ch13 遗传病的断

1、l 由于遗传病的治疗还没有理想的方法，目前临由于遗传病的治疗还没有理想的方法，目前临床遗传的重点是床遗传的重点是如何诊断遗传病如何诊断遗传病，特别是，特别是产前产前诊断诊断，以达到防止有遗传缺陷的患儿出生。，以达到防止有遗传缺陷的患儿出生。l 遗传病诊断方法除普遍性诊断原则（即通过对遗传病诊断方法除普遍性诊断原则（即通过对病史、症状、体征并进行必要的辅助性检查外，病史、症状、体征并进行必要的辅助性检查外，还必需要有还必需要有遗传学的特殊诊断手段遗传学的特殊诊断手段（家系分析、（家系分析、染色体检查、肤纹分析、携带者的检出等）。染色体检查、肤纹分析、携带者的检出等）。 （prenatal dia

2、gnosis）遗传病大多有遗传病大多有家族聚集现象家族聚集现象,因此因此病史的采集尤为重要。病史的采集尤为重要。采集过程中要本着采集过程中要本着准确和详尽准确和详尽的原则。除询问的原则。除询问一般病史外，应着重患者的一般病史外，应着重患者的家族史家族史、婚姻史婚姻史和和生生育史。育史。大部分遗传病都是一般临床症状和该病特有的临床症状混杂，需要临床医生在实践中积累经验，分出主要矛盾、次要矛盾，结合病史、家族史和实验室检查确诊！ 临床上经常应用的生物化学检测方法是检测临床上经常应用的生物化学检测方法是检测和和。产前诊断中常采集绒毛、羊水、脐带血和皮肤。产前诊断中常采集绒毛、羊水、脐带血和皮肤。新生

3、儿的筛查最常用的标本是新生儿的筛查最常用的标本是和和。测定患者测定患者浓度或浓度或的的浓度是否增高，可获知是否缺乏浓度是否增高，可获知是否缺乏，从而诊断，从而诊断是否患有是否患有。 苯丙酮尿症可使患儿神经系统受到不可逆转损害，如能早苯丙酮尿症可使患儿神经系统受到不可逆转损害，如能早期发现并在出生后期发现并在出生后36周内开始治疗，可使患儿正常发育。周内开始治疗，可使患儿正常发育。基因诊断是基因诊断是利用利用dna重组技术重组技术直接从直接从dna水平水平检测类遗传性疾病的基因缺陷。检测类遗传性疾病的基因缺陷。是根据碱基互补配对的原则，利用是根据碱基互补配对的原则，利用标记探针标记探针鉴定鉴定d

4、na或或中特定基因顺序中特定基因顺序的一种方法。的一种方法。是在体外快速扩增特异性是在体外快速扩增特异性dna片断片断地技术，使能够达到足够分析的纯度和量。地技术，使能够达到足够分析的纯度和量。l pcr的模板的模板dna可以来自一个细胞，一根头可以来自一个细胞，一根头发、一滴精斑等都可以得到有效的扩增。发、一滴精斑等都可以得到有效的扩增。southern blot限制性片段长度多态性限制性片段长度多态性 （restriction fragment length polymorphism, rflp）l 人群中不同个体基因的核苷酸序列存在差异，人群中不同个体基因的核苷酸序列存在差异，称称dna

5、dna多态性。多态性。l dndn序列上发生变化而出现或丢失某一限制性序列上发生变化而出现或丢失某一限制性酶切位点，使酶切产生的片段长度和数量发生酶切位点，使酶切产生的片段长度和数量发生变化称为变化称为rflp。dna自动测序仪生成的序列自动测序仪生成的序列dna自动测序仪采用4种不同颜色的荧光分别标记4种双脱氧核苷酸，基本实现了测序自动化。 dna芯片芯片l 指把成千上万个寡核苷酸或指把成千上万个寡核苷酸或cdnacdna探针密集、规探针密集、规律地排列在律地排列在1cm1cm2 2大小的硅片或玻璃芯片上，容大小的硅片或玻璃芯片上，容量可达量可达20204040万个基因探针。万个基因探针。l

6、 将荧光标记的将荧光标记的dnadna或或cdnacdna样品送到在芯片上与样品送到在芯片上与探针杂交，通过激光共聚焦显微镜获取信息探针杂交，通过激光共聚焦显微镜获取信息, , 以以计算机系统对荧光信号做出比较和检测，可迅速计算机系统对荧光信号做出比较和检测，可迅速得出所需的信息，比常规方法快几十到几千倍。得出所需的信息，比常规方法快几十到几千倍。 dna microarray：患者好发年龄在：患者好发年龄在40岁左岁左右，此时患者已经生儿育女，很有可能将致病右，此时患者已经生儿育女，很有可能将致病基因传给子代。如能在可疑杂合子基因传给子代。如能在可疑杂合子就就作出诊断，就能避免影响子代。作出

7、诊断，就能避免影响子代。主要针对某些主要针对某些的杂的杂合子个体，患者往往发病年龄合子个体，患者往往发病年龄。又称宫内诊断，是对胚胎或胎儿在出生前是又称宫内诊断，是对胚胎或胎儿在出生前是否患有某种遗传病或先天畸形作出准确的诊断。否患有某种遗传病或先天畸形作出准确的诊断。有高风险和危害较大的遗传病；有高风险和危害较大的遗传病；l主要用于检查主要用于检查1818周以后周以后胎儿胎儿先天畸形。先天畸形。lx x射线对胎儿有一定影响，射线对胎儿有一定影响，现已极少使用。现已极少使用。l 是一项简便对母体无痛无损伤的产是一项简便对母体无痛无损伤的产前诊断方法。前诊断方法。b b超应用最广。超应用最广。l

8、 可用于可用于多胎妊娠，羊水过多，无脑多胎妊娠，羊水过多，无脑儿、脊柱裂、脑膜膨出、多囊肾、儿、脊柱裂、脑膜膨出、多囊肾、肢体短小等发育迟缓肢体短小等发育迟缓的诊断。的诊断。l 利用超声波还可直接对胎心和胎动利用超声波还可直接对胎心和胎动进行动态观察，并可摄像记录分析，进行动态观察，并可摄像记录分析，亦可作胎盘定位，选择羊膜穿刺部亦可作胎盘定位，选择羊膜穿刺部位，可引导胎儿镜操作位，可引导胎儿镜操作. .。l 又称为羊膜腔镜或宫腔镜，是一种带有羊膜穿刺的又称为羊膜腔镜或宫腔镜，是一种带有羊膜穿刺的双套光导纤维内窥镜。可于怀孕双套光导纤维内窥镜。可于怀孕15211521周进行操作。周进行操作。l

9、 主要用于胎儿血的取样、活检和产前诊断。也可对主要用于胎儿血的取样、活检和产前诊断。也可对胎儿形态异常进行直接观察，此外还可判定胎儿性胎儿形态异常进行直接观察，此外还可判定胎儿性别和对某些遗传病进行宫内治疗。别和对某些遗传病进行宫内治疗。l 该技术如果操作不当，会引起流产、母体免疫反应该技术如果操作不当，会引起流产、母体免疫反应等，所以应用受到一定的限制。等，所以应用受到一定的限制。亦称羊水取样。抽取羊水最佳时间是妊娠亦称羊水取样。抽取羊水最佳时间是妊娠16-1816-18周，周，因为此时羊水量多、胎儿浮动，穿刺时进针容易，因为此时羊水量多、胎儿浮动，穿刺时进针容易，且不易伤及胎儿。且不易伤及

10、胎儿。目前，羊膜腔穿刺术是胎儿产前诊断最常用、最目前，羊膜腔穿刺术是胎儿产前诊断最常用、最有效手段之一有效手段之一羊膜穿刺术：羊膜穿刺术：l 可在可在b b超监视下经宫颈部取样，一般于妊娠超监视下经宫颈部取样，一般于妊娠7-97-9周进周进行。行。l 绒毛枝经处理或经短期培养后进行染色体分析、酶绒毛枝经处理或经短期培养后进行染色体分析、酶和蛋白质检测和基因分析。和蛋白质检测和基因分析。l 优点是取样时间早，一旦作出明确诊断，需要进行优点是取样时间早，一旦作出明确诊断，需要进行选择性流产时，不会给孕妇带来更多的损伤和问题。选择性流产时，不会给孕妇带来更多的损伤和问题。绒毛吸取术绒毛吸取术l 在在

11、b b超引导下经抽取胎儿脐静脉血，一般于孕中超引导下经抽取胎儿脐静脉血，一般于孕中期、孕晚期（期、孕晚期（17221722周）进行。周）进行。l 脐血可作染色体或血液学各种检查，亦可用于因脐血可作染色体或血液学各种检查，亦可用于因羊水细胞培养失败，羊水细胞培养失败，dnadna分析无法诊断而能用胎分析无法诊断而能用胎儿血浆或血细胞进行生化检测的疾病，或在错过儿血浆或血细胞进行生化检测的疾病，或在错过绒毛和羊水取样时机下进行。绒毛和羊水取样时机下进行。l 这是一项这是一项非创伤性非创伤性产前诊断技术，并易于被孕妇接受。产前诊断技术，并易于被孕妇接受。l 胎儿循环中的淋巴细胞，粒细胞，有核红细胞等

12、可以通过胎盘屏障渗透漏入母体血液循环，一般在妊娠 第5-6周 即可出现，其中有核红细胞是最佳侯选细胞 。l 但在母体外周血细胞中胎儿细胞仅占1/105-1/106 ，如何从中有效识别和富集胎儿细胞是一个尚待解决的问题。l 是利用微操作技术和dna扩增技术对胚泡植入前进行检测。l 植入前 (着床前) 遗传诊断适用于体外受精试管婴儿体外受精和体外受精和胚胎移植胚胎移植胚胎移植前遗传病诊断胚胎移植前遗传病诊断preimplantation genetic diagnosis, pgdl pgd是在体外受精技术、分子生物学和显微操作的基础上，对受精三天后的胚胎在种植前，检查其正常后再移植到子宫的一项新技