离体小肠平滑肌的生理特性

1、一实验目得1、学习离体小肠平滑肌灌流得实验方法；2、证明小肠平滑肌具有自动节律性与紧张性活动,观察若T刺激对离体小肠运动得影响。 二实验原理动物得胃肠逍由平滑肌组成，胃肠道平滑肌除具有肌肉得共性，如兴奋性、传导性与收缩性 之外，尚有自己得特性，主要表现为紧张性与自动节律性收缩，可以形成多种形式得运动，主要 有紧张性收缩，蠕动。此外，胃还有明显得容受性舒张，小肠还有分节运动及摆动。如果将动物 得小肠平滑肌离体.放置在各种化学成分、渗透压、pin温度以及气体供应等因子十分接近 机体得内环境得溶液中时，可保持离体小肠段长时间地存活下来,并可以观察到小肠平滑肌得 自动节律性、紧张收缩性、伸展性与对机械

2、牵拉、温度刺激、化学刺激十分敏感，而对电刺 激与切割刺激不敏感等一系列特性。通常用台式液做灌流液，将小肠得一端固宦，另一瑞连张 力换能器，即可通过一泄得记录装置记录下小肠肌得收缩曲线。三使用仪器、材料1、仪器:细线，注射器,恒温平滑肌槽，计算机生物信号采集处理系统，张力换能器，万能支架，螺 旋夹,双凹夹，温度计,橡胶管，制氧机等。2、材料:台氏液,1 :5000肾上腺素,1:1 0000乙酰胆碱CaC12溶液，lmol/LHCl溶 液,lmol/LN a OH溶液，阿托品等。四、实验步骤1、开启恒温平滑肌槽电源,使其恒温工作点定在3 7摄氏度、2、猝死兔子，剪取2-3 c m长得十二指肠，用台

3、氏液漂洗，置于低温台氏液中备用。3、连接种仪器，将小肠得两端分别与标本固定钩与张力换能器连接,让制氧机正常为台氏 液供氧，进入计算机生物信号采集处理系统。4、先后观察、记录37摄氏度台氏液中得肠段节律性收缩曲线,待中央标本槽内得台氏液温 度稳眾在37摄氏度后，停氧lm i n，记录肠段节律性收缩曲线，恢复供氧，待台氏液中得小 肠稳左后，分别换成229,4 5 °C得台氏液，记录肠段肖律性收缩曲线。再灌流3 7°C台氏液 待肠段活动恢复后，依次滴加Imol/LNaO II溶液,1 m o 1/LHC1溶液，1 %C a C I 2溶液 1 ：500 0肾上腺素.1:10 0

4、00乙酰胆碱，阿托品观察肠段收缩曲线得改变、每次实验在观察 到明显变化后，都应用预先准备好得37°C台氏液冲洗3次。五实验结果及分析(1 )缺氧对离体小肠活动得影响从图一可以瞧岀，正常情况下，离体家兔肠段收缩频率为1 7次/ min,收缩张力最小值为 26. 8g,最大值为35g。对浴槽内得离体小肠停氧得瞬间可以瞧到基线明显上移接着又下降分析：在缺氧情况下，家兔离体肠段收缩频率与强度都略有下降，但在缺氧瞬间上移得基 线就是小肠对生理需要得适应，故收缩有所加强但时间很短。从实验得到得数据可以说明， 氧气也就是影响小肠活动得因素，缺氧时对小肠收缩活动有抑制作用。(2)低温对离体小肠活动得

5、影响离体小肠在适宜得温度下，其节律为17次/m i n,小肠收缩张力最小为1 6 g,最大张力 为35.4 g0用25°C得台氏液代替3 7 °C得台氏液后,可以瞧到基线先上移后下降，但下降后 得基线仍较原来基线水平高，此时其节律变为12次/min,小肠收缩张力最小为1 最大 为 37. 3,2/m i n,收缩幅度变小。小肠平滑肌收缩活动明显受抑制,原因就是小肠活动对温度变化刺激 敏感，温度降低抑制小肠收缩活动、(3 )高温对离体小肠活动得影响如图三所示，离体肠段在适宜得温度37°CT,正常节律为1 6次/ m i n ,灌流4 5C得台氏液后，小肠右律性收缩曲

6、线基线先上移后下降回原水平，其节律增加为19次/ min,幅度 先增加再减小，后恢复到接近原来水平。增加。肠管平滑肌对温度改变极为敏感，也反映出酶对温度得敏感。(4) NaOH对离体小肠活动得影响如图四所示，正常情况下，小肠平滑肌收缩得右律为1 6次/min,收缩张力最小为2 6. 1 吕,最大为47.1g,滴加入1滴Imol/mL立0H后，可以明显得瞧到基线上移后恢复回原水平,其节律为1 6次/ min,收缩张力最小为20g,最大为60 g,其收缩强度增加，幅度增大。 张力第分析:在加入NaOII溶液1滴后，可见小肠活动加强，幅度增加，基线上移。加入NaOH后，此时 溶液得pH比较适合酶得活

7、性作用，有利于小肠各种酶发挥作用，使小肠活动加强。如果所加 入得Na O II量过多，上述现象就不会出现，因为酶得活性受到破坏。(5)HC1对离体小肠活动得影响如下图五所示，正常情况下小肠平滑肌收缩节律为17次/m i n,小肠收缩张力最小为2 1。6g,最大为44. 5 go在恒温浴槽中加入一滴1 M II C 1后，基线略有下降，廿律减少为1 6次/min,小肠得收缩幅度减小，小肠收缩最小张力为14.5g,最大为21. 8g。分析:加入lmol/ L盐酸溶液1滴后，离体肠管活动减弱，收缩幅度降低，频率变慢。加入盐酸 后,H+浓度升高，跨膜电位改变,Ca2 +禽子通道活性受到抑制，使得Ca

8、2 +内流减少。(6)CaCl对离体小肠活动得影响如图六所示，正常情况下，小肠收缩节律为1 6次/m i n,小肠平滑肌收缩张力最小为 25. 2g,最大为3 5 g,在恒温浴槽中加入2滴Cacl后,基线没有明显变化，收缩频率为17 次/mi n,其收缩张力最小为1 6。7,最大为30go卜张力增4 正常4- CaCl.40图六CaCl对离体小肠活动得影响(12、5s/Div)单位:s分析:加入1%氮化钙溶液2滴后，离体肠管活动盯律增强，理论上加入氯化钙后，Ca 2 +浓度升髙，而Ca2+对小肠平滑肌得收缩与紧张都有促进作用。但实验结果并非如此，原因可 能就是加得Ca2+得量过少使Ca2+浓度

9、变化很微弱，得不到实验结果。(7)肾上腺素对离体小肠活动得影响从图七可瞧;出，正常情况下,离体肠段收缩肖律为1 6次/min,平滑肌收缩最小张力为3 3。5g,最大张力为46。8g,加入1:500 0肾上腺素后，基线明显下降，小肠节律性收缩曲线 征12、5s后接近于一条水平线，在大约7 5 s后收缩曲线开始缓慢恢复到原水平、张力:g4正常4膏上朋1素|胡训NIIHMW艸川IJIwl图七肾上腺素对离体小肠活动得影响(1 2。5 s /Di v )单位:$分析:加入1 :5 0 00肾上腺素2滴后，可见禽体肠管活动减弱,收缩频率变慢，幅度减小以R基 线下移。因为肾上腺素主要终止于壁内神经丛中得胆碱

10、能神经元抑制其释放乙酰胆碱，引起 消化道运动减弱,腺体分泌抑制与血流量减少(8 ) A c h对离体小肠活动得影响从图八可瞧岀，离体肠段在适宜得温度37°C下，正常节律为17次/min,离体小肠收缩 张力最小值为28 g ,最大值为32。8 g、加入2滴1 :100 0 0A c h后,基线上移，收缩得节律 仍为17次/min维持不变，收缩张力最小值为4 0g,最大值为6 0 g,英收缩幅度明显增大。图八Ac h对离体小肠活动得影响(1 2. 5s/Di v )单位:$分析:加入1 :10000乙酰胆碱2滴(约0。2ml)后，离体肠管活动增强，曲线幅度增加。出加 上述现象，其原因就是

11、肠道内神经元副交感卩后纤维主要乙酰胆碱能纤维，兴奋时末梢释放 乙酰胆碱，能够增加消化道运动与腺体分泌，使平滑肌收缩,肌张力增加。但实验数据显示加 入乙酰胆碱后，苴收缩频率没有改变，其原因可能与加入乙酰胆碱得量及浓度有关。(9)阿托品对离体小肠活动得影响可从图九瞧出，在乙酰胆碱之后滴加入阿托品,离体肠段收缩曲线得基线明显下降，且收 缩频率减小由1 7次/m i n变为16次/mim收缩强度明显减小，说明阿托品对离体小肠活动有 抑制作用、张力:gJ左射诃托晶ru0K40和210划恤 加0 图九阿托品对离体小肠活动得影响(1 2. 5s/Di v)单位:$°分析:阿托品可阻断乙酰胆碱对消化

12、器官得兴奋作用、阿托品(A t r。)就是M受体阻赫药，为 竞争性拮抗剂，联合用药可阻断M受体，对抗乙酰胆碱得M样作用抑制小肠平滑肌运动，使肠管收缩幅度降低。(10)实验数据汇总表项目节律变化振幅变化基线变化停氧lmin降低降低先上移后下降回原来 状态22°C台氏液明显降低略有升髙先上移后下降45°C台氏液明显升髙先升髙再降低先上移后下降回原水 平IM NaOH无明显变化明显增大先上移后恢复回原水 平1MHC1略有下降降低略有下降l%CaCl略有上升降低无明显变化1:5000肾上腺素明显降低明显降低明显下降1 :1000 0乙酰胆 碱无明显变化明显增大明显上移A c h+阿托品降低明显降低明显下降2)3)2、六.实验讨论1。注意事项：1)每做一个离子或试剂对肠道得影响实验时，都要更换台氏液,并淸洗干净保持肠道活性 正常、所加得试剂得量不要过大，防止肠道受到不可恢复得破坏。做各种因数对肠道得影响时，都要做对照组。