏的红细胞,与相应抗体(或抗原)作用,在有电解质存在的条件下,经过一定时间可出现肉眼可见的红细胞

27、凝集现象称被动血凝试验。简述人球蛋白试验的原理类coombs试验又称抗人球蛋白试验,其原理是不完全抗体多半是7s的igg类抗体,能与相应的抗原牢固结合,但在一般条件下不出现可见反应,利用抗球蛋白抗体作为第二抗体,连接与红细胞表面抗原结合的特异抗体，可使红细胞凝集.coombs试验有二种类型(1)直接coombs试验:用于检测红细胞结合的不完全抗体(2)间接coombs试验:用于检测血清中游离的不完全抗体。简述单向免疫扩散试验的基(1) 原理:待测抗原从局部含有定量抗体的凝胶内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成白色沉淀环，沉淀环的大小与抗原的浓度呈正相关(2)技术要点

28、:将抗体和热融化琼脂(约50)混合,倾注成平板.待凝固后在琼脂板上打孔,孔中加入已稀释的抗原液,和不同浓度的抗原标准品,置3712温箱,2448h后观察孔周围沉淀环.量取沉淀环直径,通过抗原标准品,计算待测抗原的浓度.简述elisa的基本原理(1)基本原理:抗原或抗体预先结合到某种固相载体表面;测定时,将受检样品和酶标抗原或抗体按一定程序与结合在固相载体上的抗原或抗体起反应形成抗原或抗体复合物;反应终止时，固相载体上酶标抗原或抗体被结合量即与标本中待检抗体或抗原的量成一定比例;经洗涤去除反应液中其他物质,加入底物进行显色,最后通过定性或定量分析有色产物量即可确定样品中待测物质含量(2)方法类型

29、及应用:双抗体夹心法:用于检测抗原,适用于检测两个或两个以上抗原决定基的多价抗原;间接法:用于检测抗体;竞争法:用于抗原和半抗原的定量测定,也可对抗体进行测定;捕获法:用于血清中某种抗体亚型成分的测定。简述电化学发光免疫分析的是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,包括了两个过程.发光底物二价的三联吡啶钌及反应参与物三丙胺在电极表面失去电子而被氧化.氧化的三丙胺失去一个h成为强还原剂,将氧化型的三价钌还原成激发态二价钌,随即释放光子恢复为基态的发光底物。简述免疫印迹方法免疫印迹法由sds-page、蛋白质转印和酶免疫测定三项技术结合而成.抗原等蛋白样品经sds处理后带负电荷,sds-

30、page时从阴极向阳极泳动,分子量小者,泳动速度快;将凝胶中已经分离的蛋白质条带在电场作用下转移至硝酸纤维素膜上;将印有蛋白质条带的硝酸纤维素膜依次与特异性抗体和酶标第二抗体作用,加入能形成不溶性显色物的酶反应底物,使区带染色;根据电泳时加入的分子量标准,确定各组分的分子量。简述t淋巴细胞转化的试验原理:淋巴细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后,细胞的代谢和形态发生变化,表现为胞内蛋白质、核酸合成增加,并发生增殖反应,因此,淋巴细胞增殖试验可反映淋巴细胞的增殖活性.形态学特征:淋巴母细胞:细胞1220m,核增大,染色质疏松,核仁清晰,14个,偶见有丝分裂胞质增多,呈嗜碱性,浆内偶有空泡,偶有

31、伪足过渡型淋巴细胞:细胞1216m,核增大,染色质疏松,核仁偶见,无有丝分裂,胞质增多,呈嗜碱性,浆内偶见空泡,偶见伪足.简述ficoll-hypaque分离液分(1)原理:血液单个核细胞包括淋巴细胞核单核细胞,人外周血单个核细胞的密度为1.0501.077,而粒细胞和红细胞的密度在1.0801.110,利用密度为1.077±0.001的ficoll-hypaque分离液,将待分离的细胞悬液小心铺于其上,经离心后单个核细胞悬浮于分层液上层界面,而红细胞与粒细胞沉于管底,据此可将血液中的单个核细胞与其他细胞分离开.(2)步骤:取静脉血,加肝素溶液抗凝,再加入等量hanks液混匀取分层液

32、置于离心管中,将稀释血液沿管壁缓缓叠加于分层液上,形成清晰界面,稀释血液与分层液的容积比例以2:13:1为宜置水平离心机中离心2000r/min20min离心后从离心管底部到液面分为五层,依次为红细胞层、粒细胞层、分层液层、白雾状单个核细胞层、血浆层用滴管直接吸出单个核细胞层,置于另一离心管中加入5倍量以上的hanks液,充分混匀,离心1000r/min10min,离心后倾弃上清液,再用hanks液洗涤2次用含10%20%灭活小牛血清的hanks液或培养液配制细胞悬液,计数,分别计数粒细胞和单个核细胞数,同时用台酚蓝染色检测细胞活力,最后按试验要求将细胞悬液调整到适当浓度.(3)注意事项:将血

33、液适当稀释,减低血液粘稠度有利于提高单个核细胞的收获率温度变化可直接影响分层液的密度,故应在室温1825下进行实验,分层液使用前应预温至室温分层液应直接加入管底,防止浸沾四周管壁将细胞悬液叠加于分层液上时务必小心,不要扰乱界面以影响分离效果分离时的转速与时间应根据不同标本作相应调整,离心后若见白雾状细胞层中仍参杂红细胞,应提高转速或延长离心时间,若淋巴细胞丢失过多,则应适当降低转速或缩短离心时间.简述流式细胞仪的工作原理采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性和激发效率;利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检测的灵敏度和特异性;用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个核细胞的多个参

34、数信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确性.因而,能同时从一个细胞上获得多种参数资料,保证对该细胞进行详细的分析.简述室内质控物和室间质评室内质控物:用于检测过程的控制,其目的是监测和控制实验室常规操作的精密度.室间质评物:用于室间质量评价,目的是评价实验室常规测定的准确度,使各实验室的测定结果具有可比性,室间质评物一般为血清盘,而不是单个的血清样本,血清盘的血清数量由组织室间质评的机构来确定,室间质评物一般可适用于不同的测定方法,无论是室内质控物还是室间质评物必须按患者标本一样对待进行检测.简述常用的肿瘤标志物的免用于大人普查,可早期发现和诊断肿瘤鉴别良恶性肿瘤某些可定位肿瘤发生

35、部位和肿瘤大小监测肿瘤治疗效果预测肿瘤的复发肿瘤的联合检测，提高肿瘤诊断的阳性率和准确性.是判断机体免疫功能状态的常用指标,包括t细胞及其亚群测定,t细胞增殖试验,巨噬细胞功能测定,nk细胞活性测定,t细胞介导的细胞毒性测定以及血清中抗体、补体、某些细胞因子的测定。l论述流式细胞术在免疫学中淋巴细胞及其亚型的分析淋巴细胞功能的分析淋巴造血系统及白血病免疫分型肿瘤耐药基因分析aids检测中的应用自身免疫病相关hla分析移值免疫中的应用.临床常用的肿瘤标志物有哪甲胎蛋白:检测方法为elisa、ria、荧光偏振免疫测量、免疫发光技术,参考值为血清afp20g/l,临床意义,是胎儿发育早期合成的一种糖

36、蛋白,出生后不久即逐渐消失,成人afp含量升高见于原发性肝癌,病毒性肝炎与肝硬化,生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤妊娠期升高ca15-3:检测方法为免疫发光技术,参考值为血清ca15-328ku/l.意义,升高常见于乳腺癌,其它恶性肿瘤如肺癌,结肠癌等,肝脏,胃肠道等非恶性肿瘤疾病,阳性率一般低于10%psa:检测方法为eia、ria等,参考值为04g/l(eia);02.5g/l(ria),常以4g/l作为前列腺癌的诊断标准,意义,作为前列腺癌的辅助诊断项目,可用来监测前列腺癌疗效,判断预后.m免疫浊度测定的基本原理是(1)基本原理:免疫浊度测定是将液相内的沉淀试验与现代光学仪器和自动分析技术相结合

37、的一项分析技术.当可溶性抗原与相应的抗体特异结合,在二者比例合适、并有一定浓度的电解质存在时,可以形成不溶性的免疫复合物,使反应液出现浊度.这种浊度可用肉眼或仪器测知,并可通过浊度推算出复合物的量,即抗原或抗体的量.(2)类型：按测量方式可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法.按测定速度可分为速率比浊法和终点比浊法.p评价ria中常用的b/f分离(1)吸附法:是用吸附剂吸附小分子游离的ag(f),离心沉淀,大分子的结合物ag-ab(b)留在上清中,以达到分离目的.优点:方法简便、分离迅速、分离完全、价廉;缺点:分离效果和重复性常受吸附剂、相对表面积、被吸附抗原分子大小、电荷分布及其作用时间、温度

38、、离子强度、ph值等因素影响(2)化学沉淀法:ria反应条件接近抗体的等电点,加入聚乙二醇等蛋白质沉淀剂可破坏蛋白分子表面的水化层而使蛋白沉淀,从而分离b与f.优点:方法快速、简便、沉淀完全;缺点:非特异沉淀游离标记物较多,受温度和ph影响较大(3)双抗体法:利用抗抗体和ag-ab复合物中的抗体结合,形成更大免疫复合物,离心沉淀即可分离b与f.优点:特异性强,非特异结合少,操作方便,可重复性好;缺点:反应时间长,沉淀物较少,抗抗体用量大(4)pr试剂:将双抗体法和peg结合起来的沉淀法,可弥补各自的不足,分离效果好,适用范围广(5)固相分离法:将抗体或抗原结合在固相载体上,利用固相抗体或抗原分

39、离b和f,具有简便、快速、适合于自动化分析等特点,已逐步取代传统的液相分离方法.r如何进行补体单个成分的测在30多种补体成分中,主要检测c3、ca、c1q、b因子和c1酯镁抑制物.测定方法分为免疫溶血法及免疫化学法.免疫溶血法:主要根据抗原与其特异性抗体（igg、igm型）结合后可激活补体的经典途径,导致细胞溶解.该方法中抗原为srbc,抗体为兔或马抗srbc的抗体,即溶血素.将两者组合作为指示系统参与反应免疫化学法:分为单向免疫扩散法、火箭免疫电泳、透射比浊法和散射比浊法.前两种方法已逐渐趋于淘汰,后两种方法通过仪器对补体的c3、c4、b因子等单个成分进行测定.待测血清标本的c3、c4成分适

40、当稀释后与检测用相应抗体结合形成复合物,反应介质中的peg可使该复合物沉淀,仪器对复合物产生的光散射或透射信号进行自动检测,并换算成所测成分的浓度单位。s试述免疫血清应如何进行纯免疫血清的纯化是指提纯免疫血清中的igg并去除无关的杂抗体.提纯igg类抗体的方法有:硫酸胺盐析法粗提、离子交换层析法和亲和层析法,采用亲和层析法提取igg时,可使用纯化抗原或葡萄球菌蛋白a交联sephamse 4b制成层析柱.另外,还可通过吸附法获得单价特异性抗血清.方法是将不含特异性抗原的杂抗原与戊二醛等双功能试剂混合制成固相吸附剂,吸附免疫血清中的杂抗体,或将杂抗原交联于sephamse 4b上,通过亲和层析去除

41、杂抗体。试述荧光偏振免疫测定基本荧光物质经单一平面的偏振光蓝光照射后,可吸收光能跃入激发态;在恢复至基态时,释放能量并发出单一平面的偏振荧光（波长525nm）.偏振荧光的强度与荧光物质受激发时分子转动的速度成反比.大分子物质旋转慢,发出的偏振荧光强;小分子物质旋转快,其偏振荧光弱医学教育网整理.利用这一现象建立了荧光偏振免疫测定,用于小分子物质特别是药物的测定。试述酶免疫组化技术的应用提高病理诊断的准确性激素受体及生长因子的检测对预后及治疗的意义癌基因蛋白的临床应用对肿瘤细胞增生程度的评价指导肿瘤的治疗病原微生物的检查.试述ii型超敏反应靶细胞损在ii型超敏反应中,机体针对变应原产生igg和i

42、gm类抗体,与靶细胞膜上的相应抗原特异性结合,通过以下三条途径造成靶细胞损伤激活补体经典途径,形成膜攻击复合物,导致靶细胞溶解破坏调理吞噬作用,igg类抗体与靶细胞特异性结合后,通过fc段与吞噬细胞表面相应受体结合或通过补体裂解产物c3b与吞噬细胞表面相应受体结合,可促进吞噬细胞对靶细胞的吞噬和破坏作用adcc效应,与靶细胞结合的igg通过fc段与nk细胞表面相应受体结合,触发nk细胞的杀伤机制,使靶细胞溶解破坏。试述自身免疫性疾病检测的预防和控制病原体的感染,避免因自身组织细胞的抗原性发生改变和交叉抗原诱发的免疫应答,同时也避免感染引起的抗原提呈细胞和t细胞的激活使用免疫抑制剂如环孢霉素a、fk-506、皮质激素、中药雷公藤治疗主要以抗体引起的自身免疫病,用th2因子治疗主要以t细胞引起的身身免疫病特异性抗体治疗,如用抗cd3单抗,抗炎症性细胞因子单抗等疫苗激发免疫耐受.如口服ii型胶原等自身预防和治疗类风温关节炎等.试述恶性与良性单克隆免疫恶性:症状一般为骨髓瘤或淋巴瘤症状,几乎都出现贫血,溶骨性损害很普遍,骨髓象中浆细胞10%,形态正常或异常,m蛋白常高于20g/l,随病情而增高,正常ig降低游离轻链常出现在血清和尿中良性:一般无症状或原