半微量定氮法

1、凯氏氮GB11891-89凯氏氮是指以凯氏（kjeldahl）法测得的含氮量。它包括了氨氮和在此条件下能被转化 为铵盐而测定的有机氮化合物。此类有机氮化合物主要是指蛋白质、胨、氨基酸、核酸、 尿素以及大量合成的，氮为负三价态的有机氮化合物。它不包括叠氮化合物、联氮、偶 氮、腙、硝酸盐、亚硝酸盐、腈、硝基、亚硝基、肟和半卡巴腙类的含氮化合物。由于 一般水中存在的有机氮化合物多为前者，因此，在测定凯氏氮和氨氮后，其差值即称之 为有机氮。测定凯氏氮或有机氮，主要是为了了解水体受污染状况，尤其是在评价湖泊和水库的 富营养化时，是一个有意义的指标。概 述1. 方法原理水样中加入硫酸并加热消解，使有机物中

2、的胺基氮转变为硫酸氢铵，游离氨和铵盐 也转变为硫酸氢铵。消解时加入适量硫酸钾以提高沸腾温度，增加消解速率，并加硫酸 铜（或硫酸汞）为催化剂，以缩短消解时间。消解后液体，使成碱性蒸馏出氨，吸收于硼酸溶液中，然后以滴定法或光度法测定 氨含量。如以硫酸汞为催化剂，则消解时形成汞铵络合物。因此，在蒸馏时应同时加入适量 硫代硫酸钠，使络合物分解。2. 方法的适用范围当凯氏氮含量较低时，可取较多量的水样，并用光度法测定氨量。含量较高时，则减少取样量，并用酸滴定法测氨。试料体积为50ml时，使用光程长度为10mm比色皿,最低检出浓度为0.2mg/L。3. 水样的保存水样如不能及时测定时，应加入足够量的硫酸，

3、使pH<2，并在4C保存。仪 器(1) 凯氏定氮装置：500ml凯氏烧瓶、氮球、直形冷凝管和导管。或配有100ml凯氏定氮烧瓶的半微量水蒸气蒸馏定氮装置。试 齐I实验用水均用无氨水。(1) 硫酸(p =1.84g/ml)。(2) 硫酸钾(K2SO4)。(3) 硫酸铜溶液：称取5g硫酸铜(CUSO4.5H2O)溶于水，稀释至100ml。(4) 氢氧化钠溶液：称取500g氢氧化钠溶于水，稀释至1L。(5) 硼酸溶液：称取20g硼酸溶于水，稀释至1L。步 骤半微量法(1) 取样体积的确定：参见下表，移入100ml凯氏瓶中。凯氏氮含量与相应取样量水样中凯氏氮含量(mg/L)取样体积(ml)-40

4、5040-802580-20010200-4005(2) 消解：加2.5ml硫酸，0.4ml硫酸铜溶液，1.2g硫酸钾和数粒玻璃珠，混匀。置通风柜内，加热煮沸至冒三氧化硫白烟，并使溶液变清，调节热源使继续保持煮沸30min.放冷。用少量水使消解后溶液定量移入半微量定氮蒸馏装置，其总量不超过30ml（3）蒸馏：加入10ml氢氧化钠溶液，通入水蒸气蒸馏，用20ml硼酸溶液吸收蒸出的氨,接取馏出液至50ml。（4）氨校准曲线的绘制吸取 0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00、10.0 ml 铵标准使用液于 50 ml 比色管 中，加水至标线，加1.0 ml酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5

5、 ml纳氏试剂，混匀。放 置10min后，在波长420nm处，用光程20mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。由测得的吸光度，减去零浓度空白管的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含 量（mg）对校正吸光度的校准曲线。（5）水样的测定 分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样 （使氨氮含量不超过0.1mg），加入50 ml比色 管中，稀释至标线，加 1.0 ml酒石酸钾钠溶液。 分取适量经蒸馏预处理后的馏出液，加入50 ml比色管中，加一定量1mol/L氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线，加 1.5 ml纳氏试剂，混匀。放置10min后，同校 准曲线步骤测量吸光度。（6）空白试验：用水代替水样，与水样测

6、定相同操作步骤进行空白测定。计 算由水样测得的吸光度减去空白试验吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量（叩）。氨氮（N, mg/L） =- X 1000v式中，m-由校准曲线查得氨氮量（mg）；V水样体积（ml）。测得的氨氮量，即为凯氏氮量。精密度和准确度五个实验室用本方法测定凯氏氮为 986.9mg/L的统一样品，室内相对标准偏差1.0%;室间相对标准偏差4.3%;相对误差-0.6%注意事项(1) 如采用酚盐法(或水杨酸法)测氨时，则应改用0.01mol/L硫酸溶液为吸收液。(2) 蒸馏装置应注意使连接处不漏气，并防止倒吸。(3) 蒸馏时应避免暴沸，否则，可致使吸收液温度增高，造成吸收不完全而使测定结果 偏低。(4) 蒸馏时必须保持蒸馏瓶内溶液呈碱性，如在蒸馏期间，瓶内液体仍为清澈透明，则 在蒸馏结束后，滴加酚酞指示液测试。必要时，添加适量水和氢氧化钠溶液，重新 蒸馏。(5) 对难消解的有机氮化合物，可增加消解时间，亦可改用硫酸汞为催化剂。硫酸汞溶 液的制备如下：硫酸汞溶