EISA酶联免疫吸附实验_第1页
EISA酶联免疫吸附实验_第2页
EISA酶联免疫吸附实验_第3页
EISA酶联免疫吸附实验_第4页
EISA酶联免疫吸附实验_第5页
已阅读5页，还剩8页未读， 继续免费阅读

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

1、酶联免疫吸附实验(elisa)中山医学院免疫学教研室中山医学院免疫学教研室 目的和要求目的和要求v掌握elisa的原理、操作过程及注意事项v了解elisa实验结果的读取和分析实验原理实验原理v借助酶标记抗体（或抗原）在体外与抗原（或抗体）结合，通过相应底物被酶解后出现显色反应。反应颜色深浅与抗原（或抗体）量的多少有关。v特点：灵敏、特异v类型： 双抗体夹心法、竞争法、间接法等 双双抗夹心法抗夹心法elisa 竞争法竞争法 elisaelisa实验材料实验材料vbsa包被的测定板v酶标抗鼠igg抗体v待检血清，阳性血清，阴性血清v洗涤液： pbs吐温-20v底物液：邻苯二胺（opd）v终止液：1

2、0% h2s04实验步骤实验步骤加入加入稀释稀释好的待测血清每孔好的待测血清每孔100100ul， 3737孵育孵育30min30min加入加入100ul100ul酶标抗体酶标抗体, 37, 37孵育孵育30min30min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min洗板洗板3 3次次, ,每次每次1min1min实验步骤实验步骤加入加入100ul100ul邻苯二胺底物液邻苯二胺底物液避光室温孵育避光室温孵育10min10min终止反应终止反应: :每孔加每孔加1 1滴滴1010硫酸硫酸结果观察结果观察注意事项注意事项u加样加样：应将所加物加在：应将所加物加在elisaelisa板孔的底部

3、，并板孔的底部，并注意不可溅出，不可产生气泡。注意不可溅出，不可产生气泡。u洗板洗板：每次洗液加入后，应静置：每次洗液加入后，应静置1 1分钟使清洗分钟使清洗更加彻底。末次洗板尽量将水甩干。更加彻底。末次洗板尽量将水甩干。u液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动轻晃动3030秒，秒，混匀混匀液体。液体。u底物有底物有毒性毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，尽量避，终止液对皮肤有腐蚀性，尽量避免接触。免接触。将待测血清将待测血清1:1001:100稀释后，再做倍比稀释到各孔，稀释后，再做倍比稀释到各孔，每孔每孔100l100l，见表。注意，见表。注意混匀混匀。1:1001:2001:4001:8001:16001:32001:64001:12800阴性阴性血清血清阴性阴性血清血清100ul血清稀释及加样血清稀释及加样1:1001:20

人人文库> 全部分类> 生活休闲 > 科普知识

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论